생태친화적 기업 실태조사삼양식품의 설립한국전쟁(1950) 이후, 거의 대부분의 도시가 굶주림에 의해 고통을 받았었습니다. 어느 날, 한 남자(창업주 전중윤 명예회장)이 식량 배급을 받기 위해 줄을 선 사람들을 목격하였습니다. 그는 배고픔으로부터 자유로운 사람들을 만들기 위하여 몇 가지의 정교한 기술들을 적용하였고 그들을 위하여 음식 생산을 위해 1961년 삼양식품 회사를 설립하였습니다. 그 당시에(1972), 아무도 고산지역에 목장을 기대하지 않았습니다. 그럼에도 불구하고, 설립자인 전중윤 회장은 고산지역에서 성공적인 목장들을 찾기 위하여 스위스에 방문을 하였습니다. 그것을 계기로 강한 확신을 가졌고, 주위의 반대에도 불구하고 목장 개발을 시작하였습니다. 마침내, 불가능을 가능케 하여 사업기반을 가지게 되었습니다.이것은 지금까지 아시아에서 가장 큰 고산초원목장이 되었습니다. (580만평)CI슬로건핵심가치에코그린캠퍼스 (EGC: 구 대관령 목장)의 설립아시아 최대 목장 EGC는 배고픈 국민의 배를 채워주고자 했던 창업자 전중윤 회장의 깊은 혼과 축산입국의 꿈을 위해 풀 한 포기 없는 고원 지역에 초지를 개척한 인간의 집념이 살아 숨쉬고 있는 거대한 미래 자원이자 쉼터이다.삼양식품 창업자 전중윤 명예회장의 인터뷰목장은 내가 하지 않아도 되는 일을 한 거야. 식품회사를 하면서 목장 운영하는 회사가 삼양식품 말고 어디 있어요? 다시 말하면 하지 않아도 될 목장을 해야겠다고 결심했을 때는 이유가 있었다는 얘기야. 내가 라면에 어떤 정신을 심고 있었는가 하는 것은 대관령 목장을 보면 알 수 있을 거요. 사실 라면을 하다 보니 라면 한 개 가지고 한 끼 먹는 어려운 사람에게는 도저히 영양학적으로 모자랄 것 같아. 사람은 태어나면서부터 140억 개의 뇌세포와 60조나 되는 일반 세포로 구성되잖아? 그 중 매일 10만~20만개의 세포가 사멸하는데 특히 왕성하게 일할 나이에 영양이 결핍되면 어찌되겠어? 세포가 더 급속히 죽을 거 아니오? 그래서 스프에 소고기를 넣어야겠다고 생각한 거야. (중략) 삼양이 소고기라면을 시작한 동기가 바로 거기 있어요. 잘 먹이자고 말이야. 그래서 소를 직접 길러야겠다. 직접 키워 건강한 소고기를 듬뿍 넣자 하고 시작한 게 목장 사업의 계기에요. –월간중앙 2009년 8월 호 기사-에코그린캠퍼스의 비전-1차 산업 : 풀(조사료) 중심의 유기축산 (Grass-fed 소, 닭, 돼지)친환경 동물복지형 축사해외 사료 개발, 조사료 자체 개발-2차 산업 : 친환경 유가공품, 육가공품 (최소 가공, 첨가), Non GMO-3차 산업 : 친환경 농축산 체험형 관광, 친환경 농축산물 직거래 판매,친환경먹거리, 외식 서비스, 친환경 농축산 교육사업화Grass-fed dairy food: 소에게 고지방, 고열량 옥수수, 사일리지 사료가 아닌 목초를 공급: 오메가3: 오메가6=1:3 수준 (성인 권장 섭취 비율) ↔ 일반 소고기 1:18 이상: Non GMO, Non Soy, Non CornGrass-Fed meat: 곡물 먹인 돼지고기 대신 “목초를 먹고 자란 쇠고기”: 無 rBST(인공성장호르몬), 항생제, 합성첨가물: 오메가3 다량 함유 (N3:N6 = 약 1:3): 저지방, 저콜레스테롤, 저칼로리실제 grass-fed 쇠고기는 그림보다 마블링이 적음.