[면역학][서울대] FACS를 이용한 인간 혈액 PBMC 분석

소개

[서울대학교]
면역학 실험 레포트입니다.

실험내용은 아래와 같습니다

PBMC(peripheral blood mononuclear cell) 안에는 B와 T lymphocyte, macrophage, dendritic cell, NK cell 등의 면역세포들이 포함되어 있다. 이 PBMC는 인간 및 여러 동물군의 면역 실험에 많이 이용되고 있는 세포군이다. 이번 실험은 총 2가지 방법으로 진행되는데, 우선, 인간 혈액으로부터 PBMC만을 분리해서 혈액 속 면역 세포들을 순수하게 획득할 것이다.
분리한 면역세포들의 표면에는 CD 분자들이 있는데, 두 번째 실험은 이 분자들을 통해 세포군 들을 나누고 측정하여 변화 정도를 확인한다. 이러한 변화 측정에는 Flow cytometry라는 세포분석 기계를 사용한다(FACS).

목차

1. Introduction
2. Method
3. Results and Discussion
4. References

본문내용

PBMC(peripheral blood mononuclear cell) 안에는 B와 T lymphocyte, macrophage, dendritic cell, NK cell 등의 면역세포들이 포함되어 있다. 이 PBMC는 인간 및 여러 동물군의 면역 실험에 많이 이용되고 있는 세포군이다. 이번 실험은 총 2가지 방법으로 진행되는데, 우선, 인간 혈액으로부터 PBMC만을 분리해서 혈액 속 면역 세포들을 순수하게 획득할 것이다.
분리한 면역세포들의 표면에는 CD 분자들이 있는데, 두 번째 실험은 이 분자들을 통해 세포군 들을 나누고 측정하여 변화 정도를 확인한다. 이러한 변화 측정에는 Flow cytometry라는 세포분석 기계를 사용한다(FACS).
전체적인 실험 내용을 다시 요약해 보면, 우선 첫 번째 실험에서 혈액으로부터 PBMC를 분리해 내고, 2번째 실험에서 면역세포들의 구성과 변화를 살펴보는 것이 이번 실험의 목적이다.
2. Method
1) 첫 번째 실험 방법
① 50ml 실험관에 Ficoll을 채워넣는다
② PBS와 피를 1:1로 섞은 후 흔들어준다.
③ PBS와 피를 섞은 ②번 용액을 8ml만큼 취해서 Ficoll과 섞이지 않게 넣는다
※ 섞지 않게 넣는 이유 : 1. 섞이면 적혈구가 파괴되어 분리시 용이하지 않다.
2. 애초에 섞이면 PBMC만 분리하기 어렵다.
④ Centrifuge
☞ 실험관 속에 밑에서부터, 혈구 > Ficoll > PBMC > Plasma 순으로 쌓이게 된다.

참고자료

· 없음