Gene knockout 레포트

목차

1. 서 론
2. 재료 및 시약
3. 결 론
4. 고 찰

본문내용

본 실험의 목적은 Saccharomyces cerevisiae(이하 S. cerevisiae)의 유전체 중에서 특정 유전자인 Target gene을 Marker gene으로 Knock-out하여 형질전환을 이루어내는 것이며, 그 phenotype을 관찰하여 본래의 Target gene의 기능이 무엇인지 알아내는 것에 실험의 의의가 있다. 실험에서의 Target gene은 효모의 MET2 gene이며 Marker gene은 pRS306의 URA3 gene이다.
S. cerevisiae는 분자 생물학이나 세포 생물학의 진핵 모델 생물이며 다양한 세포 내 과정을 이해하는 데 중요한 생물 종으로 특히 세포분열과 세포주기 연구, 염색질 구조와 기능 등을 연구하는 데 널리 활용되고 있다. S. cerevisiae는 아주 간단한 조성의 영양배지에서도 쉽게 자라며 대량 배양이 가능하다. 또한 고등 식물과 동물과는 대조적으로 효모는 반수체(1n) 또는 이배체(2n) 상태에서 무한 증식이 가능하다. 이런 모든 특성은 효모가 유전학 연구에 매우 편리한 모델임을 말해 준다. 마지막으로 이 실험에서 가장 중요하게 작용하는 점으로, S. cerevisiae는 형질전환이 가능해서 상동재조합을 통해 새로운 유전자를 추가하거나 유전자를 제거하는 것이 가능하다.
이 실험의 핵심은 Gene Knock-out 기술이다. 흔히, 알려지지 않는 유전자의 기능 분석을 위해서는 그 유전자를 무력화하여 그러한 무력화가 생물체에 어떤 결과를 초래하는지가 분석된다. 이를 위해서, 어떤 기능적 단백질에 대한 유전정보를 삭제하는 효소를 이용하여 그 유전자의 DNA 단편들을 자른다. 그 방법을 Gene knockout이라고 한다. 이 과정은 주로 상동 재조합에 의해 일어난다.

참고자료

· Burton E. Tropp (2011), Tropp의 분자생물학 (3판), 박영인 외 20인, 월드사이언스
· T. A. Brown (2012), 유전자 클로닝과 DNA 분석 (6판), 이병무 외 3인, 월드사이언스
· 이대실 (1991), 분자생물학노트 (3판), 한국과학기술연구원 생명공학연구소
· 유전자 넉아웃을 보상하는 또다른 유전자, 2021-10-14, https://gtp.or.kr/antp/new_tech/list_all.jsp?left=1
· 출아형효모, 2021-10-13, https://terms.naver.com/entry.naver?docId=5569092&cid=61233&categoryId=61233
· 상동재조합, 2021-10-13, https://terms.naver.com/entry.naver?docId=5751331&cid=61233&categoryId=61233