제품EGC 에코그린캠퍼스 유기농 우유대관령 삼양 목장 (고도 850M)에서 자연 방목으로 착유, 오메가3: 오메가6=1:4 이하(WHO 권장 비율), 축산과정을 바꿔 Natural 기능성 강화 우유목초 먹인 소고기로 만든 소시지 (출시 예정)제주우유2011년 08월 삼양식품, 제주우유 인수청정 제주산 유제품 브랜드 가치 함양- 낙농산업 발전 기여지속적인 제품 개발 및 엄격한 품질관리제주 특산물 이용한 기능성 및 고부가가치 신제품 개발HACCP, 유기가공식품인증최적의 낙농여건국제수역사무국(O.I.E)지역 청정 지역성이시돌목장 초입 위치고품격 유제품 생산친환경 유기농 제품 생산저지방, 유산균, 발효유 등 제품군의 다양화청정 제주산 1A 등급 원유집유목장유기농 목장: 성이시돌목장(한림읍 금악리)- 무항생제, 무화학비료일반 목장: 건준목장 외 11개 목장품질 관련 인증 현황
2013. 4. 12 project No. 4▶실험 제목 : 대장균군(coliform) 검출▶실험 목적 : 다양한 정성시험과 정량시험 방법을 익혀 검체에 알맞은 분석 방법을 선정하도록 한다. 정성시험은 대장균군의 유무를, 정량시험은 대장균군의 수를 알아보는 것이다.▶이론 : 대장균군은 그람음성, 무아포성의 간균으로 유당을 분해하여 가스를 발생하는 호기성 또는 통성혐기성의 세균의 총칭으로 식품에서의 대장균군 검출은 그 식품이 분변에 오염이 되었다는 것으로 단정할 수는 없지만 분변과의 관련이 높다는 것을 의미한다. 즉, 식품의 취급과정이 위생적이지 못하였다는 것을 암시한다. 대장균군은 분류학적인 용어는 아니지만 공중 위생과 응용 세균학상에 사용되는 편의적인 용어라 할 수 있다. Escherichia. Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter, Erwinia가 포함되며, 또한 많은 Aeromonas 속균은 유당을 분해하여 산을 생성한다.유당을 분해하여 가스를 생산하는 모든 호기성 또는 혐기성균을 대장균군으로 분리한다.* 배지 조성-Lactose BrothPeptone5.0 gBeef Extract3.0 gLactose5.0 g→위의 성분을 증류수 1000 ml에 녹여 pH 6.9±0.2로 조정한 후 발효관(Durham관)을 넣은 시험관에 10 ml씩 분주하여 121℃에서 15분간 멸균한다.-BGLB (Brilliant Green Lactose Bile Broth)Peptone10.0 gLactose10.0 gOxgall20.0 gBrilliant green0.0133 g→위의 성분을 증류수 1000 ml에 녹여 pH 7.2±0.1로 조정한 후 발효관(Durham관)을 넣은 시험관에 10 ml씩 분주하여 121℃에서 15분간 멸균한다.-EMB (Eosin Methylene Blue Agar)Peptone10.0 gLactose5.0 gSucrose5.0 gDipotassium Phosphate2.0 gEosin Y0.4 gMethylene Blue0.065 gAgar13.5 g→위의 성분을 증류수 1000 ml에 녹여 pH 6.8±0.2로 조정한 후 121℃에서 15분간 멸균한다.-Nutrient AgarPeptone5.0 gBeef Extract3.0 gAgar15.0 g→위의 성분을 증류수 1000 ml에 녹여 pH 7.0~7.4로 조정한 후 121℃에서 15분간 멸균한다.