주변에서 계획적인 사람들을 보면 일, 주, 월, 년단위로 “해야할 일”을 기록하고, 하나하나 해결해나가는 모습을 보인다. 이것이 잘못된 것은 아니지만 한 가지 착각에 빠질 수 있다. 바로 “모든 일이 중요하다.”라는 것이다. 사실을 그렇지 않다. 한 가지 예를 들어 “작가 지망생”이 있다고 하자. 이 사람은 작가가 되기 위해 여러 계획을 세울 것이다. 그 중에는 여러 분야의 책을 읽기, 자신이 좋아하는 작가의 토크쇼에 참여하기, 체력을 기르기 위해 꾸준히 운동하기 등 여러가지가 있겠지만 실질적으로 가장 중요한 일 하나는 “글을 쓰는 것” 이다. 만약 이 지망생이 글 쓰기를 포함한 앞서 언급된 3가지의 일을 동시에 진행한다면 어떻게 될까? 필자는 이 행위가 잘못된 것이라 말한다. “파레토의 법칙”이라 불리는 일명 80 : 20 법칙은 “결과의 80%는 20%의 원인에서 비롯된다.”라고 주장한다. 이처럼 우리는 “모든 일을 끝마치는 것”이 아닌, “가장 중요한 일 하나에 파고드는 것”이 성공으로 가는 길임을 알아야 한다. 효율 하면 생각나는 단어인 “멀티 테스킹” 의 유래는 컴퓨터에서 비롯되었다. 컴퓨터의 작업 처리 속도가 인간의 기준에선 상상을 초월할 만큼의 속도인지라 이를 위한 새로운 단어가 고안되었고, 그것이 바로 멀티 테스킹이다. 직역하자면 “동시에 여러가지 일을 하는 능력”이지만, 이는 엄청난 거짓말이다. 정작 대상이 되는 컴퓨터마저 세세히 들여다보면 한 번에 하나의 코드를 처리할 뿐, 동시에 여러 코드를 처리하지 못하기 때문이다
0장. 논평여러 자기계발서들을 읽다보면, 책의 서술 방식에 따라 두 가지 정도로 분류할 수 있 다. 하나는, 추상적인 어구로 이루어진 뜬구름 잡는 소리만 하는 책들이거나..<중 략>2장. 마무리5개월 동안 내가 사용한 도구들은 61가지 중 고작 6가지 정도로, 10%에 불과하다. 하지만, 이 10%가 나에게 준 영향은 지대하다. 아침에 할 5단계의 일을 준비하자 아침을 맞이하는 것이 더 이상 두렵지 않았다. 아침을 성공적으로 시작하자 “봐바. 해냈잖아? 오늘 나에게 찾아올 모든 시련도 이렇게 해결할 수 있어.”라는 마음이 쌓이기 시작하자 인생을 보다 당당히 마주할 수 있게 되었다.아이디어를 쓰다보니, 어느새 이모티콘 그림과 유튜브 영상 촬영, 독후감 쓰기 등 나름의 수익활동을 위한 활동을 늘리기 시작했고, 지금 당장 주목받지 못하더라도 버티면 언젠가 기회가 온다는 생각에 현재의 무관심에 지치지 않을 수 있다.지금 내 감상문을 읽는 이에게 전하고 싶다. 이 책을 읽는다고해서, 이 책대로 산다고 해서 반드시 성공이 보장되는 것은 아니다. 하지만, 호랑이를 잡으려면 호랑이 굴에 가야하듯, 이미 호랑이를 잡은 사람들이 한대로 생활하다보면 호랑이는 못잡더라도 여우나 하다못해 토끼정도는 잡을 수 있을 것이다.내가 이 책에서 6개의 도구를 찾은 것처럼, 당신도 당신에게 맞는 도구를 찾기를 기도한다.
사피엔스는 “호모 사피엔스”의 발단 4단계 “인지 혁명”, “농업 혁명”, “인류적 통합”, “과학 혁명”으로 나누어 역사를 설명해준다.인지 혁명은 “사피엔스”를 그저 그런 유인원에서 다른 동물들과 구분되는 “특별한 종”으로 만들어주었고, 농업 혁명은 “사피엔스 종적 측면의 진화적 성공”이라는 점에서, “인류적 통합”은 생물학적 한계를 뛰어넘은 협력을 이뤄냈다는 점에서 그 의미가 있다. 마지막 “과학 혁명”은 인류의 힘과 지식에 대한 발전이 곧 “호모 사피엔스의 종말”을 가져올지도 모른다는 우려 섞인 조언을 끝으로 글을 마친다.