Resume of EmmaMobile: 000 000 000Page 1 of 1EMMA000 Atkinson Street, Oakleigh, VIC3166Mobile: 0000 000 000Email:Career Goal3+years’ experience in a trading company, as an administration assistant. I look forward to the opportunity to bring my previous skills and experience in the global manufacture as a Logistics assistant.Skills SummaryIndustry Skills· Matching of purchase orders and invoices for unit price, quantity and total amount· Answering calls and emails to provide customer service for 50+ customers· Checking inventory levels and processing orders with 5+ overseas suppliers· Ensuring that inbound shipments have processed from forwarders· Keeping account records and carrying out banking· Performing office support activities such as managing email inbox and office suppliesCommunication Skills· Interacting with the coworkers and customers positively and friendly· Liaising with customers politelyPersonal Skills· Previous experience in similar positions· Advanced MS Office in particular MS Excel· Strong attention to detail and accuracy· Willing to learn new skills and systems and processes effectively· Being able to multitask and work under pressureWork HistoryAdministration Assistant 2016-XXX Company, Oakleigh· Produce Quotes and Invoices· General bookkeepingAdministration Assistant 2011-2014XXXX ? Chemical trading company, Korea· Answered calls and emails for customer’s enquiries· Checked stocks and processed orders with overseas or locally suppliers· Generated and prepared purchase reports quarterly· Assisted manager in accounting jobs such as checking expenses and bankingNutritionist 2008-2010XXX Secondary college ? School Lunch service, Korea· Purchased food ingredients and kitchen tools· Ensured that purchase orders and invoices were matched correctly· Kept the food hygiene safety and recorded all the cooking process· Interacted with food suppliers friendly and politelyEducation and TrainingWork Skills Program 2017XXX Education, OakleighBachelor of Food & Nutrition Degree 2008XXX University, KoreaInterests···