▶실험방법 및 준비물1) 정성시험1-1. 유당배지법 : 2배 농후의 유당배지(LB), 유당배지(LB), BGLB배지, Endo평판배지 또는 EMB 한천평판배지, 한천사면배지 (LB발효관에는 듀람 발효관을 넣어 준비한다. )유당 배지를 이용한 대장균군의 정성시험은 추정시험, 확정시험, 완전시험의 3단계로 나눈다.① 추정시험Lactose broth에 시료 10, 1, 0.1ml을 접종↓35℃, 24시간 배양↓Gas생성확인- 가스 비 발생 : 추정시험 음성 ( 24시간 한 번 더 배양)- 가스 발생 : 추정시험 양성으로 다음 시험 진행② 확정시험BGLB에 LB배양액 접종 후 배양 (35℃, 24 hr)↓Gas 생성확인↓EMB agar 접종 후 배양 (35℃, 18～24 hr)↓전형적인 집락(금속성 광택 집락) 뿐만 아니라모든 Colony에 대해서 완전시험 실시③ 완전시험전형적인 집락(금속성 광택 집락)을유당배지 및 보통한천배지에 이식↓35℃에서 24～48시간 배양↓그람음성 무아포성 간균 확인1-2. BGLB 배지 (Brilliant Green Lactose Bile Broth) : BGLB배지, Endo평판배지 또는 EMB 한천평판배지, 한천사면배지BGLB 배지는 선택성이 높고 영양원이 풍부하여 세균 발육이 쉽다.BGLB 배지법은 채취된 검체로부터 준비한 시험용액 또는 이의 희석용액 0.1~1mL를 2개씩 BGLB발효관에 가하여 추정실험을 한다. 나머지는 LB 배지법에 의한 정성 시험의 방법과 동일하게 한다.1-3. 데스옥시콜레이트 유당한천배지 (Desoxycholate Lactate Agar) : 데스옥시콜레이트 유당한천배지, NA배지, EMB평판배지 또는 Endo평판배지Desoxycholate Lactate Agar는 선택성이 강하여 영양분이 풍부한 검체에 알맞다.시험용액 1 mL와 10배 단계 희석액 1 mL씩을 멸균 페트리접시 2매 이상씩에 무균적으로 취하고 약 43～45℃로 유지한 데스옥시콜레이트 유당한천배지 약 15mL를 무균적으로 분주하고 페트리접시 뚜껑에 부착하지 않도록 주의하면서 회전하여 검체와 배지를 잘 혼합한 후 응고 시킨다. 그리고 그 표면에 동일한 배지 또는 보통한천배지를 3～5mL를 가하여 중첩시킨다. 이것을 35～37℃에서 24±2 시간 배양 한 후 전형적인 암적색의 집락을 인정하였을 때에는 1개 이상의 집락을, 의심스러운 집락일 경우에는 2개 이상을 Endo 한천배지 또는 EMB 한천배지에서 분리 배양한다. 이하의 조작은 LB배지법 때와 같이 행하고 대장균군의 유무를 시험한다.2) 정량시험2-1. ★유당배지법 (최확수법)최확수란 이론상 가장 가능한 수치를 말하여 동일 희석배수의 시험용액을 배지에 접종하여 대장균군의 존재 여부를 시험하고 그 결과로부터 확률론적인 대장균군의 수치를 산출하여 이것을 최확수(MPN)로 표시하는 방법. 최확수는 시험용액 10, 1 및 0.1 mL와 같이 연속해서 3단계 이상을 각각 5개씩 또는 3개씩 발효관에 가하여 배양 후 얻은 결과에 의하여 검체 100mL 중 또는 100 g에 존재하는 대장균군수를 표시하는 것. 결과는 최확수표로부터 희석용액 100mL중의 최확수를 구한다.