각 장에서 우리는 기존의 고정관념에서 벗어날 수 있는 기회를 제공받는다. (가령 농업 혁명이 전해준 진화가 행복과는 거리가 멀다는 점, 우리가 진리라믿는 사회적 규범과 가치가 우리의 허구, 거짓말 속에서나 존재한다는 점, 제국이 꼭 나쁜 것만은 아니라는 점 등)그 중 나의 머리를 울렸던 글귀는 우리가 역사를 공부하는 이유가 “역사는 반복된다.”는 것 때문이 아니라는 점이다. 단지, 모든 역사적 시점에는 여러 선택지가 존재했고, 지금의 우리 앞에도 수많은 선택지가 존재하며, 선택에 대한 결과는 그 누구도 예상하지 못하고 있다는 점이다(해당 책에서 모든 기준은 개인이 아닌 “사피엔스 전체”라는 것을 기억하자.).과거와 현재의 상황을 비교하며 최선의 선택을 하기에는 인류의 발전 속도는 너무나 빠르다. 이러한 진화의 파도 속에서 글쓴이는 “어느 방향이 옳은 것인지” 에 얽매이지 말고 “어떤 방향으로도 갈 수 있으나, 그 끝은 아무도 모르니 눈앞의 교차로보다 그 끝을 보기 위해 노력하라”고 말하는 것만 같다.나의 삶에 있어 우유부단한 순간이 올 때마다 내 머릿속 어디선가 작가의 말이 울리는 듯 하다.“어느 선택이 옳은 것인지 말고, 무엇이 되고 싶은지 생각하라.”2024년 01월 08일
3주차 미생물의 배양배지의 제조 및 시료채취1. 실험 제목 (subject) : 미생물의 배양배지의 제조 및 시료 채취2. 실험 목적 (purpose) : 미생물학 실험에서는 특이한 성질을 지닌 미생물을 분리, 배양하거나 조사해야할 필요가 있다. 이 때 반드시 필요한 도구가 배양배지이다. 따라서, 미생물학 실험에 필수적인 배양배지의 제조 방법을 숙지해야 한다.{}^{1)}3. 배경지식 (background knowledge)-배지(medium)배지란, 미생물의 발육을 위한 영양 물질로사 미생물의 종류, 생리적 조건, 실험목적에 따라 달라지며 크게 액체배지와 고체 배지로 나뉜다. 미생물의 보존 배양, 순수분리를 위해 사용되며 무기물질, 아미노산, 비타민 및 발육인자가 적당량 함유되어있다. 미생물은 다양한 영양요구성을 나타내므로 미생물을 배양하고 분리 동정하기 위해서는 적절한 배지의 선정과 함께 배지의 멸균과 제조가 이뤄져야 한다.{}^{1)}-배지의 성분pepton : 카제인, 동물의 육류 등의 단백질을 pepsin 또는 trypsin, pancreatin등의 효소로 소화시켜 미량의 proteose를 함유한 작은 분자의 황색 분말로서 수용상태에서는 황갈색의 약산 산성을 나타낸다.{}^{3)} meat extract : 쇠고기의 근육부분에서 수용성 침출물을 추출해서 농축시켜 만든 것으로, 염류, 발육소, 핵산성분, 기타당분, 아미노산, 비응고성 단백질을 제공한다.{}^{3)} yeast extract : 효모에서 추출한 수용성 침출물질로서 담황색 분말이다. 염류, 발육소 핵산성분, 당분, 아미노산, 비 응고성 단백질 등을 세균대사에 제공한다{}^{3)}-응고제gelatin : 동물의 뼈, 피부, 인대, 건 등을 끓여 그 액체를 건조시킨 황갈색의 입자 또는 분말이며 아교라고도 한다.{}^{3)}agar : 바다의 홍조류에서 추출되며 고체 배지의 제조 시 유용한 성질을 갖고 있다. 극히 일부 미생물을 제외한 대부분의 미생물은 한천을 분해하지 못한다. 따라서, 한천은 사용형태에 따른 분류-액체배지 : 응고제가 들어있지 않은 액상의 배지. 미생물의 증식에 이용되고, 세균의 생화학적 검사, 증식, 대사산물을 검출할 목적으로 사용된다.