김인식의 위대한 도전을 읽고....2009년 3월 열린 WBC는 대한민국의 희망을 보여준 날이었다. 또한 한국 야구에 대한 세계인의 편견을 깨트리고 놀라운 실력을 보여준 대표 팀의 중심에는 ‘위대한 도전’을 실행에 옮긴 김인식 감독이 있었다. 일본과의 결승전에서 끝내 승리의 여신은 한국을 외면했지만, 김 감독은 메이저리그도 일본 야구도 넘어설 수 있는 기량과 뚝심을 보여주었다. 그리고 인내와 선수들에 대한 믿음은 현재 방향을 잃고 방황하는 우리 현실에 진정한 리더의 자질을 보여주었다. 이러한 김인식 감독의 리더십을 담은 ‘김인식의 위대한 도전’ 을 읽으면서 졸업학년의 부담감과 걱정으로 지쳐있던 내 자신을 다시금 돌아볼 수 있는 시간이었다.1라운드 일본에게 콜드게임 패를 당하였지만, 순위결정전 일본과의 경기에서 1대 0이라는 박빙의 승부는 김 감독의 뚝심과 선수들에 대한 믿음이 없으면 불가능한 일이었을 것이다. 결국 4강까지 진출하여 대회 출전국 중 메이저리거만 22명의 선수가 있을 만큼 최강팀이었던 베네수엘라를 꺾고 결승전에 진출한 한국야구는 김 감독의 말처럼 ‘위대한 도전’ 향해 전진하고 있었다. 그러나 마지막 마침표를 찍지 못했지만, 메이저리그 전문가들마저 “한국 야구는 진정한 빅볼”이라며 한국팀의 실력을 높이 평가할 만큼 한국야구의 위상을 드높일 수 있었다.김감독은 조기은퇴, 뇌경색 등 그야말로 실패와 좌절로 점철된 인생을 살았다. 그러나 그는 좌절과 실패를 성공삼아 마침내 정상의 자리에 우뚝 섰다. 그는 큰 경기에 패해도 절대 선수들을 나무라지 않는다. 승리보다는 패배에서 더 많은 교훈과 힘을 얻을 수 있다고 생각하기 때문이다. 우리들은 실패를 두려워하여 맞서기보다 당장의 실패에서 도망 가버리는 경우가 많다. 그러나 항상 성공만 있는 것은 아니다. 김 감독의 선수들에 대한 가르침처럼 실패를 통해 더 많이 배우고 느껴야 성장할 수 있는 힘을 기르고 그 속에서 가능성을 발견할 수 있는 것이다.사람을 기르는 스포츠 지도자에게 가장 필요한 덕목은 기다림, 곧 인내이다. 선수의 기량보다는 인성을 중요시하고, 선수의 현재 능력보다는 장래성에 초점을 맞춘 김 감독의 인내심은 대 선수들을 수두룩히 길러낼 수 있었다. 수많은 시련을 무릅쓰고 인내와 끈기로 성공을 이뤄냈기에 이 시대에 존경받는 스포츠 지도자가 된 김 감독의 모습은 미래에 대한 나의 불안감과 조바심을 누그러뜨렸다.대회기간 중에 김인식 감독은 라이벌인 일본 전력에 대한 질문에 대하여 입을 다물고 오히려 상대를 두둔하였다. 김인식 감독은 고정관념에 얽매이지 않는다. 절대 자신의 야구만이 정답이라고 주장하지 않으며 다른 지도자의 야구를 존중한다. 또한 경기에 이겨도 교만하지 않고, 져도 실망하는 법이 없다. 그래서 그의 야구에는 인간적인 감동이 있고, 늘 향기가 묻어난다.김 감독은 페넌트레이스 운영에도 정평이 나 있는 감독 중의 한 명이다. 페넌트레이스는 장기레이스이기 때문에 초반부터 성적에 욕심을 부리면 중요한 시점에 힘을 쓰지 못하는 경우가 있다. 하지만 김 감독은 욕심을 부리고 순리대로 풀어나가라고 말한다. 우리는 눈앞의 사사로운 이익에 사로잡혀 욕심을 버리지 않아 정말 중요한 순간 기회를 놓치고 만다. 김 감독의 순리야구는 우리에게 순리 인생을 깨우쳐주고 있다.WBC경기와 인터뷰에서 김 감독은 지시나 비난을 하지 않는다. 하지만 칭찬에는 후한 그의 모습을 볼 수 있었다. 선수는 물론이고, 승부를 겨루어야 하는 상대 감독에게도 칭찬을 한다. 선수들이 실수를 하더라도 눈을 질끈 감고 돌아서 버린다. 칭찬은 대표팀 선수들을 긍정적으로 만들었고, 서수들의 긍정적인 자세는 준우승의 원동력이 되었다. 진정한 리더는 사람의 마음을 움직일 수 있어야 한다. 사람의 마음을 움직이려면 벌보다 칭찬과 격려하는 자세가 중요 하다. 그동안 나는 “내 주변 사람들의 마음을 움직일 수 있는 사람이었을까?” 라는 생각을 해본다.투수 출신인 김인식 감독은 자타가 공인하는 마운드 운영의 1인자다. WBC에서도 상대에 따라 강약을 조절한 김감독의 마운드 운영이 톱니바퀴처럼 척척 맞아떨어지면서 승리를 이끌 수 있었다. 또한 김감독은 선동열 감독이 일본 주니치 시절 부진에 빠졌을 때 김인식 감독에 조언을 구하고 회복할 수 있게 만든 만큼 투수 조련에도 일가견이 있다. 이러한 결과는 꾸준한 연구와 준비가 없이는 만들어질 수 없었을 것이다.야구는 단체운동이지만 개인운동의 성향이 강한 종목이다. 특히 프리에이전트 제도로 선수들의 몸값이 천정부지로 뛰면서 개성 강한 선수가 많아 팀워크가 흐트러지는 경우가 많다. 개성 강한 선수들이 많은 팀을 맡은 감독은 카리스마 있는 지도력을 발휘해야 한다. 김 감독이 김응룡 감독의 요청으로 해태 수석코치를 맡았을 때 김응룡의 강력한 카리스마 아래 부드러운 카리스마로 개성 강한 해태 선수들을 다스렸다고 한다. 투수 운영권을 발판 삼아 보이지 않게 투수들을 배려하고 최대한 등판의 기회를 주는 김 감독에게 선수들은 믿음이 생기게 된 것이다. 우리는 흔히들 리더는 강한 카리스마와 추진력을 떠올린다. 하지만, 진정한 리더는 강한 카리스마와 함께 사람을 이해하고 배려하는 부드러운 카리스마가 조화해야하는 것이란 것을 김 감독을 통해 배울 수 있었다.
