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Crystal Violet Assay 세포생존력검사, 세포독성검사 결과 레포트2025.05.111. Crystal Violet Assay 이번 실험에서는 in vitro 상에서 세포의 독성에 영향을 미치는 약물을 농도에 따라 처리해 세포의 생존력을 확인하고자 한다. Crystal Violet Assay 방법을 통해 농도별 cisplatin 투여시 B16F10 cells의 control 대비 세포 생존력을 확인할 수 있다. 2. 세포독성검사 세포독성 검사는 생체(in vivo)에서 하는 방법과 생체 외(in vitro)에서 하는 방법으로 분류할 수 있다. 생체 외에서는 주로 배양된 세포나 조직을 재료로 하는 경우가 대부분이다....2025.05.11
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CHO 세포 현탁 배양 실험 결과 보고서2025.01.041. CHO 세포 특성 이 실험의 목적은 CHO 세포의 특성을 알아보고, 직접 현탁 배양된 세포의 생존율을 Hemocytometer와 Countess II를 이용하여 측정하는 것입니다. CHO 세포는 포유류 세포주로, 생물공정 실험에 널리 사용되는 세포주입니다. 이 실험을 통해 CHO 세포의 특성과 현탁 배양 시 세포 생존율을 확인할 수 있습니다. 2. 현탁 세포 배양 실험 방법에 따르면, 먼저 CHO 세포가 배양되어 있던 플레이트의 오래된 배지를 버리고 FBS로 세척하였습니다. 그 후 세포 계수를 위해 EP tube에 옮겨 담았습...2025.01.04
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MTT assay A+ report2025.01.171. MTT assay MTT assay는 세포 대사 활성을 색 변화로 측정하는 실험으로 세포 독성 실험이라고도 한다. Tetrazolium salt인 MTT를 살아 있는 세포에 처리하면, 미토콘드리아 안의 oxidoreductase enzyme(NADPH)에 의해 환원되어 보라색을 띠는 formazan 결정체를 형성한다. 죽은 세포의 경우, 미토콘드리아가 터져 없으므로 formazan이 형성되지 않고, 색을 띠지 않는다. 이렇게 생성된 formazan은 비수용성으로, 유기용매 또는 계면활성제 등에 녹여 570nm에서 흡광도(세포의...2025.01.17
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MTT assay를 통한 세포 viability 측정2025.01.051. MTT assay MTT assay는 살아있는 세포에서만 환원 반응이 일어나는 MTT에 의한 세포 대사 활성을 평가하는 방법입니다. 항암제를 투여하지 않은 배지와 농도별로 항암제를 처리한 배지의 UV 흡광도 값을 비교하여 세포의 생존 비율(cell viability)을 계산할 수 있습니다. 실험 결과, DOX의 농도가 증가할수록 세포 생존율이 감소하는 것을 확인할 수 있었습니다. 2. 항암제 독성 평가 항암제를 세포 배양배지에 투여한 후 배양한 암세포는 약제의 농도에 따라서 생존 세포의 비율이 줄어듭니다. MTT assay를 ...2025.01.05
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생물공정실험 예비보고서_Mammalian Suspension Cell Culture2025.01.041. 세포 배양 이 보고서는 동물 세포 배양에 대한 기술을 다루고 있습니다. 주요 내용은 세포 계대 배양, 부착형 세포 배양, 부유형 세포 배양, 세포 성장 패턴, CHO 세포주 등입니다. 세포 배양 기술은 치료용 단백질 생산 등 다양한 생물공정에 활용되는 핵심 기술입니다. 2. 세포 계수 및 생존율 측정 보고서에서는 혈구계수기와 트리판 블루 염색을 이용한 세포 계수 및 생존율 측정 방법을 설명하고 있습니다. 이를 통해 배양 중인 세포의 건강 상태를 확인하고 최적의 배양 조건을 찾을 수 있습니다. 3. CRISPR-Cas9 유전자 ...2025.01.04
