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미생물 동결 건조 전후의 생존도

실험제목 : 분자 생물학 기초 실험 (미생물 동결 건조 전후의 생존도)지도교수학 번이 름1. 실험 목적이 실험에서는 동결 건조시 미생물 생존에 미치는 영향인자(미생물 성숙도, 미생물 농도, 보호제 조성 및 보호제 종류)에 따른 영향을 검토하여 미생물 동결 건조 전후의 생존도(viability)를 연구한다.2. 원리 및 배경동결건조는 1909년 단백질을 보호하는 방법으로 처음 보고되었다. 얼려진 샘플들로부터 승화하는 수증기의 흡수를 위해 화학적인 건조제를 이용하였으나 후에 기계적인 Ice trap이 값비싼 건조제 대신 사용되었다. 이러한 동결 건조 공정은2차 세계대전동안 혈액의 혈장을 보호하기 위해 처음 산업적으로 이용되었다. (1940년 처음 대규모 설비가 소개되었다.) 그 후에 1970년대 세계적으로 천연두 박멸을 위한 캠페인에 힘입어 가장 널리 알려진 계기가 되었다. 처음에 많은 백신들은 작은 원심분리기 형태의 동결 건조기에서 건조되었으나. 1970년에서 1980년 사이에 동결건조의 공정은 완성되어 보다 넓고 다양한 생산물들 즉 진단시약, 호르몬, 간 추출물, 비타민, 항생제들과 혈액 등에 적용되어졌다.1980년대 새로운 항생제, 항암제, 그리고r-DNA 발효 생산물을 위한 대규모 설비의 사용은 정교한 CONTROL 시스템과 자동화된 제품 취급에 대한 필요를 불러 일으켰다. 항암제들의 일부는 극도의 독성으로 인해 작동자의 안전성을 저해할 우려가 있어 정교한 자동 정화 시스템이 개발되었고 시스템에서는 GMP를 위한 제규정에 벗어나지 않는 장비로 개선되어 1990년대 생산 공정의 Validation은 동결 건조기까지 포함되어 확장되었다.동결 건조란 건조의 한 종류로, 물질을 동결시키고, water vapor의 부분압을 낮춤으로써 얼음을 직접 증기로 만드는 승화에 의해 얻어진다. 여기서 부분압을 낮춘다는 의미는 물의 3중점 이하로 압력을 낮춘다는 것을 의미한다(6 mbar or 4.6 Torr). 낮은 압력하에서 얼음의 형태를 가지는 수분은 열 에너지를 공급함으 re-solution된다.동결 건조의 이러한 고유 성질은 “용매를 잘 흡수한다”는 그리스어로부터 유래되어 "Lyophilization"으로 명명되어 쓰인다. 물질의 중요한 구성 성분들은 얼음 결정체에 의해 승화 건조 과정 동안 고정되어 유지되며 건조된 물질의 형태는 대체로 젖은 물질의 얼려진 형태와 같고 skin를 형성하기 위한 표면으로의 분자 이동이 줄어든다. 낮은 온도에서의 건조는 손상을 최소화 시키고, 휘발성의 구성 성분을 고정시키기 때문이다.젖은 물질이 최종 포장 용기 속에 담겨지기 바로 전 멸균 여과 될 수 있고 미립자와 박테리아 오염은 감소시킬 수 있기 때문에 동결건조는 특히 주사제 생산에 유용하다.미생물 ·의학 ·약학 방면에서 수분이 많을 때는 불안정하고 또한 열에 극히 민감한 재료, 예를 들면 세균 ·바이러스 ·혈장(血漿) ·혈청 ·백신 ·항생물질 ·장기제제(臟器製劑) 등을 이 방법에 의해 －10∼－30℃의 저온에서 건조시켜 분말로 하면 상온에서 장기간 보존할 수 있고, 또 물에 대한 재용해성(再溶解性)이 뛰어난 제품을 얻을 수 있다.식품공업에서 보존 인스턴트식품의 제조시에 육류 ·어류 ·야채 ·과즙 등을 건조시킬 때, 이를테면 쇠고기 ·새우 ·야채 등을 원형 그대로 건조시키거나, 또는 수프 원료, 주스 등 건조품을 분말로 하는 것을 이 방법으로 건조시키면 향기 ·맛 등이 남고, 복수성(復水性)이 뛰어난 천연품에 가까운 상태의 인스턴트식품을 얻을 수 있다. 이러한 경우에는 약 0∼－10℃에서 건조시킨다.동결 건조의 이점은a) 열에 민감한 물질의 손상을 최소화하고 비활성화한다.b) 수분의 침투가 용이하고 부스러지기 쉬운 구조 형성c) 정밀하고 깨끗한 충진 가능.d) 빠르고 완벽한 재수화(Re-hydration) 가능 등이며동결 건조의 단점a) 장비가 비싸다는 점. (다른 건조 방법에 비해3배 이상)b) 높은 에너지 비용(다른 건조 방법에 비해2-3배 이상)c) 긴 공정시간(보통 24시간 이상의 건조사이클을 거치나 줄일 수 있다. ) 등이다.동결건 그리고 나서 결정체는 Nacl과 물의 평균 melting point에 비슷하게 온도가 점진적으로 떨어지게 된다.용액의 온도가 떨어지기 시작하면 포화가 막바지에 도달하고 용질의 결정체는 침전된다. 결국 공융점은 물질이 완전한 결정체에 도달하는 위치로 물질이 하나 이상의 용질 결정체를 포함하는 경우 유사한 현상이 나타나며 각 구성 요소의 어는점 보다 낮다.실제의 경우 대부분 용질은 결정화되지 않고 C. 이하에서 거론된 것 같이 무결정화된 형태를 갖는다. 이 경우 공융점의 온도는 없고, 미세 구조를 유지하는 동결 건조가 가능한 최고의 제품 온도가 있다. 이것을 collapse 온도라고 부른다.대부분의 동결건조는 냉각에서 정적인 방법을 사용한다. 이것들은 차가워진 표면 또는 동결건조기의 선반과의 표면 접촉에 의존한다. 멸균 제품에서는 handling과 계속적인 오염을 줄이기 위해 보통 동결건조기의 선반 위에서 얼려진다.