제 14장. 발효 식품의 제조실험 제목 : 발효유의 제조1. 목적 및 원리 (Principle)미생물 발효는 식품 생산에 다양하게 이용된다. 발효식품은 발효 형태에 따라 alcohol발효, 젖산 발효, 초산 발효 및 기타 발효로 크게 분류된다. 발효 식품 제조에 관여하는 유용한 미생물들은 주로 유산균, 초산균, 곰팡이 및 효모 등이다. 이들 미생물들은 탄수화물, 단백질, 지질 및 펙틴을 분해하는 가수분해효소들과 기타 효소들을 생산하며, 비타민, 필수 아미노산, 필수지방산, 항생물질, 유기산, 펩타이드, 단당류 및 방향성 물질 또는 풍미 증진 물질을 생산하여 발효식품의 가치를 높인다.유제품 발효에서 유산균은 산소를 이용하지 않으며 유당을 이용하여 젖산을 생성한다. 유산균을 우유 배지에 접종하여 일정한 시간 동안 배양하면서 젖산의 생성도를 비교해 본다.2. 재료 및 기구 (Material & Apparatus)①배지 : Skim milk medium②재료 : 시료인 요구르트, 닥터캡슐, 쾌변 , 0.1N NaOH③기구 : 비커, 시험관, 멸균 피펫, autoclave, incubator, 뷰렛, 페놀프탈레인 용액(지시약), 스포이드Sim milk---------------100.0gDistilled water-----------1.0LFinal pH 7.0시료(요구르트&쾌변&닥터캡슐)0.1N NaOH페놀프탈레인 용액(지시약)Vortex mixer적정 기구배양기(incuvator)3. 실험 방법 (Method)①시료는 ‘요구르트‘, ‘닥터캡슐’, ‘쾌변’ 3가지를 준비한다.②배지는 Skim milk medium으로 미리 멸균을 해 놓는다.③멸균배지 50ml가 담겨있는 cap tube에 각각의 시료 5ml씩을 멸균피펫으로 취하여 접종하여 vortex mixer로 혼합한다.④최초 중화적정: ③에서 멸균피펫으로 각각 시료를 10ml 채취하여 비커에 각각 담는다.뷰렛에 0.1N NaOH를 담고, 눈금을 읽는다.시료를 담은 비커에 페놀프탈레인 지시약을 1~2방울 떨어뜨린다.시료의 색이 연분홍색이 될 때까지 적정하고, 색이 변화된 지점에서의 눈 금을 읽는다.⑤적정하고 남은 시료를 37℃에서 24시간 배양한다.⑥배양 후 중화적정: vortex mixer로 응고된 시료를 균질화한다.멸균피펫으로 각각 시료를 10ml 채취하여 비커에 각각 담는다.뷰렛에 0.1N NaOH를 담고, 눈금을 읽는다.시료를 담은 비커에 페놀프탈레인 지시약을 1~2방울 떨어뜨린다.시료의 색이 연분홍색이 될 때까지 적정하고, 색이 변화된 지점에서의 눈금을 읽는다.⑥0.1N NaOH적정량을 통해 젖산(%)을 계산한다.① 시료 5㎖ 채취② 멸균배지가 담긴Captube에 담기③ 혼합④ 최초적정- 시료 10㎖ 채취⑤ 비커에 담기⑥ 페놀프탈레인 용액1~2 방울 떨어뜨리기⑧ 연분홍색으로 될 때까지 적정⑨ 남은 시료(Captube) 배양⑦ 뷰렛에 0.1N NaOH 담고받침대에 연결⑩ 배양 후 응고된 시료⑪ vortex mixer로 균질화⑫ 최종 적정- 시료 10㎖ 재취⑬ 비커에 담기⑭ 페놀프탈레인 용액1~2 방울 떨어뜨리기⑮ 뷰렛에 0.1N NaOH 담고적정 시작? 시료가 연분홍색 될 때까지 적정4. 데이터 및 계산 (Data & Calculation)최초적정배양 후 적정요구르트3.011.3쾌변3.711.1닥터캡슐3.38.1* 소비된 0.1N NaOH의 양(mL)*젖산의 계산젖산(%)=× 100? 시료의 양 = 10㎖? 젖산계수 = 0.009? 0.1N NaOH의 역가 = 1? 희석 배수 = 1- 요구르트 = 11.3 - 3.0 = 8.3- 쾌변 = 11.1 - 3.7 = 7.4- 닥터캡슐 = 8.1 - 3.3 = 4.8① 요구르트② 쾌변③ 닥터캡슐5. 결과 (result)* 소비된 0.1N NaOH의 양(mL)최초 적정배양 후 적정배양 후 적정 - 최초 적정요구르트3.011.38.3쾌변3.711.17.4닥터캡슐3.38.14.8최초최초최초최종최종최종(요구르트)(쾌변)(닥터캡슐)* 젖산젖산(%)요구르트0.747쾌변0.666닥터캡슐0.4326. 