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Annexin V/PI/DAPI(Hoechst 33258) staining을 통한 세포 생존 여부 및 세포 죽음 종류 구분2025.01.181. 세포 괴사(Necrosis) 세포 괴사는 외부의 강한 물리적인 힘, 화학 물질 등에 의한 심한 자극으로 인해 세포가 죽어가는 과정이며, 현미경을 통해 관찰하면 세포가 부풀어올라, 세포막과 세포 소기관들이 부풀어 올라 터지게 되고, 핵은 크기가 커지며 핵막의 구분이 불명확해지고 염색질이 부분적으로 응축되는 현상이 발생한다. 2. 세포자연사(Apoptosis) 세포자연사는 일련의 세포 변화에 의해 일반적으로 진행되는 능동적인 과정으로, 생리학적으로 세포 증식과 세포 발달이 일어나는 중에 조직에서 일정한 세포를 유지하기 위한 반응이...2025.01.18
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[만점 레포트] 연세대학교 생화학실험(1) 13주차 원심분리를 이용한 마우스 혈액면역세포 분리2025.05.041. 마우스 말초혈액 단핵세포 분리 마우스 말초혈액에서 단핵세포를 원심분리 방법을 이용하여 분리하는 실험 내용이 포함되어 있습니다. 말초혈액 단핵세포에는 림프구, 단핵구, 자연살해세포 등이 포함되며, 이를 분리하여 면역학 연구에 활용할 수 있습니다. 2. 림프구 아집단 분리 말초혈액 단핵세포에는 다양한 림프구 아집단이 포함되어 있습니다. 이 실험에서는 원심분리를 통해 림프구 아집단을 분리하는 방법이 설명되어 있습니다. 이를 통해 각 림프구 아집단의 특성을 연구할 수 있습니다. 3. 세포 생존율 측정 분리된 말초혈액 단핵세포의 생존율...2025.05.04
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MTT assay (WST-8 assay)2025.01.181. Tetrazolium Tetrazolium은 dehydrogenase 등의 효소에 의해 쉽게 환원되어 유색의 formazan을 형성한다. 이러한 원리로 가장 널리 사용되는 MTT tetrazolium은 노란색 수용성 기질로, 미토콘드리아에 있는 reductase에 의해 환원되어 청자색을 띄는 비수용성의 MTT formazan 이라고 불리는 crystal을 형성한다. 따라서 세포사멸에 의해 미토콘드리아가 제 기능을 하지 못하게 되면 MTT를 처리해도 formazan을 형성하지 못하게 된다. 2. MTT assay MTT assa...2025.01.18
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인천대학교 나노바이오실험(2) A+ 자료) 5. Hemocytometer를 이용한 세포 수 산정2025.01.051. Hemocytometer를 이용한 세포 수 산정 이번 실험에서는 hemocytometer를 이용하여 세포 부유액에 있는 세포의 수를 현미경으로 측정하여 단위 세포수를 계산해보았다. Hemocytometer는 혈액 속의 혈구의 개수를 정확하게 계산하기 위해 만들어진 도구로, 사각형 모양의 슬라이드와 유리 뚜껑으로 구성되어 있다. Cell counting은 현미경을 통해 보았을 때 1 mm2인 정사각형의 격자무늬 안에 있는 세포의 수를 계산하고 4개를 평균치 내어 평균치 X를 도출하였다. 이후 희석배수를 포함한 2104을 곱하여 ...2025.01.05
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세포막 통한 물질이동 방법2025.01.141. 확산 용액 속에서 이온이나 분자 같은 용질은 높은 농도의 영역에서 낮은 농도의 영역으로 이동하며, 양쪽 농도가 같아질 때까지 고농도에서 저농도로 용질이 이동한다. 이 과정은 ATP를 소모하지 않는다. 2. 삼투 선택적 투과막을 통해 물이 농도가 낮은 곳에서 높은 곳으로 확산한다. 물은 극성 분자이지만 크기가 작아서 인지질 분자 사이 또는 물 통로를 지나서 세포막을 통과할 수 있으며, 이 과정 또한 ATP를 소모하지 않는다. 3. 촉진확산 형질막에 있는 운반 단백질을 이용하여 농도가 높은 곳에서 낮은 곳으로 분자가 확산되는 과정...2025.01.14
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