액체의 질소를 이용하여 신속하게 동결할 수 있으나 이 같은 방법은 작은 얼음 결정체로 형성되기 때문에 주의해야 한다. 이 작은 결정체는 melting-back, collapse 또는 느린 승화 등과 같이 증기의 이탈 속도를 늦추게 한다. 이는 또한 그것 자체도 사용 전에 반드시 멸균정제 해야 한다. 만약 작은 얼음 결정이 나타나는 동결 방법을 피할 수 없다면, 상태조절 또는 온도조절을 이용하여 얼음 결정체에 성장의 기회를 주어야 한다. 이는 결정체의 성장을 위해1-2시간동안 eutectic 또는 collapse 온도이하로 제품의 온도를 유지하고 승화 시작하기 전에 재동결을 한다.2) 2단계(승화) - 승화 건조는 건조된 생산물 속에 수분이 4% w/w 내외로 줄어들고 건조 후 남은 형태는 실제로 처음 얼려진 물질과 같은 크기, 형태를 갖는다.동결 후, 증기의 부분압은 승화가 일어날 수 있도록 물의 3중점 압력이하로 감소되어져야 한다. 만약 물 분자들을 위한 일탈 경로가 자유롭다면, 1차 건조의 초기단계에 있어 승화의 속도는 선반과 접촉되는 부분에 열이 “glass”가 형성되는 collapse와 때때로 혼동된다. 그 glass는 순수한 물 얼음 결정체로 지탱되어 단단하게 나타나지만 순수한 물 얼음 결정체들은 승화되어, 그 유지물들이 제거 되면 외관상으로 건조제품이 collapse되어 불침투 물질을 형성한다. 그 현상은 일반적으로 적용되는 수없이 많은 물질의 collapse 온도를 측정했던 Mackenzie에 의해 설명되어졌다.열 대부분이 열 전도율이 낮은 얼려진 물질을 통해 전달되어지므로, 융해를 피하기 위해서는 열 변화폭이 낮고 전도된 열이 작아야 한다.열을 가한 후 증기는 제품의 외부에서부터 흘러나오며 승화율은 제품 cake의 건조된 부분의 길이가 길수록 제한된다. 매우 낮은 압력하의 건조과정에서 vial 아래쪽 제품에 융해가 없어 동결건조 될 때 열 이동에 어려움이 있다. -20℃주변이 최대의 건조온도라면, 진공 조건 하에 선반에서부터 vial의 유리 밑으로의 약한 열 전이로 인해 선반 표면 온도를 40℃까지 올리는 것이 필요할 지도 모른다. 승화율을 저해하는 어떤 것이든 melt-back 또는 collapse 그리고 제품을 파괴할 수 있다.승화 과정 동안 선반에서 제품으로의 열 이동은 진공상태를 깨뜨림으로써 증가된다. 이것은 공기 또는 건조한 질소가스를 Drying chamber속으로 주입하거나 또는 0.5mbar로 압력을 유지하기 위해 진공펌프를 조절하는 등, 대표적인 방법이다. 이것은 가열된 선반으로부터 제품용기의 밑부분으로의 대류적인 열 전달이 개선되고, 주어진 건조 비율을 위한 선반에서부터 제품까지의 온도 차이가 줄어든다.3) 3단계 (2차건조) - 탈착 또는2차 건조에서는 원하는 정도까지 (종종1% w/w내외) 수분을 줄여야 한다. 이것은 경계 수분, 결정화된 수분, glassy 물질 속에 무작위로 퍼져있는 물 , 세포 내부의 물 또는 흡수된 물 등과 같은 남아있는 수분을 제거한다. 1차 또는 승화 건조가 수반되고 그러한 수분을 탈착을 통해서 제거한다. 남아있는 수분의 양은 보통 4%w/w이 피해 입을 수 있고, 최종 수분의 양이1.5%-2%사이에서 건조 됐을 때 최고의 적정량으로 유지된다. 예로 BCG와 같은 백신들은1.5%, 살아있는 rubella, measles와 그 이외의 것들은2%, 화학 제제와 항생제 등의 다른 물질들은 최상의 결과를 위해 반드시 잔여수분이0.1%보다 낮게 건조되어야 한다. 대부분의 동결 건조된 물질들은 흡습성이 있다. 그래서 반드시 용기를 봉인해서 보관한다. 통용되고 있는 방법은 보통 건조 시 순수한 질소가스를 주입시켜 보관한다. Argon과 Helium등의 다른 기체들도 또한 사용되고 있다.skim milk 농도에 따른 동결보호효과Skim milk는 다양한 미생물의 동결보호제로 이용되고 있다. 우유에는 단백질, 지방, 탄수화물 그리고 기타 여러 성분들을 포함하고 있으며, 단백질과 당류와 같은 물질들이 세포를 보호하는 역할을 할 것이라고 추정된다. Skim milk 농도가 일정수준 증가하게 되면 보호효과 또한 일정하게 증가하다가 어느 수준에서 완만히 감소하는 경향이 있음을 알게 된다. 이것으로 동결건조과정에서 skim milk가 보호 효과가 있음을 증명한다.생존도에 영향을 주는 요인포집하지 않은 균체는 냉동보관과 냉장보관에서 생존율의 차이가 크게 나타나게 되나 포집된 경우 냉동보관과 냉장보관에 차이가 없음으로 포집한 경우에는 4℃냉장 보관하는 것이 경제적으로 바람직하다. 또한 생균수의 감소가 저장초기 2주 동안에 급격히 일어나고 그 이후에는 생균수가 거의 일정하게 유지되는 것을 알 수 있다. 저장 중 대기조건에 따른 생균수 변화는 일반 대기 조성에서 보관한 경우 포집하지 않은 균주는 14주 이내에 모두 사멸하나 포집한 경우 6개월 까지 생존한다. 또한 상대습도가 75%에 보관한 포집하지 않은 균주는 4주만에 사멸하였고 포집한 것은 포집한 종류마다 기간이 다르다. 생존율의 차이는 온도와 대기 상태에서는 거의 차이가 없으나 상대습도에 대한 영향에서는 포집한 종류마다 차이가 난다.생존수를 높이기 위해서는 초기 생균수가 높아 한다.