오늘의 시험 용액은 아이스크림, 흙, 손 씻은 물 : 5조는 아이스크림.★우리 실험은 1, 0.1, 0.01 mL로 실험했기 때문에 표중의 숫자의 10배를 해야 한다.★2-2. BGLB 배지법 (최확수법)시험용액 10, 1 또는 0.1ml를 5개씩의 BGLB 배지에 접종한다. 0.1ml 이하를 접종할 필요가 있을 때에는 10배 희석단계액을 각각 1ml씩 사용한다. 이 때에 시험용액의 최대량을 가한 배지의 전부 또는 대부분에서 가스발생을 인정하고 최소량을 가한 배지의 전부 또는 대부분이 가스를 발생하지 않도록 접종량과 희석도를 고려하여야 한다. 이하의 조작은 각 발효관에 대하여 BGLB 배지에 의한 정성시험법에 따라 하고 대장균군의 유무를 조사하여 최확수표에 따라 검체 100ml 또는 100g중의 대장균군수를 산출한다.2-3. 데스옥시콜레이드 한천배지법체취된 검체로부터 준비한 시험용액 1ml와 각 단계 희석액 1ml에 대하여 이 배지에 의한 정성시험법과 같은 조작으로 35±1°에서 20±2시간 배양한 후 생성된 집락 중 전형적인 집락 또는 의심스러운 집락에 대하여 정성시험 때와 같은 조작으로 대장균군의 유무를 결정한다. 균수 산출은 세균 수(일반세균수)측정법에 따라 한다.2-4. 건조 필름법시험용액 1mL와 각 단계 희석액 1 mL를 대장균 건조필름배지에 접종한 후 잘 흡수시키고, 35~37℃에서 24~48시간 배양한 후 생성된 푸른 집락 중 주위에 기포를 형성하고 있는 집락수를 계산하고 그 평균집락수에 희석배수를 곱하여 대장균수를 산출한다.▶실험 결과1mL 씩 넣은 시험관 0.1mL 씩 넣은 시험관0.01mL 씩 넣은 시험관▶고찰이번 실험은 대장균군이 있나, 없나 또는 얼마나 존재하냐를 알아보는 실험이었다. 대장균군은 일상생활에서 많이 존재하는 균이다.특히 http://taxacc.silla.ac.kr/wiz/contents/board/download.php?home. 여기에 따르면 대장균이 음료수의 주요한 오염 지표로 이용되고 있다고 한다. 다른 병원균보다 검출이 용이하고 신속하게 할 수 있고, 시험이 정밀하여 극히 적은 양도 검출 된다고 한다. 또한 위생지표세균 중 하나로써 대장균이 검출되지 않으면 병원균에 의한 오염이 있었다 해도 이미 사멸되었음을 의미 한다고 한다. 총 6조, 두 조씩 나뉘어 아이스크림, 흙, 손 씻은 물로 실험을 해보았다. 나는 실험에 앞서 결과를 예상해 보았는데, 아이스크림에는 안 나올 것이고, 흙과 손 씻은 물은 검출 될 것이라 예상했다. 사실 많은 뉴스를 통해 홈쇼핑의 냉면, 간장게장, 시중에 많이 유통되고 있는 유명제과의 아이스크림, 유명 시리얼 등에서 대장균군이 나왔다고 들었다. 그래서 우리가 사용하는 아이스크림에도 들어있지 않을까 했지만 음식물에 원래 들어있으면 안되니까 안 나올 것이라 확신했다. 결과를 보면 5조의 결과는 다 “음성”이다. 당연히 MPN값도 0이다. 듀럼관에 가스가 나타나지 않았다. 1mL씩 넣은 시험관은 아이스크림이 뿌연 색을 가지고 있어서 듀럼관이 잘 보이지 않으나 잘 보면 아무 것도 생기지 않았다. 흙을 가지고 실험한 조를 보니 가스가 선명하게 생긴 것을 확인 할 수 있었다. 한 가지 의문점은 0.01mL 시험관이 0.1mL 보다 혼탁하다는 점이다. 아이스크림 정량을 못 넣은 듯 싶다. 그리고 0.1mL 시험관의 부피가 같지 않다. 미묘하게 부피가 다르다. 왜 그럴까? 여기도 역시 아이스크림을 너무 많이 넣은 것이 있거나 같은 양을 넣지 않아서 인 것 같다. 아이스크림 원액 자체에 거품이 너무 많아서 정확히 양을 채취하지 못했다. 공기 때문에 시험관에 넣을 때도 다 제대로 들어가지 않았다. 또한 벽에다 안 묻히고 잘 넣으려 하다 보니 더 덜덜 떨었다.
