[바이러스학 실험] cell culture & cell seeding

목차

1. 실험 날짜

2. 실험 제목

3. 실험 목적

4. 실험 방법

5. 추가 조사
1) 동결보존(cryopreservation)
2) 동결보호제
3) 동결보존법

6. 참고문헌

본문내용

Ⅱ. 실험 제목
cell culture & cell seeding

Ⅲ. 실험 목적
바이러스와 관련된 실험을 진행하기 위해 필요한 세포를 seeding하여 실험을 준비하는 과정에 대해서 알 수 있다.

Ⅳ. 실험 방법
Cell Culture - Subculture 방법
1. 25T Flask 안에 있는 배지를 제거한다.
2. DPBS 1mL 사용하여 Flask를 washing 후 제거한다.
3. 0.05% Trypsin/EDTA 200µl를 넣고 37°C에서 1분간 반응시켜 붙어있는 cell을 분리한다.
4. 2mL 배지를 사용하여 떨어뜨린 cell들을 모아 15mL tube에 옮긴다.
5. pipetting 후 그중 100µl를 1.5mL tube에 옮긴 후 trypan blue 100ul를 섞어준다.
6. 그중 10µl를 사용하여 cell을 counting 후 계산한다.
7. 남아있는 cell들을 200 RCF, 5분간 centrifuge한다.
8. Pellet만 남긴 후, 새로운 배지 1mL을 넣어주어 cell들을 resuspension한다.
9. 25T Flask에 새 배지를 넣은 후, 0.7 x 10^6 cell의 양만큼 flask에 넣어 준다.
10. 37°C, 5% CO2에서 incubation한다.

참고자료

· 김유강. “무혈청 배지를 이용한 Chinese Hamster Ovary 세포의 동결보존.” 석사학위, 건국대학교 대학원, pp. 8-9, 2006.
· 박지성. “누에 혈림프 유래 Storage-protein 2를 이용한 중간엽줄기세포의 동결보존.” 석사학위, 인하대학교 일반대학원, pp. 27-31, 2014.
· “냉동보존.” 네이버 지식백과. n.d. 수정, 2025년 03월 25일 접속, https://terms.naver.com/entry.naver?docId=423682&cid=60261&categoryId=60261
· "Cryopreservation Methods and Frontiers in the Art of Freezing Life in Animal Models." IntechOpen. last modified Nov 11, 2021, accessed Mar 26, 2025, https://www.intechopen.com/chapters/79909