공학/기술| 2006.12.18| 7페이지| 2,000원| 조회(801)

건조, 동결건조, 동결, trap, 진단시약

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미생물 접종 및 배양

실험제목 : 미생물 접종 및 배양지도교수학 번이 름1. 실험 목적본 실험에서는 Labsystem사의 Bioscreen C를 이용하여 Staphylococcus aureus와 E.coil에 대해 chloramphenicol, penicillin G, streptomycin tetracycline의 SME(sub-MIC effect)를 조사한다. 또한 평원반 평판법을 이용한 미생물의 항생체 감수성 조사법으로 특정 미생물에 대한 항생제의 감수성, 중간성 내성 여부를 알아본다.2. 실험 원리 및 배경항생제란미생물이 생산하는 물질로서 저분자량이고(수천 dalton) 저농도 (1mg/ml)에서 미생물의 생육을 저해하거나 죽이는 물질로 미생물이 생산하는 대사산물로 소량으로 다른 미생물의 발육을 억제하거나 사멸시키는 물질을 뜻한다.항생제는 일정한 간격으로 지속적으로 복용하여 균을 죽일 수 있는 최소의 혈중 농도를 항상 유지해 주어야 한다. 그리고 증세가 완전히 없어진 후에도 2∼3일은 더 사용해야 한다. 증세가 없어졌다고 해도 몸 안에 균이 남아 있을 수 있기 때문에 이럴 때 항생제의 사용을 중단하면 남아 있던 균들이 내성균으로 변할 수 있기 때문이다. 내성균은 다른 균에도 내성을 전이시켜서 내성균이 계속 늘어나게 하기 때문에 내성이 생기면 항균력이 더 강한 항생제를 사용하든지 다른 계열의 항생제로 바꾸어야 한다.DHFTHFDNAmRNACell WallCytoplasmicmembraneDNA gyraseNalidixic acidorfloxacinNovobiocinDNA-directedRNA PolymeraseRifampinProtein Synthesis(50S inhibitor)ErythromycinChloramphenicolClindamycinLincomycinProtein Synthesis(30S inhibitor)TetracyclineSpectinomycinStreptomycinGentamycin, tobramycinKanamycinAmikacinNitrofuransP으로 흡수되지 않기 때문흡수도를 증가시켜 경구투여에 이용- 부작용 : 알레르기① 페니실린(penicillin)류 : 세균의 세포벽 합성을 억제함으로써 항균작용을 한다. 경구투여했을 때 일반적으로 잘 흡수되지만 초기제제들은 위산에 의해 불활성화한다. 화농성구균 등 대부분의 그람양성균과 임균·매독균 등에 강력한 효과가 있다. 페니실린에 감수성이 없는 세균감염증과 페니실린의 남용으로 생긴 내성균에 사용해서는 안된다. 부작용은 적은 편이지만 알레르기 반응에 의한 과민반응은 치명적이므로 투여하기 전에 피부반응 시험을 하는 것이 좋다.② 세팔로스포린(cephalosporin)류 : 병원균의 세포벽 합성을 억제하여 살균작용을 한다. 페니실린에 저항성이 생긴 포도상구균 등의 그람음성균뿐 아니라 프로테우스(proteus), 세라티아(serratia), 엔테로박테르(enterobacter) 등에도 효과가 있다. 경구투여를 하면 흡수가 잘 되지 않기 때문에 근육 또는 정맥주사를 사용한다. 부작용은 알레르기 반응 외에는 별로 없지만 발진, 설사, 백혈구 감소, 간 기능 이상 등이 올 수 있다.Antibiotics from Prokaryotes① 아미노글리코사이드(aminoglycoside)류 :Stereptomyces, Micromonospora, Bacillus에 의해 생산- Cyclicamino alcohol에 sugar가 결합- gram(-)에 유효, 결핵치료에 이용- gentamycin, tobramycin, kanamycin- 부작용:청신경이나 콩팥에 영향을 줌- Tetramycline Antibiotics- Streptomyces가 생산, 네 개의 육각환으로 구성- Ribosomal protein synthesis 저해- G(+), G(-)에 유효, 내성세균(resistant bacteria)에 활성을 보임- Chloro, oxytetracycline- Commercial Prodution 정제 방법1. Solvent extraction2. adsouption3. ion성균 감염에 효과가 있다. 경구투여 및 정맥 내 주사한다. 알레르기성 급·만성결막염, 결막염 등에 점안액으로도 투여하고 세균성 질염에는 좌약으로도 사용한다. 부작용으로 위장장애, 설염, 피부발진, 균교대 현상이 일어나고 특히 신생아의 경우 대사를 못하므로 복부팽창, 불규칙호흡, 신경성허탈, 혼수 및 사망까지 초래한다. 수유기의 유아, 소아, 임산부에게는 투약하지 않는 것이 좋다.폴리펩티드(polypeptide) 항생제 : 인체의 세포막에 작용하여 전신에 투여했을 때 신장 독성을 나타내므로 거의 사용하지 않지만 국소투여용으로 사용한다.퀴놀론(quinolone)류 : 광범위 항생제이다. 세균 DNA를 초코일(supercoil)로 압축하는 효소인 DNA 선회효소를 억제한다. 그람양성균과 특히 녹농균, 살모넬라 등의 그람음성균에 대해 현저한 항균력을 나타낸다. 경구로 잘 흡수되어 조직 및 세포로 잘 침투하며 대부분은 신장으로 배설된다. 부작용은 드물지만 오심·구토·발진·현기증·두통 등이 일어날 수 있다. 항진균제와 항바이러스제도 항생제에 속한다.※Macrolide Antibiotics- Streptomyces가 생산- C12이상의 right와 lactam ring, amino sugar가 결합된 형태- 단백질합성저해, 세포막 내부에 sterol을 저해 세포막 파괴- G(+)에 유효, 인체에 독성이 강하다- heptaene, Amphoericin B, erythromycin- Ansamycins- Actinmycetales에서 생산- 방향족링의 두 반대점에서 긴 탄소 사슬로 연결- 방향족링이 1개인 경우 - bengen ansamycin- 방향족링이 2개인 경우 - nepfthalene ansamycin(RNA polymerase 저해능이 강함, Rafamycin이 대표적임)- Rifamycin SV - 담관 감염 치료에 이용Rifampin - 결핵치료에 이용‘- Polypeptide & Depsipeptide Antibiotics- 다양한 종류의 미생물에 의해 생산- 내외부와의 균형을 잃게하여 사멸시키는 기전이다.4. 핵산 합성 억제RNA 합성을 위해서는 DNA에 기록된 세포의 정보가 transcription 형태로 복사가 되어야 하는데 이 과정이 방해되면 항균효과가 나타난다.5. 대사 억제세균의 필수대사물과 경쟁적으로 길항하여 항균작용을 나타내는 것을 말한다.항생제에 대한 감수성.세균은 어떤 항생제에 대하여는 처음부터 내성을 지니기도 하고 감수성이던 세균이 내성을 획득하기도 한다. 획득된 내성 에 대하여는 감수성 검사를 하기 전에는 알 수가 없어 치료에 지장을 준 다. 감수성 검사에는 디스크 확산법(disk-diffusion test)과 희석법 (dilution test)이 있는데, 디스크 확산법은 감수성, 중등도 감수성, 내성 등의 항균력의 여부만 알수 있으며, 희석법은 최저저지농도(minimal inhibitory concentration, MIC)와 최저살균농도(minimal bactericidal concentration, MBC)를 알 수 있다. 디스크 확산법은 간단하여 임상에서 많이 사용되나, 심내막염 등의 중증감염에서는 희석법으로 MIC,MBC 등을 아는 것이 도움이 된다.디스크 확산법-기초배지로 흔히 Muller-Hinton 한천이 흔히 사용되며 한천의 표면에 면봉으로 시험균주의 균액을 고르게 접종하고 그 위에 항균제 디스크를 놓는다.(주의사항:항균제 디스크를 멸균된 핀셋이나 dispenser를 이용하여 배지표면에 붙인다. 디스크 중앙간의 거리는 24 mm이상 떨어져야 하며 보통 150 mm 접시에는 12개이하, 100 mm 접시에는 5개이하의 디스크를 붙인다. 디스크는 배지 표면에 닿으면 즉시 확산되므로 한번 배지와 접촉했던 디스크는 다시 붙이지 않는다.) 디스크를 붙인 후 15분이내에 배지가 위가 되게 하여 35 배양기에 넣는다. 균종별 방법에 따라 배양한 후 억제대의 지름을 측정한다. 균종의 항균제별 억제대 지름은 자, caliper 또는 해석기준의 동심원 본 (template)을 이용하여 육안으로 th 희석법으로 균주의 MIC를 측정하며, 많은 미생물 검사실에서 이들 자동화 장비를 이용해서 편리하게 항균제 감수성 시험을 하고 있다. 그러나 이들 자동화 장비는 감수성, 중간내성 및 내성을 구분하는 breakpoint 만 시험할 수 있는 경우가 많으며, 따라서 진정한 의미의 MIC 시험이라고 하기는 어렵다. 또한 항균제의 MIC 보고가 감수성 양상 (감수성, 중간내성 및 내성)만 보고하는 것보다 치료에 더 도움이 된다는 증거도 없다[Jorgensen과 Sahm, 1995].E-test 확산법 (E-test strip method) :확산법을 이용한 항균제 감수성 시험 방법이다. 그러나 일반적인 디스크 확산법과는 달리 MIC를 측정할 수 있다. 방법도 쉽고 간편하기 때문에 통상적인 감수성 시험에 사용할 수도 있다. 그러나 Etest strip의 가격이 상당히 비싸며, 항균제당 넓은 면적의 평판배지가 필요한 단점이 있다.감수성 시험 결과의 오류감수성 시험 결과의 신뢰성을 확보하기 위해서는 참조균주 (reference strain)를 사용해서 꾸준히 정도관리를 해야한다. 한 참조 균주의 시험 결과가 오차 허용범위 내에 들었다고 해서 검사결과 모두가 정확하다고 할 수는 없다. 감수성 시험 결과가 비전형적인 경우에는 재검 혹은 균종 감별의 재확인이 필요하다.① 디스크 확산법 결과 오류의 흔한 원인ⓐ배지의 오류: 디스크 확산법에는 흔히 Muller-Hinton 한천이 사용되며, 한천의 두께가 틀리거나 배지의 성분이 잘못되면 오류가 생길 수 있다. 특히 한천의 두께는 매우 중요하므로, 반드시 4 mm인 것을 확인해야 한다. 한천의 두께가 4 mm보다 얇으면 디스크의 항균제가 더 빠르고 넓게 확산되므로 억제대의 크기가 더 커지고, 이에 따라서 내성균주를 감수성으로 판정할 우려가 있다. 반대로 한천이 두꺼우면 항균제가 느리고 좁게 확산되므로 억제대 크기가 작아지며, 따라서 감수성균주를 내성으로 판정할 우려가 있다.ⓑ디스크의 오류: 디스크의 역가가 수송이나 보관의 잘못 혹은다.

