[기초유전학실험]4-5

소개

실험서입니다.

목차

1. Abstract

2. Introduction

3. Material & Method
1) Material
2) Method

4. Result

5. Discussion

본문내용

5. Discussion

▶ plasmid preb & insert purification의 결과에 대한 고찰
plasmid preb사진을 보면 여러 개의 band가 형성되는 것이 보인다. 사실 우리가 제한효소로 잘라주지 않았기 때문에 추출한 plasmid의 형태는 polynucleotide가 완전 할 때, 즉 공유 결합적으로 닫힌 원형 DNA상으로 유지가 되고 있을 것이다. 따라서 대부분 이중나선 DNA 가닥이 끊어있지 않고 매우 꼬여있는 Supercoiled형태를 띄고 있어야 할 것이다. 하지만 Supercoiled의 형태 외에도 Nicked Open-Circular이나 Linear의 형태의 band가 형성되는 것으로 봐서는 과정 중에 DNA 손상이 일어나서 plasmid가 끊어져 버렸다는 것을 알 수 있다.
insert purification의 전기영동 사진을 보면 band가 전에 비해 흐려진 것을 볼 수 있는데 이는 정제과정을 거치면서 DNA의 일부가 손실되고 씻겨내려 갔기 때문이다. 또한 정제한 PCR product에서 잔상이 보이지 않는 이유는 불필요한 것을 정제과정에서 PCR Column의 core를 통해 크기가 작은 불필요한 물질을 Column 아래로 통과시키면서 제거해 버렸기 때문이다.

▶ 정량 및 정성 분석 하는 두 가지 방법의 장단점 설명 (gel 전기영동 & spectrophotometer)
- 전기영동법에 의한 DNA의 농도계산은 비교적 방법적으로 간편하다. 전기영동 후 나타나는 band의 크기나 밝기로 양을 알 수 있으며, band의 형성정도를 보고 순수한지를 알 수 있다. 그러나 밝기나 크기 등의 비교는 눈짐작으로 하는 것이기 때문에 지극히 주관적이라서 계산하는 사람마다 차이가 있을 수 있어 정확성이 떨어진다.

참고자료

· 생화학 제 5판 . Marry K.Campbell 외 저. 곽한식 외 역. 라이프사이언스 2007
· 유전공학(제2판). James D. Watson 외 저. 박영순 외 역. 탐구당 2002
· 생명과학 속의 기초 유전자학 및 유전정보 활용의 길라잡이 .이형환 외 저. 월드사이언스 2006
· Reproductive & developmental biology 25권 3호. 강용국 외 4명. 한국동물번식학회.