고찰 (Discussion)미생물 발효는 식품 생산에 다양하게 이용되고 있다. 김치, 주류, 요거트 등이 대표적이다. 그 중에서 요거트에서 발견할 수 있는 유산균은 유당을 이용하여 젖산을 생산한다. 따라서 젖산 생성량을 통해 품질을 평가해 볼 수 있다. 이번실험의 목적은 바로 이 유산균의 젖산 발효능을 비교해 보는 것이었다.실험에 사용된 시료는 일반 요구르트와 닥터캡슐, 쾌변 이렇게 3가지의 시료를 이용하였는데 각각 시료 균의 특징을 보면, 일반 요구르트의 균주는 Lactobacillus casei 이고, 닥터캡슐은 유산균을 두 층으로 쌓은 것이 특징이고 , 쾌변은 기능성 요구르트로 Straptococcus thermophilus, Bifido 유산균, Lactobacillus bulgaricus 로 3가지의 복합균주로 구성되어 있다. 이러한 요구르트는 쉽게 말해 우유에 유산균을 첨가하여 casein이 응고되면서 요구르트가 되는 것이라고 할 수 있다. 따라서 유산균의 배지도 우유를 주로 쓰게 되는 데 이번 실험에서 사용된 배지는 Skim milk medium이었다.먼저 10%의 Skim milk배지를 만드는데(배지10g+증류수 90g), autoclave에서 121℃,15분간 멸균하는 것이 아니라 11?에서 20분간 멸균한다. 그 이유는 121℃의 너무 높은 온도에서 멸균 시 유당이 갈변되어 색이 누래지기 때문이다. 따라서 당의 성분변화를 막기 위해 110℃에서 멸균한다. 이렇게 멸균된 배지 50ml 이 담겨있는 cap tube에 시료를 5ml를 피펫으로 채취(10%)하여 접종한다. 그리고 배양을 하기 전, 시료 10ml를 비커에 담아 중화적정을 해야 한다.? 이 실험의 목적은 젖산 발효능을 비교하는 것이고, 젖산의 양을 측정하기 위해서는 중화적정과 pH만을 측정하는 방법이 있는데 정량적으로 측정하기 위해서는 중화적정 과정을 택한다. 따라서 배양하기 전 최초 적정량과 남은 시료를 배양하고 다시 적정을 실시하여 그 차이를 통해 계산하여 젖산 량을 알아내야 하는 것이다.0.1N NaOH를 준비하여 뷰렛에 붓고, 눈금을 읽는다. 시료에는 페놀프탈레인 지시약을 1~2방울 떨어뜨리고 시료의 색이 연분홍색으로 될 때까지 적정하였다. 중화된 종말점을 찾아 눈금을 읽고 얼마만큼의 NaOH가 소비되었는지 3개의 시료를 모두 적정하여 기록하였다. 남은 cap tube의 시료는 37℃에서 24시간 배양하였다. 그리고 다음날 3시 30분에 최종 적정을 하였다. 배양기에서 시료를 꺼냈을 때는 요구르트가 만들어져 있었는데 시료가 응고된 것이 실제 요구르트와 흡사하였고 냄새도 거의 비슷했다. 응고된 것을 풀어주기 위해 vortex mix로 혼합,균질화 한 뒤 최초적정에서와 같은 과정으로 적정실험을 하여 종말점을 기록해 두었다. 이렇게 나온 결과를 가지고 계산을 하는데 계산식에서 0.1N NaOH의 역가와 희석배수가 필요했다. 역가는 얼마나 정확하게 만들었나를 보는 것을 가장 완벽하게 만들었을 때의 역가는 1이고, 만들 때마다 오차가 발생하기 때문에 달라지게 된다고 한다. 하지만 우리는 역가를 측정하여 실험하지 못했기 때문에 할수 없이 역가를 1로 보고 계산하였다. 그리고 희석과정도 거치지 않았기 때문에 희석배수 값을 1로 하였다.계산결과, 요구르트가 0.747%, 쾌변이 0.666%, 닥터캡슐이 0.432%로 요구르트에서 가장 많은 젖산이 생성된 것으로 측정되었다. 최초 적정 시에는 쾌변에서 0.1N NaOH가 가장 많이 소비되었지만 최종 적정 후 적정량의 차이는 요구르트에서 가장 크게 나타났다. 이것은 발효 후 요구르트에서 가장 많은 젖산이 생성, 즉 젖산 발효능이 높은 것이라고 생각할 수 있다.실험하기 전에는 닥터 캡슐이 가장 비싼 음료고, 기능성 요구르트라서 제일 많은 양의 젖산이 생성 될 것이라고 예상했었는데 예상과는 달리, 가장 적은 양의 젖산이 생성된 것을 볼 수 있었다. 각 시료마다 들어있는 균주가 다르기 때문에 그 생성량도 다를 수밖에 없는 것 같고 또한 적정을 했을 때 세 가지 시료의 종말점 색이 모두 같아야 하지만 조금씩은 색이 다른 것을 볼 수 있다. 그렇기 때문에 소비된 0.1N NaOH의 양이 완전히 정확하게 계산되었다고도 볼 수가 없기에 실험에서 오차가 발생했을 수도 있다고 생각된다.