공학/기술| 2006.12.18| 8페이지| 2,000원| 조회(563)

미생물, 항생제, 내성, 균이, Dalton

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[공학]Carbohydrate analysis

실험제목 : ( Carbohydrate analysis)지도교수김은기(생물공학실험1)교수님학 번12034505이 름김혜미1. 실험 목적본 실험에서는 DNS법의 원리 및 응용에 대해서 파악하고 이 방법을 이용하여 탄수화물을 정량 분석한다.2. 실험 원리< DNS란? >3,5-Dinitrosalicylic acid(DNS)는 오직 환원당 하고만 반응한다는 점에서 picric acid와 유사하다. 이것은 환원당은 알칼리성에서 3,5-dinitrosalicylic acid의 NO2기를 NH2기로 환원시켜 적갈색의 아미노생성물을 생성하며, 그 색깔은 일련의 표준물질에 대비하여 측정될 수 있다.이 시약은 위험성이 덜하며, 당의 측정 및 비환원당을 환원당을 가수분해 함으로써 다른 당질 분획의 측정에도 널리 이용된다. 이 색소를 이용하여 비색정량하는 방법으로 조작이 간단하고 신속히 할 수 있기 때문에 많은 시료를 일시에 정량할 수 있다. 예를 들면, 자당(sucrose)을 산 가수분해에 의해 그 환원 단당류인 포도당과 과당으로 분해시킴으로써 자당의 측정에 이용될 수 있으며, 비전분성 다당류로서 식이섬유를 측정하는 마지막 단계에서 최종적 다당류 분획을 환원당으로 가수분해하는 데에도 이용될 수 있다.DNS외에도 picric acid를 환원당의 측정에 이용할 수 있다. Picric acid는 환원당과 반응하여 그 당에 의해 붉은색의 piramic acid로 환원되며, 이 산의 색깔이 비색계로 측정될 수 있다. 이 시약은 폭발성이 있어서 자연적으로 그 이용을 제한하는 요소가 된다.*Sugar reduces the organic DNS which absorbs maximally at yellow wave length*Results in change (shift) in absorption spectrum from red/orange to red/brown 540nm - Different from Nelson reaction*Measured at 540nm-Unreacted DNS no파장의 광만을 정량적으로 흡수하게 된다. 이 흡수의 정도를 적당한 방법으로 비교하는 것이 가능하다. 현재에는 광전관을 이용해서 투과해 오는 광의 양을 전류의 강약으로 변형시켜 측정(detector의 원리)하는 것이 일반적이다비색계 [比色計, colorimeter]용액에 의한 빛의 흡수가 농도와 액층(液層)의 두께에 의존한다는 람베르트-베르의 법칙을 이용해서 용액이나 현탁액의 농도를 측정하는 계기.원통의 한 쪽에 표준액, 다른 쪽에 측정액을 넣고 측정액이 들어 있는 액통을 오르내리게 하여, 유리기둥 밑에 있는 액층의 두께를 조정하여, 시야의 좌우가 같은 밝기가 되도록 하면, 그 때의 액층 두께의 차에서 별도로 작성되어 있는 교정곡선에 의해서 측정액의 농도를 알 수가 있다. 염료의 순도시험을 비롯하여 미량물질의 정량 등 비색분석에 이용된다.색과 흡광(1) 백색광 프리즘을 통과하여 자색에서 적색에 이르는 일련의 스펙트럼으로 분해함(2) 착색용액에 백색광을 통과시키면 스펙트럼의 어떤 부분은 강하게, 어떤 부분에서는 약하게 흡수된다.(3) 위의 원리를 이용하여 착색용액에 여러 파장(wavelength)의 단색광 (monochromatic beam)을 통과시켜 최대흡수를 나타내는 파장을 찾는다.A : 시료용액의 색, B : 필터의 색, C : 파장(nm)(4)미지농도의 착색용액에 최대흡수파장에 가까운 단색광을 통과시키고, 이 때의 흡수량을 측정하면 색의 농도를 정확히 알 수 있다.【참고】기계적인 문제로서 단색광을 얻기 위하여 분광광도계(spectrophotometer)에서는 프리즘이나 회절격자를 사용하고, 광전비색계에서는 색조휠터를 사용한다.?Beer-Lambert 법칙(1)Lambert의 법칙단색광(monochromatic beam)이 일정한 두께의 용액을 통과할 경우, 입사광의 강도 Io와 투과광의 강도 I의 비는 용액에 따라 일정하다.(2) Beer 법칙유색물질이 묽은 용액에 있어서 일정 파장의 광선에 대해서 흡광의 정도는 용액의 농도에 비례한다.(3)Beer-La 분류된다.※ 환원당·자당·전분이 공존할 때의 당정량▶ 환원당과 전분이 공존할 때전분을 가수분해하기 전과 한 후의 환원당의 차에 0.90을 곱해서 전분량을 구한다. 환원당이 포도당뿐일 때는 비교적 정확한 값을 얻을 수 있다.전분 함량 = 가수분해한 후의 전당량 - 가수분해하기 전의 환원당량▶ 환원당과 자당이 공존할 때환원당을 먼저 정량하고, 산을 가하여 자당을 전화시킨 다음 다시 정량한다. 전화 전후의 차가 전화당량이고, 여기에 0.95를 곱한 값이 자당량이다. 그러나 이 방법은 자당이 전화하기 전의 환원당정량에 영향을 미져 +error를 초래하기 쉽다.▶ 환원당·자당·전분이 공존할 때전분을 가수분해할 때는 자당을 가수분해할 때보다 온도도 높고 반응 시간도 더 길다. 따라서 전분을 가수분해할 때 자당은 변화를 면하지 못하고, 이런 경우는 분별정량이나 전당질정량이나 다 같이 정확한 값을 기대하기 곤란하다.이렇게 여러 가지 당이 공존할 경우는 paper chromatography에 의한 분리와 비색정량에 의해서만 분별정량이 가능하다.