2013. 4. 5 project No. 3▶실험 제목 : pour법과 spreading법 그리고 visible count▶실험 목적 : 미생물의 생육조건과 사용목적에 따라 배지를 직접 제조하고 미생물을 접종하고 관찰한다.▶이론 : spreading 도말 법은 병원균의 정량 실험을 할 때, 배양 후 생성된 콜로니의 수를 정확히 계수하기 위해 많이 쓰인다. pour법은 균을 한천 배지와 혼합하여 페트리 디쉬에 흘려 배양하는 방법이다. 균수 계산을 할 때는 10ⁿ배 희석한 것을 배양하여 생긴 집락 수 (30~300)로 원래의 균 량을 계산한다. 1개의 생균이 한 개의 집락을 형성한다는 가정 하에서 측정한다. 곰팡이와 같이 단세포의 균일한 현탁을 만들 수 없거나 단독 집락을 형성할 수 없는 경우에는 이 방법을 쓸 수 없다.* 세균 수를 측정하는 여러 방법 *1) 전균수 측정법① 균수계산판법: 혈구계산과 마찬가지로 세균용 계산판에 균액을 한 방울 떨어뜨리고 일정구획내의 세균을 직접 현미경을 보면서 계산하는 방법. 이것은 생균, 사균을 포함한 전균수를 측정하는 방법으로 균수가 너무 적으면 부정확하다.② 비탁법: 균액의 혼탁도에 따라 균수 측정③ 중량법: 세균 하나의 무게를 대략 10^-9mg으로 하고 균의 전체 무게를 측정하여 세균의 수 측정2) 생균수 측정법: 한개의 세균은 한 개의 집락을 만든다는 가정 아래 세균 수 측정. 계측한 균수는 집락형성단위 (Colony Forming Unit ; CFU)로 표시① 평판혼합희석배양법: 균액을 적당히 희석(보통 10배 단계 희석)하여 그 일정량(보통1ml)을 43~45℃로 보온해 둔 한번재비 약 200ml와 함께 혼합하여 petri dish에 넣고 굳힌 후 배양. 배양 후 발생한 집락수에 의해 생균수 계산② 평판도말법: 용해한 한번배지 대신 한천평판을 사용. 희석한 균액의 일정량(보통0.1ml)을 한천평판에 표면에 균등하게 도말한 다음 배양, 계산.③ Membrane Filter법: 세균을 통과시키지 않는 Membrane Filter를 이용하여 생균수 측정Membrane Filter로 세균을 여과시켜 그것을 한천배지에 배양한 후 Membrane Filter 위에 발생한 집락수를 세어 측정. 균 수가 적은 재료의 균 수를 측정할 때 쓰이는 방법으로 해수나 음료수 중의 수질 검사로 세균 수를 구할 때 흔히 이용▶준비물배지 파우더, 증류수, 삼각플라스크, 저울, 유산지, Auto clave, 알루미늄 호일, 페트리 디쉬, 시험관, 피펫, 삼각 유리봉, 70%알코올, 증류수, 백금이, 미생물 시료 (Escherichia coli KCCM 20152)▶실험방법-spreading 법1. 실험에 앞서 70% 에탄올로 손을 소독하고 실험하는 동안 무균 조건을 유지하는 것에 유의해야 한다.2. plate에 실험 날짜, 실험자 성명, 도말한 미생물 종류, 희석배율에 대해 라벨링한다. 