{}^{3)}-고체배지 : 액체배지에 한천, 젤라틴 혹은 실리카겔 등을 첨가하여 굳힌 것으로, 미생물의 보존배양, 순수분리 등에 사용된다.{}^{3)} =평판배지 : 배양점시에서 배지를 약 4mm 두께 정도로 넣어 굳힌 것으로, 주로 호기성미생물의 분리배양, colony의 관찰등에 이용된다.{}^{3)} =고층배지 : 시험관을 세운 배지를 굳힌 것으로, 주로 세균의 성상검사, 통성 혐기성 세균의 보존, 세균의 유동성 검사등에 이용된다.{}^{3)} =사면배지 : 시험관에 배지가 약 45도 경사가 되도록 굳힌 것으로 호기성 미생물의 증식, 보존 등에 사용된다.{}^{3)} =반사면 배지 : 고층배지의 1/3정도를 경사지게 만든 것을 의미한다. 세균의 생화학적 검사에 이용된다.{}^{3)}사용목적에 따른 분류-보통배지 : 가능한 많은 미생물이 생육할 수 있도록 제조된 배지{}^{3)}-특수배지 : 특수한 목적을 가지고 제작된 배지{}^{3)} =선택배지 : 목적하는 미생물의 생육을 증진시키고 다른 미생물의 생육이 억제되도록 만들어진 배로서 토양 혹은 병든 조직에서 목적하는 균을 분리 배양하기 위해서 많은 선택배지가 고안되고 있다.{}^{3)} =판별배지 : 미생물의 생화학적 성질을 이용하여 여러 미생물이 혼재되어있는 곳에서 목적으로 하는 미생물을 판별 또는 확인하기 위해서 만들어진 배지이다.{}^{3)} =증식배지 : 보통배지에서는 생육이 잘 안되거나, 또는 생육이 나쁜 미생물의 생장, 증식을 촉진시키는 것을 목적으로 하는 배지{}^{3)} =생화학적 실험용 배지 : 생화학적 성질의 조사를 위한 것이나, 세균의 분류, 동정을 위해 여러 종류가 개발되어있다.{}^{3)}-LB배지Lysogeny Broth(용원성 환경의 생활사) 또는 Luria Bertani(과학자의 이름)의 약자이다. DW 1L 당 10eading과 streaking, Pour-plate=spreading : 평면 도말법, 희석된 시료를 소량 취해서 고체 배지의 표면에 넣고 rodder을 사용하여 도말시키는 방법. 균액의 많고 적음에 관계 없이 순수 배양 집락을 얻기 위한 가장 기본적인 방법이다.{}^{3)} =streaking : 획선평판법, 백금이를 사용하여 혼합시료를 petri dish 중의 고체 배지 표면에 종횡으로 여러번 긋는다. 이론적으로는 이같이 백금이를 고체 배지 표면에 반복하여 긋는 동안, 백금이로부터 세균이 차례로 떨어져 나오고 각각의 세포는 생육하여 colony를 형성하게 된다.{}^{3)} =Pour-plate : 주입평판법, 시료를 여러번 희석하여 각각의 희석액을 소량 취해서 용해된 각각의 고체배지와 혼합하여 petri dish에 붓는다. 이 때 몇몇 petri dish에서는 분리된 colony가 형성될 것이다.{}^{3)}-시료 채집 방법1) 토양시료 : 평탄지는 한필지에서 일정한 간격으로 토양시료를 채취하고, 경사지에서는 상, 중, 하부 지역으로 구분하여 채취한다. 필지별 5~10개 지점에서 토양시료를 채취하여 잘 혼합되게 골고루 섞어 1kg정도 만들어 시료봉투 에 담아 분석한다. 이 때, 삽을 이용하여 표토 1~2cm를 걷어내고 난 이후의 토양을 채집하는 것이 좋다. 시료가 담긴 봉투에 분석 대상지 지번, 지적, 작목(과수는 연령), 지목, 경작자 성명, 집주소, 연락처 등을 기재한다.{}^{6)}2) 수질시료: 용기의 재질 성분이 우러나지 않는 무색의 경질 유리병 또는 폴리에틸렌 용기를 사용한다.특히 미생물 검사용 시료의 용기는 반드시 멸균처리 된 용기를 사용하여야 한다. 