※표준 곡선의 소개(introduce concept of standard curve)알려지지 않은 것의 농도를 결정하기 위해 알려진 농도의 용액의 희석을 이용.알고 싶은 것을 알고 있는 것과 동일하다고 가정할 때- DNS 반응 에서의 반응성은 같음-Problem in other assay as they may not contain same amount of reactive groups =>Protein assays (have to choose) , But usually close※교정 곡선 [ 較正曲線, calibration curve ]눈금을 가로축으로, 측정값을 세로축으로 한 곡선. 측정값 대신에 보정 또는 보정률을 쓰는 것도 있다.Carbohydrate 란?일반식 Cn(H2O)m 이 마치 탄소와 물분자(H2O)로 이루어져 있는 것처럼 보이기 때문에 이런 이름이 붙었다. 화학적으로는 다가(多價) 알코올의 알데히드 또는 케톤 및 그 이당류라고 하며, 수크로오스[蔗糖] ·말토오스[麥芽糖] 등이 그 예이다. 또한 삼당류 ·사당류 등으로 분류된다. 소당류 중에서도 알데히드기가 결합에 사용되지 않고 유리 상태로 있는 것은 환원성을 가진다.환원당의 정의 및 환원당 정량 방법?환원당환원당(reducing sugar)은 반응성 있는 알데히드기, 케톤기를 갖고 금속염 알칼리용액을 환원시키는 성질이 있는 당의 총칭이다. 펠링용액(황산구리의 알칼리용액)을 환원하여 이산화구리를 만든다. 포도당 ·과당 ·말토오스(맥아당) 등이 포함되며, 설탕으로의 환원력은 없다. 아미노산 등과 화학반응을 일으켜 갈색 물질을 쉽게 만들어 식품이 갈변(褐變)하는 원인이 된다.알데히드기나 케톤기를 가지고 있는 당류로서 펠링 용액을 환원시킨다고 해서 환원당이라고 하고 설탕과 전분 등과 같이 다른 물질을 환원시키지 못하는 당을 비환원당이라고 한다.?펠링 용액- 알데히드기(基)나 환원당의 검출·정량에 쓰이는 시약잘게 부순 35g의 황산구리 결정을 500mℓ의 물에 녹인 제1액을 만들고, 이어 170g의 타르타르산칼륨나트륨과 50g의 수산화나트륨을 50mℓ의 물에 녹인 제2액을 만든다. 이 용액들을 서로 다른 병에 보존하고 사용할 때에 같은 용량을 혼합한다. 혼합액은 황산구리의 용액보다 진한 청람색이다. 여기에 알데히드기 =CHO를 가하면 타르타르산 착염(錯鹽)의 형태로 존재하는 구리(Ⅱ)이온을 환원시켜 적색인 불용성의 산화구리(Ⅰ)로 만든다. 따라서 액은 무색이 되며 산화구리(Ⅰ)의 붉은 침전이 생긴다. 다만 이 반응은 지방족알데히드나 당류(糖類)에서는 양성인데, 방향족알데히드나 케톤에서는 음성이 된다.? 베네딕트(Benedict)반응-Benedict시약은 Fehling용액에 비하여 알칼리성이 약해서 좀 더 안정한 것이 특징포도당의 수용액에 청록색의 베네딕트 용액을 몇 방울 넣고 가열하면 황적색으로 변한다. 의학에서는 오줌 속의 당을 검출하는 데 이 반응을 이용한다. 포도당 이외에 엿당, 과당 등에서도 유사한 반응이 일어나는데 이들 당 가지고 있는 화합물은 phenyl hydrazine과 반응하여 결정성의 phenyl osazone(osazone)을 생성한다. 예를 들면 aldose의 경우는 1몰의 phenyl hydrazine과 축합하여 phenyl hydrazone을 만들지만, 이것은 다시 2몰의 phenyl hydrazine과 반응하여 osazone으로 된다. Osazone은 결정으로 얻기 쉽고, 그 결정의 형태는 당의 종류에 따라 다르기 때문에 환원당을 확인할 수 있다.★ 환원당의 정량법에는 구리법, Ferricyanide법, 요오드산화법 등이 있지만 가장 많이 이용되고 있는 것은 구리법에 속하는Bertrand법이며, 구리법고 요오드법을 병용한 것이 Somogyi 법이다.? Bertrand 법Fehling용액을 일정량의 환원당 용액에 가하고 한정된 시간동안 가열하면 환원당의 함량에 비례하여 2가의 구리(Cu2+)가 환원되어 적색의 1가의 구리인 아산화동(Cu2O)이 침전된다. 이 때 환원당의 환원작용은 당의 종류에 따라 다르므로 Fehling용액으로 생성된 산화제일동(Cu2O)의 양은 다르게 된다.생성된 산화제일동(Cu2O)의 침전을 황산제2철[Fe2(SO4)3, 2가철]의 산성용액으로 녹이면 산화제일동은 산화되어 황산동이 되고 여기에 비례하여 황산제2철은 제1철염 (FeSO4, 2가 철)으로 환원된다. 따라서 이와 같이 생성된 제1철염 (FeSO4)을 KMNO4 표준용액으로 적정하면 환원, 침전된 구리량을 계산할 수 있고, Bertrand 당류 정량표로부터 구리량에 상당하는 당량을 구할 수 있으므로 시료 당 용액 중의 환원당량을 구할 수 있게 된다.벨트란(Bertrand)법에 의해 전화당, 포도당, 갈락토오즈, 맥아당 및 유당을 정량할 수 있다. 환원당은 알칼리성으로 CuSO4를 환원하여 아산화동(Cu2O)를 석출한다. 환원에 의해 얻어진 Cu2O를 황산제이철 용액으로 용해하면 다음과 같은 반응이 일어난다.Cu2O + Fe2(SO4)3 + H2SO4 = 2CuSO4 + 2FeSO4.

공학/기술| 2006.12.13| 8페이지| 1,000원| 조회(517)

환원당, Acid, 측정, 분획, 자당

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pk, Henderson-Hasselbalch Equation