오늘은 10-1부터 10-6까지 희석할 것이다.3. 멸균된 유리 삼각 봉을 준비하고 항상 비커위에 올려둔다.4. Escherichia coli KCCM 20152 시료에서 0.1㎖를 취해 증류수 0.9㎖와 섞는다.5. 과정 4에서 제조된 희석 액을 0.1㎖ 취해 증류수 0.9㎖와 섞는다. 6개를 반복한다. 잘 섞이게 볼텍싱 해준다.6. 마지막 희석 액을 0.1㎖를 취해 고체 배지에 뿌린다. 삼각 봉을 문지른다. 배지 전체에 골고루 퍼트리기 위해 배지를 조금씩 돌리면서 바른다.7. 나머지 5개의 희석액도 낮은 배수부터 높은 배수까지 차례로 각 배지에 뿌리고, 삼각 봉으로 도말해준다. 다 사용한 삼각봉은 반드시 멸균할 것.8. 도말된 플레이트를 인큐베이터에서 약 24시간 배양한 후 콜로니를 확인한다.-Pour법1. 미리 열로 용해하여 약 55℃로 식힌 한천배지를 15~20ml 씩 무균 적으로 주입한다. 페트리 디쉬 뚜껑에 배지가 묻지 않도록 주의!!2. 시료와 배지를 잘 섞은 후 배지를 굳힌다.※시료 액 중에 있는 세균에게 장애를 주지 않기 위하여 배지의 온도는 될 수 있는 대로 낮추는 것이 좋다. 40~50℃는 페트리 디시에서 시료액과 배지의 혼합과정이 완료될 때까지 한천이 굳지 않도록 약간의 여유가 있는 온도이다. 열에 민감한 세균을 다룰 때에는 평판도말 배양법으로 하는 것이 좋다.※시료를 패트리 디시에 넣고 배지를 부울 때까지는 20분이 넘어서는 안 된다▶실험 결과#1#210-110-210-310-410-510-6-pour법-스프레드법#1#210-110-210-310-410-510-6-pour법20×106×10 = 2×10828×106×10 = 2.8×108-spread법62×106104×106▶고찰이번 실험은 첫 번째와 두 번째 때 했던 낙하균실험과 배지실험을 바탕으로 균을 배양하는 두 가지 방법과 직접 수를 계산해보는 시간을 가졌다. 간단히 말하면 pour법은 배지 표면 뿐 아니라 고체 배지 사이사이에서도 미생물을 배양시킬 수 있는 방법이고, spread법은 이미 굳은 배지 표면에 도말하여 표면에만 미생물이 자라게 하는 방법이다. 나는 pour법은 처음 해봤고, spread법은 익숙했는데 친구의 실험실에서는 pour법을 더 많이 쓴다고 했다.결과 사진을 살펴보면, 먼저, pour법, 전체적으로 희석과 상관없이 10의 3승 이상에서는 표면 미생물과 배지 안 미생물이 둘 다 발견 되었고, 10의 5승정도 되어야 모양을 알아볼 수 있었다. 물론 두 개의 균은 모양이 다른 걸로 보아 다른 종의 균 같다. 5조원들끼리 토의 해보고, 질문해 본 결과 표면에서 자란 미생물만 e.coli라고 결론이 났다. 좁쌀 같이 생긴 배지 안 미생물은 실험실의 떠돌아다니던 낙하 균인 것 같았다. 처음 카운팅을 할 때에는 그것도 모르고 모든 균을 다 세었더니 214, 181개였는데 결국 e.coli만 다시 세어보았더니 28,20개로 나왔다. 낙하 균이 배지가 굳을 때 침입한 모양이다. 이유로는 원래 미생물을 다룰 때에는 클린벤치 안에서 작업을 하고, 모든 기구들도 알코올램프에 화염 멸균하여 사용한다. 하지만 우리는 그러지 못하였고, 그 사이에 많이 낙하했나보다. 좁쌀처럼 생긴 낙하 균은 굉장히 모양이 특이했다. 다 아무렇게나 막 자른 색종이의 조각같이 자라있었다.