제 12장. 대장균 군 검사법좋은 품질의 식품이 되려면 이들 식품에 병원성 균이 존재해서는 안 된다. 식품에 존재하는 병원성 균은 매우 종류가 많으며 어떤 경우는 비교적 적은 미생물로서 질병을 일으키기는 하나 모든 가능성이 있는 병원성 균을 모두 검출하기란 번잡하고 시간이 많이 소요된다. 따라서 식품이 위생적 품질을 측정하는 데는 동정을 실시하지 않고 총 균수나 지표 미생물을 계수하는 관계적인 방법이 사용된다. 지표미생물로서는 장구균, 연쇄상구균, 포도상구균, Clostridium등이 관심대상. 이와 같은 지표 미생물 중 하나인 대장균군은 숙주로부터 이탈 되어도 잘 증식이 되는 데 그 이유 때문에 이들 대장균 군이 식품에 발견되었다는 사실은 특정 식품이 분변 계 오염이 되었다는 결론보다는 빈약한 위생 처리의 증거로서 받아들여지는 경향이다.* 대장균군은 Gram 음성으로 호기성 또는 통성혐기성의 무포자 간균으로 유당을 분해하여 산과 gas를 생성한다. 세균 분류학상의 대장균(Escherichia coli)과 대장균군은 일치하는 것은 아니다. 대장균 군에는 Escherichia coli를 포함하여 Enterobacter속, Citrobacter속 및 Klebsiella속 등의 많은 장내 세균과에 속하는 균과 생태계에 존재하는 몇 개의 균종이 포함되어 있다. 대장균군은 분변 뿐 아니라 자연계에도 널리 분포하고 있기 때문에 종래의 식품 자체의 안전성 지표로서의 의의에 더하여 보다 안전성 높은 양질의 식품의 생산 및 유지에 필요한 환경 위생 관리상의 척도를 나타내는 오염 지표균으로 생각하는 것이 타당하다.실험 1 : 대장균군의 최확수 법1. 목적 및 원리 (Principle)대장균 군 검사법에는 액체배지 법 또는 고체배지 법 중 어느 것이나 사용할 수 있다 시료 중에 대장균 군이 존재하는 가를 검사하는 정성시험과 균수를 산출하는 정량시험이 있다. 모든 검사 방법은 추정시험, 확정시험, 완전시험의 세 가지 단계로 구성되어 있다.▶ 액체배지 배양법◎정성시험①추정 시험(Pr배양하여 gas 발생의 유무를 확인한다.②확정시험추정시험 양성의 발효관으로부터 BGLB 발효관에 이식하여 35~37℃에서 24±2시간 또는 48±3시간 배양하여 gas 발생한 BGLB발효관으로부터 1백금이를 EMB agar 또는 Endo agar평판 배지에 도말 배양하여 배양 후 녹색 금속성 광택의 전형적인 대장균군의 colony가 형성되면 시험 양성이다.③완전시험확정시험에 평판배지 위에 생긴 전형적인 대장균군의 한 개 또는 그 이상의 colony로부터 균을 타서 각각 lactose broth 발효관 및 nutrient agar 사면배지에 이식한다. Lactose broth발효관에서 35~37℃, 48±3시간 이내에 gas 가 발생한 것은 nutrient agar 사면배지의 colony에 대해서 Gram 염색, 포자 염색을 하여 Gram 음성, 무포자의 간균이 증명되면 완전 시험 양성이며 대장균 군 양성으로 판정한다.◎정량시험시료를 단계적으로 희석하여 그 일정량을 각각 적당한 액체배지에 배양하여 어느 희석단계까지 균이 발육하는 가에 따라 확률론에 의해서 미리 산출된 최확수(most probable number, MPN)표로 시료중의 균수를 아는 방법이며 대장균 군의 생균수 측정에 이용되므로 일반적으로 대장균 군의 MPN법이라고도 한다.※대장균 군의 최확수법은 추정시험을 통해 식품에 존재하는 대장균 군의 오염도를 측정하는 것으로 오염된 대장균 군의 정확한 균수의 파악보다는 최적 오염 확률치(MPN)를 산출한다.2. 재료 및 기구 (Material & Apparatus)①배지 : BGLG(brilliant green lactose bile broth)②재료 : 김밥, 날치알 롤, 냉면육수 , 멸균생리식염수③기구 : durham tube, 시험관, 10ml 피펫, 1ml 피펫, 저울, voltex mixer, stockmaker autoclave, incubatorLactose------------------------10.0gPeptone--------------어준다.③ stockmaker를 이용하여 시료를 분쇄한다.④냉면 육수는 분쇄할 필요 없이 그대로 실험에 사용한다.⑤ 3개의 시료(김밥, 롤, 육수)를 각각 10mL씩 멸균 피펫으로 취하여 각각 두개의 BGLB 시험관에 접종한다.⑥35℃에서 24~48시간 배양한다.⑦배양한 후 durham관에 gas가 생성유무를 확인한다.