상수도와 같은 수도꼭지를 통해 채취할 경우, 반드시 가스 토치 등의 불꽃으로 1~2분간 소독 후 적당량의 물을 흘려보내 수도관 내 고인 물을 버린 다음 채취한다. 운송 거리가 멀거나 날씨가 더울 때는 반드시 아이스박스에 넣어 4 ℃ 이하로 냉장운송 하여야 한다.{}^{7)}3) 대기 시료다른 라스크autoclamp70% ethanolglass spreaderbalancepipet-aid, tipconical tubeincubater약수저micropipette, tip (1000㎕, 200㎕)measuring cylinderdry oven유산지alcohol lampvortexpetri dishLB가루(이름 알아보기)clean benchlaboratory film4-2. 방법1) LB medium 제작-LB medium 조성은, 1L당 tryptone 10g, Yeast extract 5g, Sodium chloride 10g, Agar 5g을 필요로 한다. 이번 실험에서는 tryptone, yeast extract, codiumchloride의 조성이 맞춰진 시약을 사용하여 300ml를 제작하므로, 25 * 0.3 = 7.5, 해당 시약을 balance를 이용하여 7.5g 측정 후, 500ml 삼각플라스크에 넣는다.-measuring cylinder를 이용하여 DW를 삼각플라스크에 250ml 넣는다.-시약을 용해시킨 후, balance를 이용하여 agar 5* 0.3 = 1.5, 1.5g 측정 후, 삼각 플라스크에 넣는다.-상온에서 agar는 잘 용해되지 않으므로, 어느정도 침전이 되면, 300ml에서 부족한만큼 DW를 추가한다.-autoclamp에서 120°C, 20 min 동안 멸균한다. (이 때, micropipette tip들 또한 같이 멸균한다. 멸균 완료 후, 다음 과정이 진행되기 전까지 dry oven에 보관한다.)-멸균이 완료된 LB medium 용액을 clean bench로 옮긴다.-clean bench와 alcohol lamp를 이용하여 멸균상태를 유지하면서, petri dish에 약 20ml씩 붓는다. (인당 5개, 한 조당 15개의 LB medium을 제작한다.)-medium용액을 부은 petri dish를 돌려 고르게 퍼질 수 있도록 한 후, clean bench 안에서 응고시킨다.-약 하루 정도 건조 시킨 후 이용한다.2) nical tube에 1ml를 넣고, 혼합한다. (10^-2)-다시 1000㎕ micropipette을 이용하여, 다음 conical tube에 1ml를 넣고, 혼합한다. (10^-3)-고체시료의 경우-blance를 이용하여 시료 0.1g을 측정한 후, 10ml AFW conical tube에 넣고, vortex를 이용하여 혼합한다.-이후, 액체 시료의 과정을 반복하여 시료를 희석한다.3) spreading-clean bench 내에 LB medium, 희석된 시료, glass spreader, 200㎕ micropipette, alcohol lamp를 준비한다.-medium이 담긴 petri dish 밑면에 spreading할 시료의 농도를 적는다.-희석된 시료 100㎕(0.1ml)를 200㎕ micropipette을 이용하여 medium에 담는다.-glass spreader를 alcohol lamp를 이용하여 멸균한다.-멸균된 glass spreader를 이용하여 시료가 마를 때까지 medium에 spreading한다.-spreaidng을 마친 petri dish 옆을 laboratory film을 이용하여 밀봉하고 29°C incubater에 보관하고, 사용하지 않은 medium은 냉장실에 보관한다.4-3. 