Bio chemistry report 12034505 김혜미(chapter3 appendix 내용 정리, pk, Henderson-Hasselbalch Equation)① Appendix : Acid-Base ConceptsIonization of water물은 hydronium(H₃O+) 와 hydroxyl(OH-)이온으로 분리된다. 간단하게 우리는 hydronium을 hydrogen (H+)이온으로 부르고 평형식을 쓸 수 있다.H₂O ? H+ ＋ OH-이 분리의 평형식에서 상수 Keq는 일괄적으로 표시된 분자 concentration 의 항(1) 으로써 얻어진다 . water의 concentration(55.5M)은 이온화에 의해 약간 변하기에 expression1에서 Kw는 water의 이온 산물이라는 것을 간단히 알 수 있다. 25℃에서 Kw는 1.0 * 10^¹⁴이다.Keq = [H+][OH-]/[H₂O] ‥expression 1.Kw = [H+][OH-]‥ expression 2.H+과 OH-의 concentrations 는 상호작용 관계임을 안다. 만약 H+의 concentration이 높다면 OH-의 concentration은 반드시 낮게 된다. 예를 들어 만약 [H+]=10^²M 이면, [OH-]=10^-¹²M 이다.Definition fo Acid and Base산은 양성자 기증자(proton donor)이다. 염기는 양성자 수락자(proton accepter)이다.Acid ? H+＋ baseCH₃COOH? H+ ＋ CH₃COO-(Acetic acid) (Acetate)NH₄+ ? H+ ＋ NH₃(Ammonium ion) (Ammonia)산의 이온화에 의해 형성된 종은 염기와 한 쌍이다. 거꾸로 말하면 염기의 protonation 이 산출되면 산과 한 쌍이 된다. Acetic 산과 acetate 이온은 산과 염기로 결합된 한쌍이다.Definiton of pH and pK용액의 pH는 H+의 농도의 측정치이다. pH는 pH=log10 (1/[H은 무슨 관계가 있을까?유용한 표현은 expression 4 로부터 끌어낼 수 있다. 다시 배열하면 다음과 같은 식을 얻을 수 있다. 1/[H+]= 1/Ka[A-]/[HA] ‥expression 6.expression 6의 양쪽에 로그를 넣어주면 다음과 같은 식을 얻을 수 있다.log(1/[H+]) = log(1/Ka) = log([A-]/[HA])‥expression 7expression 7의 log1/Ka에 대해 log1/[H+]와 pKa를 치환하면 Henderson-Hasselbalch equation로 알려진 식을 구할 수 있다.pH= pKa + log([A-]/[HA])‥expression 8만약 HA에 대한 A-의 분자 농도와 HA에 대한 분자 농도가 알려져 있다면 용액의 pH는 식 8로부터 계산되어 질 수 있다. 0.1Macetic acid and 0.2M acetate ion의 용액을 생각해 보자. acetic acid의 pKa는 4.8이면 용액의 농도는 다음과 같이 주어진다.pH = 4.8+log(0.2/0.1) = 4.8+log2.0 = 4.8+0.3 = 5.1역으로 말하면 만약 HA에 대한 A-의 분자 농도와 HA에 대한 분자 농도가 알려져 있다면 용액의 pH는 계산되어 질 수 있다는 것이다.Buffers산과 염기의 결합된 쌍(acetic acid 와 acetate ion 과 같은)은 중요한 성질을 띤다. 그 성질은 용액의 pH가 변하는데 저항을 갖는다는 것이다. 다시 말하면 이러한 현상을 buffer라 한다. acetic acid(HA)의 용액에 OH-를 넣는다고 생각해보자.HA ＋ OH- ?A- ＋ H₂OOH-가 첨부된 용액의 pH의 의존력의 plot은 titration curve 라 불리운다. acetic acid의 pKa는 pH 4.8의 curve에서 inflection piont를 나타낸다는 것을 알자. 이 pH에 근접하면 OH-의 상당한 양이 결합되어 작은 변화를 일으킨다. 다시 말하면 burffer는 pH의 value를 다른 p어진다. α- NH₃+ group이 9.8인데 반하여 α-COOH group의 pKa는 2.4이다. 다른 아미노 산들의 이러한 groups의 pKa의 values는 유사하다. aspetic acid와 같은 다른 아미노산들 또한 ionizable side chain을 포함한다. 아미노산들의 ionizable side chain의 pKa의 value는 3.9(aspa acid)에서부터 12.5(arginine)까지 이어진다.Frisell 의 ‘homan biochemistry’에서 pK와 Henderson - Hasslbalch equation은 함께 서술하고 있다. 교재에 쓰여있는 이온화에 대한 상수 [H+][A-]/[HA]는 an equilibrium constant =K(expression 35-1)라 서술된다. 대부분의 물속의 산의 분리는 다음과 같은 식으로 표현된다. HA ＋ HOH ? H₃O+ ＋ A-이 반응한 물은 base 나 proton acceptor 에 도움된다. 따라서 35-1의 식을 완성해 보면[H₃O][A-]/[HA][HOH]=K(expression35-1')이 된다. 그러나 physiologic chemistry의 the hydration of the proton 은 일반적으로 지시되어 지지 않는다. K는 열역학의 평형 system에 대한 분리 상수인 것과 solution의 이상적이라고 해석되어 진다. 따라서 K항은 H+와 A- 사이의 평형에서 ionic strength 와 concentration의 효과에 대해 알 때 반드시 주어져야 한다. medical biochemistry에서 특별한 실험 상태( e.g., 0.1M acetic acid in water, 0.1 M acetic acid in 0.1M NaCl) 아래 그들의 conjugate partners 와 산의 concentration의 효과를 측정한 것으로부터 유도된 평형상수 K'는 관례적으로 “practical"로 쓰이거나 명백한 이온상수로 사용된다.식 35-1에 의해 요약된id]이것이 Hederson - Hasselbalch equation 이다. 이 식의 표현은 산과 염기의 문제에 대한 application이 있기 전에 몇몇이 강조 되어 진다. 첫 번째로 이 식은 pK'가 각각의 산의 system 에 대한 상수라는 것을 강조한다. pK'가 작으면 산은 커진다.(lactic acid 는 asetic acid 보다 pk'가 작다는 것을 알아야 한다) 두 번째로 base/acid의 비율에 대한 것이다. 이것은 다른 어떤 산 시스템에 해당되고 pH는 이 비율에 직접적으로 연결되어 있다. 만약에 비율이 커진다면 pH는 커진다. 다른 어떤 acid-base system 의 평형 반응에 대해 묘사할 때 Henderson - Hasselbalch equation은 아주 유용하다. 그리고 Henderson - Hasselbalch equation은 특히 buffer로써 weak acid system을 서술하는데 도움이 된다.Henderson - Hasslbalch equation이 적용되는 것에 대한 부가 설명은 montgomery 의 ‘biochemistry'에 서술되어 있다. 이 식의 적용되는 한 부분은 pH와 관련되어진 α-L-amino acids, peptides, and proteins과 같은 amphoteric molecules 에서의 charge 를 참조 할 수 있다. peptide chain의 다양한 ionizable groups 과 그들의 R groups 은 각각 그들의 amino acids에 대략 부합하는 pKa 를 가진다. 이런 group 의 하나로부터 proton의 분리를 생각해 보면 Henderson - Hasselbalch 관계는 base/acid의 비율이 높아지면 pH가 높아진다는 것을 알 수 있다.murray 의 harper's biochemistry 에서는 이온화 상수의 [H+][A-]/[HA]에서 [HA] 대신에 [RNH₃+]를 [A-] 대신에 [RNH₂]를 예시로 하여 서술되어 있다.R-COOH ? [R COK의 values를 적어 놓은 것이다. 표를 보면 강한 산의 groups 은 작은 pK의 values를 갖는다는 것을 알 수 있다.Lehninger 의 biochemistry에서 25°C 에서의 위에서 언급한 것과 다른 산들의 pK'의 값과 dissociation constant에 대해 정리한 표를 찾아 볼 수 있다.또한 acid- base titration curves를 그려놓은 그래프를 볼 수 있다. 이 그래프에서는 sodium hydroxide 와 함께 다른 약산들의 titration curve를 보여준다. NaOH의 증가에 따른 pH 결과는 OH-가 더해진 equivalents와 대응된다. titration curves의 기울기는 어느 한 산에서부터 다른 산에 이르기까지 비슷한 모양을 하고 있다. 가장 중요한 차이점은 커브가 pH의 scale에 수직적으로 옮겨진다는 것이다. titration의 midpoint 를 절단해서 본 pH는 acid titrated의 pK' 와 수학적으로 동일하다. titration curve의 기울기는 pH=pK' + log [proton acceptor]/[proton donor] 과 같은 Henderson - Hasselbalch equation으로 표현될 수 있다.Lehninger 의 biochemistry에서 25°C 에서의 다른 산들의 pK'의 값과 dissociation constant에 대해 정리한 표를 볼 수 있다면 Devlin 의 biochemistry with clinical correlations 에서는 합성물 , 화합물에 대한 dissociation constant와 pK' 값을 정리한 표를 볼 수 있다.Devlin 역시 Henderson Hasselbalch 식을 solution의 pH 와 conjugate base 와 acid present 의 양의 사이에 관계가 성립되고 있다고 보여질 수 있는 유용한 방법이라고 서술하고 있다. 위쪽의 Ratio of conjugate [base]/[acid]의 그래프다.