② 저울에 거즈 올리기 ③ 거즈위에 시료올리고 1g 달기① 멸균된 BGLB배지 준비 (김밥)거즈위에 시료올리고 1g달기(롤)④ Stomacher bag에 멸균생리식 염수와 함께 넣기(김밥)(롤)⑤ Stomacher로 분쇄⑥ 멸균 피펫으로 10㎖ 채취(김밥&롤)냉면 육수는 그대로 사용⑧ 배양⑦ BGLB 발표관에 주입4. 데이터 및 계산 (Data & Calculation)5. 결과 (result)“2개 모두 gas 생성”“B에서만 gas 발생”“A ? B모두 gas 발생되지 않음”실험 2 : 대장균군의 균수정량 법1. 목적 및 원리 (Principle)대장균 군 검사법에는 액체배지 법 또는 고체배지 법 중 어느 것이나 사용할 수 있다 시료 중에 대장균 군이 존재하는 가를 검사하는 정성시험과 균수를 산출하는 정량시험이 있다. 모든 검사 방법은 추정시험, 확정시험, 완전시험의 세 가지 단계로 구성되어 있다.▶ 고체배지 배양법◎정성시험 → 오늘 실험희석한 시료1ml씩을 petri dish에 넣고 미리 가온 용해한 desoxycholate agar배지를 분주하여 시료와 잘 섞이도록 한 후 배양하여 적색의 전형적인 대장균 군의 colony가 발생하면 추정시험 양성으로 하고 의양성의 것과 함께 lactose broth 배지의 확정시험 및 완전 시험법에 따라 시험하고 대장균 군의 유무를 결정한다.◎정량시험시험 용액 1ml 및 각 단계 희석 시험 용액 1ml에 대하여 생균수 측정법에 따라서 plate count agar 배지를 대신해 desoxycholate agar배지를 사용하여 정성시험에서와 같은 조작을 하여 배양한 후 생성된 적색 colony를 계수하여 시 9ml의 멸균생리식염수를 stockmaker bag에 넣고 저울에 단 시료를 함께 넣어준다.③stockmaker를 이용하여 시료를 분쇄한다.④냉면 육수는 분쇄할 필요 없이 그대로 실험에 사용한다.⑤세 개의 시료(김밥, 롤, 냉면육수)를 각각 멸균 피펫으로 1ml 씩 채취하여 멸균된 petri dish에 넣는다.⑥적당히 식혀둔 배지를 각 peti dish에 주입하여(약 15ml) 살살 흔들어 혼합한 뒤 응고시킨다.⑦그 위에 같은 배지 3~4ml를 표면에 흘려서 중층하고(대장균 군의 비정형적인 표면 colony의 형성을 막기 위해) 응고시킨다.⑧petri dish 를 도치하여 37℃에서 15~20시간 배양한다.⑨암적색의 colony를 양성으로 하여 대장균 군의 균수를 센다.① 배지 만들기 : 배지 4.75g + 증류수 150㎎ -> 알코올램프로 가열② 시료 저울에 1g 달기(김밥)(롤)③ 멸균생리식염수와 함께Stomacher bag에 담기(김밥)(롤)④ Stomacher로 분쇄⑤ 피펫으로 시료 1㎖ 채취(김밥&롤)육수는 그대로 사용⑥ petri dish에 넣기⑦ 식혀둔 배지 주입⑧ 3~4㎖ 중층⑨ 배양4. 데이터 및 계산 (Data & Calculation)AB5. 결과 (result)전체에서 많은 colony가 발생됨AB2~5 개의 colony 발생AB거의 발생하지 않음고찰 (Discussion)좋은 식품이 되려면 식품 중에 병원성 균이 존재해서는 안 될 것이다. 병원성 균의 지표 미생물로는 장구균, 포도상구균, Clostridium속 등 여러 가지의 종류가 있지만 이들 중 하나인 대장균군은 사람의 분변과 관련되어 식품에 발견되면 그 식품이 분변계에 오염이 되었다고 생각할 수 있다. 따라서 심각한 위생문제가 발생될 수 있고 위생적으로 안전하게 관리가 되어 있는지를 확인하는 데에 지표로서 사용되어지고 있다. 이 대장균군은 Gram 음성으로 호기성 또는 통성혐기성의 무포자 간균이다. 또한 유당을 분해하여 산과 가스를 생성하는 특징을 갖는다. 이 대장균군과 대장균을험의 Lactose배지 시료를 EMB평판 배지에 접종하여 배양 한뒤 초록색의 금속성 광택이 있는 전형적인 대장균군 집락이 발견되면 확정시험 양성이다. 마지막 완전 시험에서는 전형적인 대장균군 집락의 균을 취해 lactose배지와 사면배지에 접종, 배양 한 뒤 lactose배지에서 gas 생성, 사면배지에서 그람 음성 무포자 간균인 것이 증명되면 완전시험 양성, 대장균군 양성으로 판정되는 것이다.일단, 이번 대장균군 검사법 실험에 사용된 시료는 세가지로, 학교 도서관 매점에서 파는 김밥과, 날치알 롤, 그리고 시중에 판매되고 있는 포장용 냉면육수이다.