주의사항-최초 배지 용액 제작 시, 과도한 기포가 생기지 않도록 주의한다.-pipet aid 사용과정에서, tip이 AFW 병 입구 등 다른 물체와 접촉되면, 반드시 tip을 교체한 후 실험을 진행한다. 또한, tip의 두가지 눈금 중 가장 윗부분에 10ml 눈금이 적혀진 부분이 관찰하기 용이한 방향으로 설정한 후 사용한다.-삼각플라스크 세척 시, DW를 이용한다.(수돗물 이용 X)-시료 원본은 냉장고에, 희석된 시료는 29°C 또는 35°C incubator에 보관한다.(이번 실험에서, 시료 채집 시 온도가 23°C 였으므로, 이에 가까운 29°C 에 보관하였다.-고체 시료 사용시, 과도한 vortex 사용은 시료 내 세균의 파괴를 유발할 수 있다.한다.
미생물 생리학 실험 보고서1. Title현미경 사용법 및 미생물 염색2. Date2020. 11. 05. Thr3. Object토양 시료 및 수계 시료를 채취하여 형광 현미경을 이용한 총세균수를 측정한다.4. Introduction4-1. 형광현미경과 형광 염색- 형광 염색관찰하고자 하는 세포를 형광물질을 이용하여 관찰하는 방법이다. 형광 물질을 직접 세포에 염색시키거나, 형광표기가 부착된 항체 또는 vector를 이용하는 종류가 있다.주로 사용하는 형광 시료로는 Acridine Orange(AO)와 4',6-diamidino-2-phenylindole(DAPI)가 있다.Acridine Orange는 세포의 DNA와 RNA에 결합하는 방법을 통해 세포를 염색하는 시료이다. DNA와 결합하였을 경우, 녹색 형광을, RNA와 결합하였을 경우 적색 형광을 방출하는 것이 특징이다.DAPI는 DNA의 adenine-thymine 부위에 강하게 결합이 가능하며, 초자외선(358nm)에 노출되었을 때 파란빛(최대 461nm)을 방출하는 것이 특징이다. RNA와도 전기적으로 결합이 가능하나, DNA보다는 그 힘이 약하며, 초자외선에 노출되었을 때 녹색(500nm)의 빛을 방출한다.- 형광 현미경형광성 물질을 함유하거나, 이로 염색된 세포를 관찰하기 위해 사용하는 현미경이다. 일반적인 광학현미경과는 달리, 자외선 등 특정 파장의 빛을 이용하는 것이 특징이다.또한, 세포 내 단백질 등 특정 물질에 형광성 물질이 부착될 경우, 이들의 이동경로 및 세포내 분포 정도를 확인할 수 있다.형광 현미경을 사용할 시, 외부 광원에 의해 관찰값에 이상이 생기는 것을 방지하기 위해 암실에서 관찰을 진행하는 것이 특징이다.- AODC와 Live dead baclightAODC(Acridine Orange Direct Count)는 형광 염료인 Acridine Orange를 이용하여 세포를 염색한 후, 형광 현미경을 이용하여 관찰한 후, 직접 계수하는 방법이다. AO가 nucleic acid backbone과 결합한다는 점을 이용하여 세포와 환경을 구별할 수 있다는 장점과, 세포 내 DNA와 RNA의 분포 정도를 알 수 있다는 장점이 있다. 그러나, 생세포와 사세포의 핵산에 모두 결합이 가능하여 세포의 생사 여부를 확인할 수 없다는 단점이 있다.이러한 AODC의 단점을 보완한 방법이 Live/dead baclight 이다. Live/Dead Fixable dead cell stain이라고도 하며, 형광 반응 염료와 세포내 amine의 반응을 기반으로한 염색 방법이다.Live/dead baclight 염료의 경우 생세포의 세포막은 관통할 수 없고, 사세포의 세포막만을 관통할 수 있다. 