공학/기술| 2006.12.13| 8페이지| 1,500원| 조회(1,737)

HA, log, Acid, pk, Hasselbalch

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과일 발효주(과실주)

0.술의 기원술의 기원은 심산(深山)의 원숭이가 빚은 술이 곧잘 예화로 등장한다. 나뭇가지가 갈라진 곳이나 바위가 움푹 팬 곳에 저장해 둔 과실이 우발적으로 발효한 것을 먹어 본 결과 맛이 좋았으므로 의식적으로 만들었을 것이라는 설이다. 과실이나 벌꿀과 같은 당분을 함유하는 액체는 공기 중에서 천연 효모가 들어가 자연적으로 번식, 발효하여 알코올을 함유하는 액체가 된다.-야생원숭이들은 나무 가지의 움푹 파인 곳에 먹다 남은 과일을 모아둔다. 그러면 비가 내리고 발효가 되어서 맛좋은 과실주가 된다고 한다. 원숭이들은 동료하고 싸우거나 해서 기분이 안 좋을 때 그 과실주를 마신다고 한다. 사람하고 다른 점은 절대 오버해서 마시지는 않는다는 것이다. 동물원에 있는 원숭이에게 장난삼아 소주를 건네주는 사람이 있다. 그러면 원숭이는 기분 좋을 때까지만 마시고 남은 소주는 한쪽 구석에 보관해 둔다고 한다(그런 면에서는 사람보다 나은 듯...애주단의 취지와도 비슷한..)후아주는 실제로 원숭이가 모아놓은 과일이 자연 발효되어서 만들어 졌다고 하며 꽤나 가치 있는 술로 취급된다.-1.과일 발효주(과실주)란과실주는 포도 ·사과 ·자두 ·배 등의 과실만을 자연적으로 발효시켜서 만든 것과, 소주 등의 원주(原酒)에 과실과 당류를 넣어 과실의 성분(맛 ·향기)을 추출하여 만든 술로 구분된다. 후자의 술은 과실주에 속하는 혼성주라고 하는데, 서양에서는 리큐어(liqueur)라고 한다. 가정에서 흔히 만드는 과실주나 약용주는 대부분이 혼성주에 속하는 것들이다.과실주의 주원료인 과실은 신선하고 산미가 풍부한 것일수록 좋은 술이 된다. 과실은 완전히 익기 전의 것을 사용하고, 같은 과실이라도 과피가 짙은 녹색을 띤 것이 산미가 많아서 좋다. 이런 것이 과실이 지닌 특유한 산미가 있고, 알코올분이 강하지 않은 상쾌한 풍미의 술이 된다. 과즙의 당분에는 포도당 ·과당 ·수크로오스 등의 발효성 당류가 있으며, 이것이 효모에 의해 발효되는데, 그 당류의 약 50 %가 알코올이 된다. 과실주에 알코중 방향(bouquest)과 향기(aroma)가 좋아진다. 과실주는 최소한 1년 이상 숙성시켜 제품화하는 것이 좋다.⑧ 병에 담기, 살균, 밀봉침전물이 제거된 배술을 공장에서는 미세한 휠터로 여과하여 술내에 있는 효소 및 단백질 동을 제거하여 제품에서 술의 혼탁이 발생되지 않는다. 살균방법은 공장에서 고온 순간 살균방법이 행해지며 살균과 동시에 규정된 양을 주입기를 통하여 병에 술이 일정량 주입된 후 자동 밀봉된다. 이때 살균기는 여러 가지 있으나 열교환 자동온도 조절되는 온수순환에 의하여 이루어지며, 살균온도는 90℃, 시간은 30∼60초 소요된다. 그러나 소규모 공장이나 일반 가정에서 살균할 경우 윗부분에 3∼5cm정도 공간을 두어 살균시 온도 상승에 따라 술이 넘치지 않을 정도로 규정된 양을 병에 담는다.저온살균방법으로 살균 솥이나 찜통에 술을 담은 병을 세워놓고 물을 병에 술이 담긴 부분까지 채운 후 가열하여 병 안의 술에 온도계를 꽂아 온도 65℃에서 30분간 저온 살균한 후 공기가 새지 않도록 코르크마개나, 왕관 등으로 밀봉기를 이용하여 밀봉한다.살균시 온도가 높은 끓는 물에 온도가 낮은 술병을 넣으면 깨질 우려가 있으므로 주의한다. 술을 담는 병은 녹색 병을 사용하여야 하는데 이는 배술에 자외선을 차단시켜 변색을 방지한다.3.과일 발효주 종류 및 만드는 법자연적으로 발효시킨 과일 발효주@ 오스트리아의 사과주. 모스트모스트는 사과나 배로 만든 과실주이다. 모스트라고 부르는 지역은 독일 남부나 오스트리아에 한정되어 있고, 그 외에는 사과와인이라고 부르기도 한다. 모스트는 만드는 법이 기본적으로 와인과 비슷하다. 과실을 압축해서 거기에서 나오는 과즙이 시간에 따라 발효되기를 기다린다. 차게 해서 마시면 신맛과 과일의 단맛이 조화를 이워 산뜻한 맛이 난다. 각 지방마다 맛이 가지각색이며 햇볕을 충분히 쪼인 나무에서 자란 과일로 만든 모스트는 과일 본래의 단맛이 충분히 발휘된 맛있는 술이 된다.@ 포도주.포도나 포도즙을 발효시켜서 만든 과실주이다. 영어로는 마시면 소화와 원기회복을 동시에 돕는다. ?9. 오렌지주(오렌지주)?재료-오렌지 500g,설탕 200g, 소주 900g?담그기1.오렌지는 따듯한 물에 담가 솔로 문질러 씻은 후 물기를 말끔히 닦는다.2.오렌지를 1cm두께로 동글게 썰어 용기에 담고 설탕과 소주를 넣어 밀봉한다.3.1개월 반쯤 지나 잘 숙성되면 거즈에 밭쳐 맑은 술을 받아 다른 용기에 보관한다.10. 레몬주?재료 준비??레몬 1㎏, 설탕 200g, 소주1.8ℓ?담는 방법레몬은 싱싱한 것을 골라 껍질째 깨끗이 씻는다. 껍질에 왁스가 묻어있을 수도 있으므로 소금 등으로 문질러 씻고 물에 헹군 후 마지막에 소쿠리에 담아 끓는 물을 살짝 붓는다.반은 껍질째로 썰고 반은 껍질을 벗겨 5㎜ 두께로 둥글게 썬다.용기에 레몬 알맹이와 설탕을 켜켜로 담고 술을 부어 밀봉한다.서늘한 곳에 2개월쯤 두었다가 건데기는 건져서 즙을 짜 다시 술에 붓고 술은 면보자기에 걸러 병에 담아 둔다.?맛있게 마시는 방법??