첫 번째 실험은 위의 정성시험의 세 시험 중에서 추정시험에 해당되는 것으로 원래는 정량시험인 최확수법이지만 각 시료를 두 개의 발효관에 접종하여 gas 생성 유무만을 확인하였기 때문에 추정시험에서의 gas 생성유무 시험에 해당한다고 볼 수 있다.먼저 육수를 제외한 김밥과 롤은 액체화시키기 위해 멸균된 칼로 잘라 저울에 1g을 달고 9ml의 멸균생리식염수와 함께 stockmaker bag에 넣고 stockmaker를 이용하여 시료를 분쇄하였다. 배지는 BGLB를 사용하며, Durham관을 시험관에 거꾸로 넣은 다음 배지 10ml씩을 넣고 멸균하는 사전작업을 해야 한다. 준비된 BGLB 발효관에 시료를 각각 10ml씩 접종 하여 35℃에서 24시간 배양하였다. 배양 후 발효관에서의 gas 생성 유무를 관찰하였다. 실험에 앞서서 예상을 해봤을 때 날치알 롤에서 gas가 많이 발생할 것이라고 추측하고 있었다. 그런데 실험 결과 너무 놀랍게도 내가 자주 사 먹었던 중도 김밥에서 가장 심하게 gas가 발생한 모습이 관찰되었다. 두 개의 발효관 모두에서 발견된 것은 물론, 균이 너무 많아서인지 초록색이었던 배지가 노랗고 뿌옇게 되었고, 그로인해 durham관의 모습조차 보이지 않았다. 그리고 날치알 롤은 한 개의 발효관에서 gas가 생성되었고, 육수에서는 두 개의 발효관 모두 gas가 발생되지 않아 시료 중 가장 위생적인 것으로
대장균군의 검사법1.목적 및 원리좋은 품질의 식품이 되려면 이들 식품에 병원성균이 존재해서는 안된다. 식품에 존재하는 병원성균은 매우 종류가 많으며, 어떤 경우는 비교적 적은 수의 미생물로서 질병을 일으키기는 하나 모든 가능성이 있는 병원성균을 모두 검출하기란 매우 번잡하고 시간이 많이 소요된다. 따라서 식품의 위생적 품질을 측정하는 데는 동정을 실시하지 않고 총균수나 지표 미생물을 계수하는 관례적인 방법이 사용된다. 이와 같은 지표 미생물로서는 장구균, 연쇄상구균, 포도상구균, clostridium 등이 관심의 대상이 된다. 이들의 하나인 대장균군은 숙주로부터 이탈 되어도 아주 잘 증식이 되는데 그 이유 때문에 이들 대장균군이 식품에 발견되었다는 사실은 특정의 식품이 분변계 오염이 되었다는 결론보다는 빈약한 위생 처리의 증거로서 받아들여지는 경향이다.1)대장균군의 최확수법: 추정 시험을 통해 식품에 존재하는 대장균군의 오염도를 측정하는 것으로 오염된 대장균군의 정확한 균수의 파악보다는 최적 오염 확률치(MPN)를 산출한다.2)대장균군의 균수정량법: 식품이나 음료수에 오염되어 있는 대장균군의 균수를 고체배지를 사용한 혼합희석평판 배양법으로 추정시험에 의해 계산한다.2.재료 및 기구①배지: BGLB배지, desoxycholate agar 배지②재료: 냉면육수, 중앙도서관 참치김밥, 전문대 날치알롤③기구: durham tube, 시험관, 10mL pipette, 1mL pipette,0.1mL pipette, autoclave, incubator3.실험 방법1)대장균군의 최확수법-액체배지 배양법에 의한 정성시험(추정시험)⒜참치김밥① 멸균된 거즈 위에서 멸균된 칼로 절단하여 김밥 10g을 잰다.② 멸균생리식염수 90mL와 김밥 10g을 백에 담은 뒤(희석배수10-1)③ bag mixer에서 김밥의 형체가 거의 없어질 정도로 분쇄한다.④시험관에 durham tube를 넣고 BGLB 액체배지 10mL를 넣은 후 121℃에서 15분간 멸균해 놓는다.⑤ 멸균식염수와 함께 분쇄해둔 김밥 액체시료를 10mL를 취한다.⑥ 10mL의 액체시료를 멸균해둔 BGLB 액체배지에 접종한다.35℃에서24~48시간 배양한다.① 멸균된 거즈 위에서 멸균된 칼로 절단하여 롤을 10g을 잰다.② 멸균생리식염수 90mL와 롤 10g을 백에 담은 뒤(희석배수10-1)③ bag mixer에서 롤의 형체가 거의 없어질 정도로 분쇄한다.⒝날치알롤④시험관에 durham tube를 넣고 BGLB 액체배지 10mL를 넣은 후 121℃에서 15분간 멸균해 놓는다.⑤ 멸균식염수와 함께 분쇄해둔 날치알롤 액체시료를 10mL를 취한다.⑥ 10mL의 액체시료를 멸균해둔 BGLB 액체배지에 접종한다.35℃에서24~48시간 배양한다.③ 10mL의 냉면육수 시료를 멸균해둔 BGLB 액체배지에 접종한다.35℃에서24~48시간 배양한다.⒞냉면육수①시험관에 durham tube를 넣고 BGLB 액체배지 10mL를 넣은 후 121℃에서 15분간 멸균해 놓는다.