이로 인해 생세포의 경우 세포막의 amine에만 결합하고, 사세포의 경우 세포 내외의 amine 모두와 반응한다는 차이로 인해 이 둘을 구별할 수 있다. 생세포의 경우 붉은색으로, 사세포의 경우 녹색으로 관찰되는 것이 특징이며, LIVE/DEAD Cell Vitality Kit의 경우, 손상된 세포는 청색으로 관찰되기도 한다.4-2. 미생물 계수법(Counting method)- 대략 희석법(Dilution method)미생물을 계수하고자 하는 시료를 연속적으로 희석한 후, 희석시료 내에서 미생물을 계수하는 방법을 통해 원시료의 미생물 수를 측정하는 방법이다. 대표적인 방법으로는 Colony counting이 있으며, 이는 plate에 배양시켜 생성되는 colony를 계수하는 방법으로 미생물을 계수하는 방법이다.Colony는 살아있는 세포만이 형성할 수 있으므로, 시료 내에 생균수를 측정할 수 있다는 장점이 있다. 그러나, 모든 세균이 분리되고 배양이 진행되는 과정에서 생존해야한다는 이상적인 조건 하에서만 완벽한 결과를 도출할 수 있다는 단점이 있다.- 간접적 방법(Indirect method)탁도 측정(turbidity measure) 방법과 전기적 세포 계수 방법(electronic cell counting)이 있다. 탁도 측정법은 미생물이 현탁된 용액의 탁도를 광도계(photometer)를 이용하여 측정하는 방법으로 손쉽게 수행할 수 있는 장점이 있다. 그러나 정확한 계수를 위해서는 군락 계수법(colony counting)과 병행하여 수행되어야 하며, 용액에 현탁된 미생물의 총수를 계수할 수 있을 뿐 생존(viable) 미생물과 비생존(non-viable) 미생물을 구분할 방법이 없고, 미생물 이외의 유기 혹은 무기 입자가 오염되어 있는 경우 그 정확도가 현저히 떨어진다는 단점이 있다. 또한, 유의한 수준의 탁도를 측정하기 위해서는 용액에 현탁되어 있는 미생물의 농도가 높아야 하는 단점이 있다.- 직접 계수법(Direct method)현미경을 이용하여 미생물의 수를 직접 계수하는 방법이다. 전통적 방법으로는 특별히 고안된 헤모사이토미터(hemocytometer)를 이용하여 명시야 현미경으로 직접 미생물을 계수하는 방법이 있다. 이 방법은 매우 간단하고 저렴하며 신속하게 수행할 수 있는 장점이 있다. 그러나 대부분 수 마이크로미터 이하인 미생물을 명시야 현미경으로 관찰하기 위해서는 고배율(예. 100x)의 대물렌즈를 사용하여 다수의 시야를 관찰해야 하므로, 노동 집약적이고 시간이 많이 소요되는 작업을 필요로 한다.또한, 생존 미생물과 비생존 미생물을 구분할 수 없고, 용액에 섞여있는 비생물적 입자를 구분할 수 없다는 단점이 있다.5. Materials & Methods5-1. Materials- 자연 하천 시료Acridine Orange(AO)- micropipet- 1x PBS buffer- membrane filter- DW- Slide glass- Cover glass- immersion oil- 형광 현미경- e-tube5-2. Methods- Sample 제작1) 하천에서 채집한 액체시료 100㎕와 1xPBS buffer 900㎕를 e-tube에 혼합하여 1/10 농도의 시료를 제작한다.2) 여과장치에 membrane filter를 설치한 후, micropipet을 이용하여 희석한 시료를 여과장치에 넣은 후 장치를 작동시킨다.3) AO 500㎕를 첨가한 후 염색을 5min간 진행시킨다. 