WST-1 기반 세포 생존율 분석 실험

본 내용은 " [세포생물학및실험] Determination of cell viability (A+) " 의 원문 자료에서 일부 인용된 것입니다. 2025.06.17

문서 내 토픽

• 1. WST-1 Assay

  WST-1은 수용성 tetrazolium 염으로, 살아있는 세포의 세포막 표면에서 NADPH 의존적으로 환원되어 수용성의 노란색 formazan을 생성한다. MTT assay와 달리 별도의 유기용매 용해 과정이 필요 없어 세포 독성을 유발하지 않으며, 실험이 간편하고 처리 후 세포를 추가 분석에 사용할 수 있다는 장점이 있다. 450nm 흡광도에서 측정하여 세포 생존율을 정량적으로 평가할 수 있다.

• 2. Cell Viability 측정

  Cell viability는 세포 집단 내에서 살아있는 건강한 세포의 비율을 측정하는 지표로, 특정 화학물질의 세포 독성을 평가하는 데 사용된다. 세포막의 무결성과 세포질의 기능을 유지하는 생존 세포와 세포막이 손상된 죽은 세포를 구분하여 정량화한다. Trypan Blue 염색, propidium iodide 등 다양한 방법으로 측정 가능하며, 최근에는 비파괴적 실시간 분석 기술이 개발되고 있다.

• 3. IC50 (반억제 농도)

  IC50은 특정 조건에서 생물학적 시스템의 반응을 50% 수준으로 억제하는 데 필요한 물질의 농도를 의미한다. 본 실험에서 1.0 μg/mL 농도에서 세포 생존율이 40.9%로 50% 이하로 감소하였으므로, IC50은 1.0 μg/mL 미만으로 추정된다. 약물의 독성 평가에서 핵심적인 정량 지표로 활용되며, 정확한 값 산출을 위해서는 세분화된 농도 구간에서의 추가 실험이 필요하다.

• 4. Tetrazolium 기반 세포 생존율 측정법

  MTT, MTS, XTT, WST-1 등 다양한 tetrazolium 염을 이용한 세포 생존율 측정 방법이 있다. MTT assay는 불용성 보라색 formazan을 생성하여 유기용매 용해가 필요하지만, WST와 XTT는 수용성 formazan을 생성하여 직접 흡광도 측정이 가능하다. 각 방법은 감도와 정밀도에 차이가 있으므로 실험 목적에 따라 적절한 방법 선택이 중요하다.

Easy AI와 토픽 톺아보기

• 1. WST-1 Assay

  WST-1 assay는 세포 생존율 측정을 위한 효율적이고 신뢰할 수 있는 방법입니다. 이 방법은 미토콘드리아의 탈수소효소가 WST-1을 포르마잔으로 전환시키는 원리를 이용하여 살아있는 세포의 수를 정량화합니다. 기존의 MTT assay에 비해 WST-1은 더 빠른 결과를 제공하며, 세포에 독성이 적고 분석이 간편합니다. 특히 고처리량 스크리닝에 적합하며, 다양한 세포주에서 일관된 결과를 얻을 수 있다는 장점이 있습니다. 다만 특정 화학물질이나 항산화제의 영향을 받을 수 있으므로 실험 설계 시 이를 고려해야 합니다.

• 2. Cell Viability 측정

  세포 생존율 측정은 약물 개발, 독성 평가, 세포 생물학 연구에서 필수적인 기술입니다. 다양한 측정 방법이 존재하며, 각각의 원리와 장단점을 이해하고 연구 목적에 맞는 방법을 선택하는 것이 중요합니다. 형광 기반 방법, 효소 기반 방법, 이미징 기반 방법 등이 있으며, 정확성, 처리량, 비용 등을 고려하여 최적의 방법을 결정해야 합니다. 또한 측정 시점, 세포 배양 조건, 시약의 농도 등 여러 변수가 결과에 영향을 미치므로 표준화된 프로토콜 준수가 필수적입니다.

• 3. IC50 (반억제 농도)

  IC50은 약물의 효능을 평가하는 중요한 지표로, 특정 생물학적 활동을 50% 억제하는 약물의 농도를 나타냅니다. 이 값은 약물의 효력을 비교하고 최적의 치료 용량을 결정하는 데 필수적입니다. IC50 측정은 정확한 용량-반응 곡선 분석을 통해 이루어지며, 통계적으로 신뢰할 수 있는 결과를 얻기 위해서는 충분한 데이터 포인트와 반복 실험이 필요합니다. 다만 IC50 값만으로는 약물의 전체적인 효과를 완전히 평가할 수 없으므로, 최대 억제율, 선택성, 부작용 등 다른 약동학적 특성도 함께 고려해야 합니다.

• 4. Tetrazolium 기반 세포 생존율 측정법

  Tetrazolium 기반 방법은 세포 생존율 측정의 가장 널리 사용되는 기술 중 하나입니다. MTT, XTT, WST-1 등 다양한 tetrazolium 염료가 개발되었으며, 이들은 모두 살아있는 세포의 미토콘드리아 탈수소효소에 의해 불용성의 포르마잔으로 환원되는 원리를 이용합니다. 이 방법은 간단하고, 빠르며, 비용 효율적이고, 자동화가 용이하다는 장점이 있습니다. 그러나 특정 약물이나 화학물질이 tetrazolium 염료의 환원을 직접 영향을 미칠 수 있으므로, 위음성 또는 위양성 결과가 발생할 수 있습니다. 따라서 결과 해석 시 이러한 제한사항을 항상 고려해야 합니다.