② 냉면육수를 멸균된 피펫으로 10mL를 취한다.2)대장균군의 균수 정량법-고체배지 배양법에 의한 정량시험① 정량시험에는 desox-ycholate agar 배지를 사용한다.② 총 실험에 필요한(petrish 6개에 쓰일) 배지와 물의 양에 여유분까지 생각하여 배지는 6.75g과 물 150mL를 재서..③ agar가 가라앉지 않고 한번 끓여질 때까지 중탕한다.⑤ 시료를 넣은 petri dish에 desoxycholate agar배지를 약 20ml정도 취해준뒤 잘 혼합하여 굳혀서 식힌다.⒜참치김밥④참치김밥 10g과 멸균생리식염수 90mL와 혼합하여 분쇄한 액체시료(희석배수10-1)를 1mL 취하여... 멸균된 petri dish에 시료를 넣는다.⑥ 굳힌 배지 위에 같은 배지 3~4mL를 표면에 흘려서 중층을 한다.(대장균군은 통성혐기성으로 그 조건을 만들어 주기위해서..). 식혀서 굳혀준 뒤, petri dish를 도치하여 37℃에서15~20시간 배양한다.⒝날치알롤의 과정도 참치김밥과 같다.⒞냉면육수의 과정도 참치김밥과 같다.4.결과1)참치김밥⒜고체배지 정성시험 ⒝액체배지 정량시험2)날치알롤⒜고체배지 정성시험 ⒝액체배지 정량시험3)냉면육수⒜고체배지 정성시험 ⒝액체배지 정량시험5.고찰식품의 위생적 품질을 측정하는 데는 총균수나 지표 미생물을 계수 방법을 사용한다. 지표 미생물로는 장구균, 연쇄 상구균, 포도상구균, Clostridiumem등이 관심의 대상이 되고 이들 중 하나인 대장균군은 숙주로부터 이탈되어도 아주 잘 증식 되는데 그 이유 때문에 이 대장균군이 식품이 발견되었다는 사실은 빈약한 위생 처리의 증거가 된다.대장균군은 Gram음성으로 호기성 또는 통성혐기성의 무포자 간균으로 유당을 분해하여 산과 gas를 생성한다. 하지만 대장균군은 세균 분류학상의 대장균과 일치하는 것만은 아니라고 한다. 대장균군에는 Escherichia coli를 포함하여 Enterobacter속, Citrobacter속 및 Klebsiella속 등이 포함된다. Escherichia coli(대장균)은 사람, 동물의 장내 세균의 대표적인 균종으로 식품위생에서는 음식물의 하수나 분변오염(faecal coliform)의 지표로 삼는다. 즉, 식품에 이 균이 발견되면 직.간접적으로 접해졌음을 알 수 있다. Enterobacter속의 대표적 균인 Enterobacter aerogenes는 동물의 분변에 의한 것이 아니라(nonfaecal coliform) 식물, 토양에 오염에 의해 기원된 균으로 보통 우유의 점패를 일으킨다. Citrobacter속은 보통 식품 부패균으로 강하게 작용하진 않으며 대표적으로 Citrobacter freundii균이 있다. Klebsiella속의 대표적 균인 Klebsiella pneumoniae(폐렴간균)으로 건강한 피부나 장 같은 곳에서는 아무런 병을 일으키지 않고 기관지나 폐, 요로, 콩팥 등에 들어가는 경우 심각한 염증을 일으킬 수 있다. 즉,대장균군은 분변뿐만 아니라 자연계에도 널리 분포하여 오염지표균이된다. 이러한 대장균군의 검사법에는 주로 액체배지 배양법을 이용하는데 정성시험 즉, 추정시험, 확정시험, 완전시험의 순서로 Gram 음성, 무포자 간균이 증명되어 양성으로 판정한다는 것을 알 수 있었다. 우리는 추정시험을 통해 시료의 가스생성 유무를 눈으로 확인 할 수 있었는다. 실제 추정시험에서는시료 10mL, 1mL, 0.1mL를 5개의 배지 10mL발효관에 접종하여 배양하여 어느 희석 단계까지 균이 발육하는가에 따라 확률론에 의해서 최확수(MPN)표로 시료 중의 균수를 알 수 있지만, 이번 실험에서는 정성시험으로 대장균의 유무만 판단하였다. 냉면육수는 잘 포장되어 멸균된 후 냉장보관이 되어있던 것이기 때문에 gas생성을 거의 확인할 수 없었다. 날치알롤은 미세하게 gas가 생성된 것을 볼 수 있었고, 참치김밥은 오염정도가 심하여 배지가 뿌옇게 되어서 durham발효관을 자세히 관찰 할 수 없었는데 빛에 비추어 본 결과 발효관 대부분에 gas가 차있는 것을 알 수 있었다. 또한 고체배지 desoxycholate agar에 의해 대장균군의 colony발생을 눈으로 확인할 수 있었다. 이 또한 냉면육수에는 발견되지 않았고, 날치알롤에서는 2개정도의 colony를 발견할 수 있었고, 김밥에서는 셀 수 없을만큼의 많은 적색의 대장균군의 colony가 생성되어 양성이라고 판단할 수 있었다. 즉 중앙도서관의 이 참치김밥이 빈약한 위생 처리로 대장균군이 많이 증식 되었음을 알 수 있었다.