2013. 3. 22 project No. 2▶실험 제목 : PCA 배지 제조 & Streaking▶실험 목적 : 미생물의 생육조건과 사용목적에 따라 배지를 직접 제조하고 미생물을 접종하고 관찰한다.▶이론 : 세균은 자연에서 거의 단독으로 사는 일이 없다. 한 종류의 세균을 배양하는 것을 ‘순수배양’이라고 한다. 미생물학자는 항상 세균의 순수배양을 연구한다. 왜냐하면 한 세균의 생김새나 생리적 성질을 알 수 있는 유일한 방법이기 때문이다. 1850년대 루이스 파스퇴르는 ‘순수 배양’의 개념을 발달시킨다. 순수배지를 이용한 실험은 우리가 세균 종에 대해 공부할 수 있게 해줬으므로 이 발달은 매우 중요한 사건이다. 1880년대 로버트 코흐는 세균 접종을 위한 Streaking 과정을 확립시킨다. streaking의 목적은 독립된 콜로니를 얻기 위함이다. 이 독립된 콜로니는 하나의 셀에서 증식한 똑같이 생긴 수 억 개의 세균에서 따 온 것이다. 독립된 콜로니를 채취해서 다시 streaking 하면 또 다른 독립된 콜로니를 얻을 수 있다. 이 방법은 모든 미생물학 실험실에서 가장 기본적인 과정이다.* 배지의 종류①재료에 따른 분류-천연배지 : 배지 재료가 천연물이고, 조성이 확실히 알려져 있지 않다.-합성배지 : 화학 조성이 알려져 있는 재료 만으로 만들어진 배지이다.-반합성배지 : 합성배지의 일부를 peptone, yeast extract 등 화학 조성이 밝혀지지 않은 천연물로 바꾸어 놓은 배지이다.②사용 형태에 따른 분류-액체배지 : 한천이 들어있지 않은 액상의 배지이며 이들은 미생물의 증식에 이용되고 세균의 생화학적 검사, 증식, 대사산물을 검출할 목적으로 쓰인다.-고체배지 : 액체배지에 한천, 젤라틴 또는 실리카겔을 첨가하여 굳힌 것으로 미생물의 보존 배양 등에 사용된다.# 평판배지 (plate media) : 배양 접시에 배지를 약 4mm두께 정도 넣어 굳힌 것 이다. 호기성 미생물 분리배양, 콜로니 관찰 등에 사용된다.# 고층배지 (butt media) : 시험관을 세운 배지를 굳힌 것이다. 통성 혐기성 세균 보 존, 유동성 검사에 쓰인다.# 사면배지 (slant media) : 시험관에 배지가 약 45° 경사가 되도록 굳힌 것이다. 호기 성 미생물의 증식에 쓰인다.# 반사면배지 (semi-slant media) : 고층배지의 ⅓정도만 경사지게 만든 것이다.③사용 목적에 따른 분류-보통배지 : 될 수 있는 한 많은 미생물들이 생육할 수 있도록 제조된 배지로서 NA이 대표적이다.-특수배지#선택배지 : 원하는 미생물만 자라고 다른 미생물의 생육은 억제하는 배지.#판별배지 : 미생물의 생화학적 성질을 이용하여 여러 미생물들이 섞여 있는 곳에서 특정 미생물을 판별하기 위해 만들어진 배지.#증식배지 : 보통배지에서 잘 안자라거나, 생육이 나쁜 미생물의 생장, 증식을 촉진시 키는 배지.▶준비물- PCA 배지 제조 : 배지 파우더, 증류수, 삼각플라스크, 저울, 유산지, Auto clave, 알루미 늄 호일, 페트리디쉬 2개- streaking : 일회용 백금이& 백금선, 균이 들어있는 시험관 (E.coli), 멸균된 PCA배지.▶실험방법-PCA 배지 제조①유산지를 이용해 저울로 배지량을 잰다. 