gpc 기법을 이용한 단백질의 분리

소개

화학공학- FPLC 실험 결과 레포트입니다.

목차

1. 목적
2. 이론
3. 실험장치 및 실험방법
4. 실험결과

본문내용

1. 목적
GPC 기법을 이용해 각 시료들의 단백질을 분리하여 시료의 분자량을 측정한다.

2. 이론
GPC 분석을 수행하는데 있어서 가장 중요한 기준은 고분자를 녹일 수 있는 적당한 용매를 찾는 것이다. 사소한 일처럼 보이지만 GPC가 용액내 고분자의 크기에 따라 분리하는 기술인 것을 기억해라. 고분자 사슬은 용액 내에서 풀어질 것이고 선택된 용매는 이것의 크기가 어떠한 지를 결정할 것이다. 많은 고분자들이 상온의 다양한 용매 내에서 녹을 수 있고 가끔 (특히, 매우 결정화된 고분자들) 용해하는데 고온이필요하기도 한다. GPC 시료 준비에 있어서 또 다른 중요한 점은 농도 선택이다. 만약 컬럼에 들어가는 시료의 mass loading이 매우 크다면, 부정확한 용리 부피를 유발하는 농도나 점성도 영향을 유발할 지 모른다. 또 다른 고려사항은 고분자 용액을 여과할 것인지 아닌지 이다.

2-1 GPC
GPC는 다공성 입자를 충진한 column을 이용하여 액체에 용해되어 있는 혼합물의 각각의 분자량 차이를 이용해서 분리하는 방법 중 대표적인 방법이다.
고분자의 분자량(M.W.)과 분자량 분포(MWD)를 결정하는 가장 기본적인 방법으로서 용출법에 의한 액상-고상형의 액체 크로마토크래피의 일종으로 이미 분자량을 알고 있는 표준 시료(standard sample)와 비교하여 새로운 시료(unknown sample)의 상대 평균 분자량과 분자량의 분포를 결정하는데 사용된다.

2-1-1 GPC의 장점
실험준비과정이 비교적 간단하고 측정주기가 짧고 상대적이지만 믿음직한 결과를 얻을 수 있으며 재현성이 가능하다는 것이다. GPC를 통한 분자량과 분자량 분포측정은 비교적 짧은 시간에 결과를 얻을 수 있는 방법으로서 고분자화학뿐만 아니라 생화학, 유기화학 등 기타 여러 방면에서도 많이 쓰이고 있으며 화학분야에서 이미 중요한 분리와 분석도구로 사용되고 있다.

2-1-2 GPC 실험원리
아래 그림과 같이 여러 가지 분자량을 가진 용질이 용해되어 있는 용액을 충진

참고자료

· (1) http://blog.naver.com/ssman0001?Redirect=Log&logNo=70068383963
· (2) 김진환 외 4명, “고분자과학”. 시그마프레스, 1995
· (3) MALCOLM P. STEVENS, “고분자 화학 입문”, 자유아카데미, 2003