물에 타서 마셔도 좋고 과일주나 양주에 칵테일을 해서 마셔도 좋다. 1일 400cc 정도를 적당하게 나누어 마신다. 또한, 탄산수와 검시럽을 기호에 맞게 타서 식전에 마신다. 뜨거운 물과 꿀을 타서 식사 후에 마시면 소화가 잘된다. 또 드레싱이나 육류, 생선의 밑간을 하는 데 사용해도 좋다.?효능??레몬의 신맛은 구연산이 대부분이다. 주석산, 포도당, 리모넨, 시트랄, 특히 비타민C가 많이 들어 있다. 껍질에는 페리진이라고 하는 물질이 있어 원기회복과 해열효과, 그리고 인후통, 기침을 진정시키는 적용을 한다. 또 미용에도 효과적인 레몬주는 모세혈관의 활동을 활발하게 하는 작용이 있어고혈압 예방효과도 좋다. 피로회복, 식욕증진, 보혈, 간장, 미용 등에 효과가 뛰어나다.?알아두세요??기본적으로 완숙된 상태의 것을 이용한다. 수입산이 대부분이므로 일년 내내 수입이 가능하므로 언제든지 술을 담글 수 있다. 수입된 레몬은 껍질에 농약이 많이 묻어 있으므로 흐르는 물에 충분히 씻는다. 술을 담근 지 한 달 정도가 지나치도 저하되고 신장의 작용이 회복되므로 좌골신경통이 개선된다.22. 건포도주재료 준비건포도100g 소주1L담는 방법냄비에 재료를 용기째 넣고 물을 용기의 반 정도 붓는다.냄비의 물이 끓을 때까지 불 위에 올려둔다.물이 끓으면 불을 끄고 그대로 1~2시간 두어 식힌다.냄비에서 용기를 들어 내 밀봉한 다음 냉암소에 하룻밤 재운다.보존하고 있는 동안에는 하루에 한 번 용기를 흔들어 준다든지 병을 거꾸로 흔든다든지하여 건포도와소주가 잘 섞이게 한다.효능기억력을 높여주어 건망증을 사라지게 한다.건포도주는 철분이 풍부해 빈혈에 좋다. 또한 빈혈 때문에 생긴 눈밑의 기미가 사라지며피부가 고와지고흰머리도 개선된다.위장이 튼튼해지고 건강하게 살이 오르게 되므로 지나치게 여위어 고민하는 사람에게 좋다.23. 검은콩포도주재료 준비검은콩 130~150g, 붉은포도주 750㎖(1병)담는 방법검은콩을 마른 행주로 깨끗이 닦아 먼지를 없애고 상한 콩은 골라 낸다.검은콩을 마른 후라이팬에서 약한 불로 10~11분 정도 볶는다. 콩이 타지 않고 껍질이톡톡 튀면 꺼내그대로 식힌다.밀폐할 수 있는 내열성 유리병에 넣고 붉은포도주를 붓는다.밀봉하여 냉암소에 5~6일 정도 둔다.이 포도주를 조리나 체에 깨끗한 마른 행주를 얹어 걸러 내고 검은콩 포도주는 밀폐용기에 다시 부어냉암소에 두고 마신다.효능검은콩포도주는 고혈압에 효과가 있으며, 무릎통증, 귀울림, 그리고 불면증 개선에탁월한 효능을 갖고 있다.혈색이 좋아져 아름다운 피부를 유지시켜 준다.약용주1. 다 래 술 (黴候桃酒(미후도주)특 성◁ 다래나무과의 낙엽,활엽,덩굴식물로서 우리나라 각지 의 산야에 자생한다.이른 여름에 다섯잎의 꽃을 피우며 과실은 가을에 황색으로 익은 것을 딴다.◁ 봉오리일때 개다래 파리가 산란한 벌레집은 혹이생긴 형태가 되며과실보다 혹이 생긴 벌레집이 약효가 크다고 한다. 이것을 열탕을부어서 건조시킨 것을 목천료 (木天蓼) 라고 한다.이용부위◁ 열매와 벌레집담그는 방법◁ 잘익은 다래를 구하여 물에 깨끗이 씻어 물기를 빼고 독육은 석(石) 세포가 많으며 경질이고 생식에는 부적합하다.◁ 당질이 13.4% , 비타민 C 가 비교적 많으며 100g중 20mg 을함유하고 있다. 마리크산, 탈티리크산을 함유하고 있으며기관지염, 폐렴, 구토, 토사곽란, 신경통, 관절염등 약재로이용되고 있다.이용부위◁ 열 매담그는 방법◁ 모과의 열매를 물에 깨끗이 씻어 물기가 빠지면 죽도로 써는데 쇠칼로 썰어서 담그면 효과가 적어진다. 만약에 썰기가 곤란하면 돌절구나 나무절구를 이용하여 짓 찧어 담가도 좋다.◁ 모과에 꿀이나 설탕을 넣고 재어 술을 담그기도 하는 가지고 담가야 한다. 독이나 항아리에 담고 재료 2 -3배의 독한 술을 붓고 뚜껑을 밀봉하여 냉암소나 지하실에 보관하는데 기간은 6개월 이상 되어야 한다. 1년 이상 두면 더욱 효과가 높다고 한다.◁ 짓 찧은 모과를 탁주 빚을때 넣는데 술밥 세말에 모과 찧은것 세되정도의 비율로 탁주를 빚어 발효시킨다. 담근지 100여일 정도면 탁주가 완전히 익는데 아주좋은 천하명주라고 한다.마시는 방법◁ 아름다운 담황색으로 물이 들며 방 향과 떫은맛이 적당히 조화된 미주이다.스트레이트, 칵테일등 무엇이든지 적합하다.효 과◁ 감기에서 오는 모든병 즉 호흡기계통, 기관지, 해수, 천식, 폐렴, 구토증세와 토사곽란 등에 아주 신효하며 특히 팔다리, 허리, 무릎 등이 쑤시고 땅기며 저리는증세에 좋다.모과주를 담궈놓고 매일 반주를 한잔씩 마시면 식욕증진, 소화촉진, 자양강장에 효과가 좋다고 한다.?8.무 화 과 술특 성◁ 무화과는 뽕나무과 낙엽, 활엽, 관목으로 봄부터 여름에 걸쳐 잎 겨드랑이에 주머니 같은 열매가 달리며 그속에 작은 꽃이 많이 달린다.과실은 달고 향기가 좋다.◁ 하얀 생즙을 사마귀에 반복해서 바르면 사마귀가 없어지고 마른잎은 보온의 목적으로 욕료를 사용한다. 유효성분은 포도당, 호막질, 지방을 함유하고 있어 적백대하증, 자궁염증, 냉병, 해수, 천식, 기관지염, 목병 및 특히 치질을 치유함에 효과가 있다.이용부위◁ 열매, 나무껍질, 뿌리껍질담그는 방법◁ 잘 순이다.

생활/환경| 2006.12.13| 31페이지| 2,000원| 조회(1,319)

알코올, 발효, 과실, 포도주, 과실주

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