영점조절은 필수. 오늘 실험은 100㎖ 두 개를 만들 것이므로 각 플라스크마다 2.3~2.4g 배지가 필요하다.②실린더에 증류수 양(100㎖)을 미리 재어 놓고 삼각플라스크에 따른다. 많은 양을 만들 때는 넘칠 수도 있으니 넉넉한 플라스크 사용할 것. 배지와 함께 잘 섞어준다.③플라스크 입구를 호일로 덮고, 멸균 테이프를 붙여 autoclave에서 가압멸균한다. (120℃에서 15분 2기압)④멸균된 용액을 페트리 디쉬에 약 20㎖ 씩 분주하여 무균 적으로 건조시킨다. 뚜껑을 덮으면 수증기가 생기므로 살짝 열어둔다.-Streaking①평판배지 접종할 때에는 백금이가 필요하다. 오늘은 일회용 백금이 사용. 이미 배양 되어있는 세균 한 콜로니를 소량만 딴다. (피검시료: Escherichia coli ATCC 10536)②그림과 같이 도말해준다.③응결수의 낙하를 피하기 위하여 도말된 페트리 접시는 도치하여 항온기(35℃)에 넣어 배양시킨다.④사면배지 접종할 때에는 백금선이 필요하다. 백금선 또한 일회용 사용. 세균 한 콜로니를 소량만 딴다.⑤응축 수에 담갔다가 안쪽부터 지그재그를 그리며 위쪽까지 접종한다.⑥평판배지와 같은 항온기에 넣어 배양시킨다. 실험이 끝난 후, 70% 알코올로 손과 실험복, 실험책상을 소독한다.▶실험 결과▶고찰Streaking은 아주 기본적이고 필수적인 실험이다. 배지 만드는 것은 더 더욱 기본적인 것이다. 간단하고 기초적이지만 결과가 아주 완벽하게 나오진 않았다. 우선 평판배지의 배양된 모양을 보면 왼쪽 것은 마지막 도말 방향에 단일 콜로니가 많이 보이지 않는다. 선이 아니라 점선의 형태로 나와야 되는데 선으로 나타났다. 군데군데 독립된 콜로니가 보이기는 하나, 균의 농도가 갈수록 감소되어 독립 집단이 형성되는 모양은 아니다. 처음에 양을 너무 많이 채취했거나 마지막 도말 방향을 그을 때 미리 그었던 선과 많이 닿았나보다. 반면에 오른쪽 것은 마지막 도말 방향이 점선으로 배양 되었다. 선이 아니고 독립된 콜로니로 이뤄진 점선이다. 또한 도말 첫 번째 방향부터 마지막 방향까지 균의 농도가 갈수록 감소되어진 것을 볼 수 있다. 우리가 streaking을 하면서 전에 배양되었던 E.coli 균을 따서 썼는데, 그 배지 모양과 거의 비슷하게 나타났다. 나중에 균을 또 배양하고 싶을 때는 왼쪽 보다는 오른쪽배지에서 채취하는 것이 더 쉬울 것이다. 마지막 도말 방향에서 한 콜로니를 건지면 된다. 왼쪽의 결과와 같이 너무 많이 건지면 독립 집단이 안 나올 수도 있으니 아주 소량만 건져오는 것이 중요하겠다.사면 배지 또한 그다지 결과가 명확해 보이지 않는다. 평판 배지의 경우 농도를 줄여주는 4단계의 도말을 한다. 하지만 사면 배지의 사면은 너무 좁아서 농도가 줄어들지 않았나보다. 왼쪽이나 오른쪽이나 단일 콜로니는 찾아 볼 수가 없다. 이유는 처음에 균을 채취할 때 너무 많은 양을 사용한 것 같다. 평판 배지보다 더욱 더 조금만 집었어야 하는데 그렇지 않았다. 실험을 하는 당시에는 너무 조금 채취해서 안 나오면 어쩌지 라고 생각했는데 세균의 크기를 생각해보면 티끌만큼만 건졌어도 충분했을 것 같다. 다음에는 욕심을 부리지 않고 아주 조금만 채취해야겠다. 눈에 보이지 않는 세균의 크기를 짐작할 수 있었던 시간이었다.