염색이 종료된 이후 여과장치를 작동시켜 AO를 제거한다.4) DW 1000㎕를 첨가한 후 장치를 작동시켜 washing을 진행한다. washing 단계는 총 2회 진행한다.5) Slid glass에 membrane filter를 옮긴 후 immersion oil을 한방울 첨가한 후, cover glass를 닫는다. 이후 빛을 차단한 실온 조건에서 10~15min간 건조한다.- Sample 관찰1) 제작된 sample을 형광현미경을 이용하여 관찰한다. 관찰 배율은 1500배율로, 암실에서 진행한다.6. Results6-1. Results figureFigure 6.1. Acridine Orange를 이용한 형광염색 관찰 사진동일한 시료를 관찰한 3조(좌)와 4조(우)의 결과 사진으로, 시료 희석배율은 1/10이며, 관찰 배율은 1500배율이다.(15X100)양측 모두에서 거의 모든 세포가 적색으로 관찰되었고, 특히 4조 결과에서는 녹색으로 관찰된 세포를 1개 확인할 수 있다. (우측 사진의 흰색 원)육안으로 측정한 세포 수는 3조 약 117개, 4조 약 120개 이다.6-2. 세균 수 측정 문제 해결- 문제 : 시료 12ml를 1/10으로 희석한 뒤, AODC를 진행하였다. 3번에 걸쳐 10 mash를 계수한 결과 각각 142, 98, 112 cells관찰되었다. 이 때 총균수를 구하시오.(단, filter된 반지름 : 0.825 x 10^4 ㎛, 면적 : 2.14 x 10^8 ㎛², 1 mesh의 면적 : 1x10^2 ㎛²)- 계산 과정AODC에서 관찰된 세포를 측정하는 방법은 다음과 같다.총균수(cells/ml)`=` {측정된`cells`수} over {측정한`mesh} TIMES {filter`된`면적} over {1`mesh`면적} TIMES {희석배수의`역수} over {시료의`부피(ml)}측정된 cells수 / 측정한 mesh : mesh 한칸 당 존재하는 cells수를 계산하기 위함이다.filter된 면적 / 1 mesh의 면적 : 1 mesh 한칸 당 해당되는 filter 면적을 계산하기 위함이다.또한, 위의 문제에서 총 3번에 걸쳐 계수를 진행하였으므로, 각각의 결과값의 평균을 구하면 시료의 총균수를 측정할 수 있다. (또는 관찰된 cells의 평균을 측정된 cells로 이용하여 계산할 수 있다.)각 회차에 따른 결과는 다음과 같다.차수측정된 cells 수 (cells)총균수 (cells/ml)1차1423 x 10^72차982 x 10^73차1122 x 10^7평균-2 x 10^7따라서, 위의 문제에서 사용된 시료의 총균수는 2 x 10^7 cells/ml 이다.7. Discussion7-1. AO를 이용한 형광현미경 사진을 통한 시료 내 상태이번 실험에서 AO를 이용한 수계 시료 관찰 결과, 적색을 띄는 세포들이 관찰되었고, 이를 통해 시료 속 세포 내에는 RNA가 주로 분포되어있음을 알 수 있다.세포 내에서 RNA는 protein을 합성하기 위한 정보 전달체로서의 기능을 주로 수행한다. 이러한 RNA의 기능과, 형광 현미경 사진을 통해 추론한 시료 속 상태는 다음과 같다.세포 내 RNA가 많다는 점은 세포 내에서 단백질 생합성이 활발히 진행되고 있음을 의미한다. 이는 세포 분열에 필요한 물질(세포 소기관 등)의 합성이 활발함을 나타내고, 따라서 시료 속 세포들은 세포분열이 활발히 진행되고 있는 상태임을 알 수 있다. 세포가 세포 분열이 활발할 경우는 주변 환경에 세포가 사용가능한 영양물질이 풍부한 상태일 경우이다.