보관방법사용 전 : 냉장보관(2-8℃)사용 후 : 최대 1달간 냉장 또는 실온보관(30℃이하)주의사항• 절대 냉동보관하지 마세요• 직사광선을 피해주세요• 비행기탑승시 기내에 가지고 탑승하세요(화물칸 보관 시 얼 수 있음)주사시 통증이 심하다면?• 공기방울이 투여되지 않도록 공기제거 단계를 철저히 하세요• 알코올이 마른 후 단번에 바르게 주사하세요• 주사 후 문지르지 마시고 눌러주세요주사방법1. 주사침 장착용기 입구를 알코올솜으로 닦는다.1회용 주시침을 나사돌리듯 끼우고, 외부캡과 내부캡을 뺀다.(이때 외부캡은 사용 후 주사침을 안전하게 제거하는 데에 사용하도록 보관한다.)
INTRODUCTION갑상선 호르몬- 갑상선 호르몬은 거의 모든 장기에 작용한다.- 어린이의 경우, 갑상선 호르몬은 정상적인 성장과 발달에 필수적이다.- 성인의 경우, 대사 항상성을 유지하는 역할을 한다.- HPT축(뇌하수체-시상하부-갑상선축)은 갑상선호르몬 농도에 민감하게 반응하며, 갑상선호르몬 분비 변화로 말초 free 갑상선호르몬 농도를 좁은 범위로 유지한다.- 비정상적인 갑상선호르몬 농도, 갑상선비대 등으로 인한 증상에 주의를 기울여야 한다.갑상선호르몬 합성- 갑상선 세포 내 TG(Thyroglobulin)에서 갑상선호르몬(T4)와 T3합성이 일어난다.- 특이한 3차구조를 가지고 있고, TG의 Iodine화 된 티로신 잔기가 활성형 갑상선호르몬을 형성한다.T4 → T3 → rT3갑상선호르몬 합성/분비 억제제- Iodine 수송 억제 : Bromine, Fluorine, Luthium- Organification(Iodine붙이기)/coupling 억제 : Thionamides, Sulfonamide, Salicylamide, Antipyrine- 갑상선호르몬 분비억제 : Iodide LithiumHYPERTHYROIDISM and THYROTOXICOSIS - 갑상선중독증Tyrotoxicosis : 높은 T4, T3농도에 조직이 노출되어 생김 - 갑상선항진증Hyperthyrodism : 갑상선중독증의 하나, 갑상선호르몬의 과잉 생산 Epidemiology - 갑상선질환 경험 없음, 갑상선 약물복용X인 사람 중 갑상선항진증 (0.7%) - 임상적으로 확실한 갑상선항진증 (0.5%) - TSH농도 감소 : 20-30대에 가장 감소 큼, 이후 약해짐, 80세 이상부터 다시 감소정도 커짐 - 비정상적인 TSH농도 : 여>남 - 갑상선중독증 중 RAIU증가 : TSH-induced hyperthyroidism, tumor, Graves’ disease, adenoma, multinodular goiter
실험보고서실험제목 : 항원-항체 반응검색실험목적응집반응시험을 통해 항원-항체 응집을 관찰하고 항원-항체반응에 참여하는 분자에 대해 알아본다. .Ouchterlony test를 통해 항원에 대한 항체의 결합여부와 일치도를 확인한다.실험배경항원-항체 결합 측정법 : precipitation reaction in fluids/gels, ouchterlony double immunodiffusion, agglutination reactions, ELlSA(Enzyme-linked immunosorbent assay), immunofluorescence 등Agglutination reactions(응집반응)-항원이 항체와 결합 시 가시적 덩어리를 형성하는데, 이를 응집이라고 한다. 이런 반응을 일으키는 항체를 응집소라고 칭하며 응집반응은 원리상 침강반응과 유사하다.-단계적으로 희석한 항체로 실험하여 항체의 역가(titer)를 측정할 수 있다. 항체의 역가는 마지막으로 응집현상이 발생한 희석배수의 역수로 표시한다.Ouchterlony double immunodiffusion- 한천겔의 엷은 막을 유리판 위에 만들어 구멍을 뚫고, 항원액과 항혈청을 마주보도록 넣어 확산시킨다. 서로 충돌하여 항원 항체비가 최적이 되었을 때 침전물을 형성하는데, 이 침전물은 뚜렷한 흰 침강선으로 나타난다.- 형성되는 침강선이 융합, 교차 혹은 부분적 융합인지 판정하여 항원 일치여부를 알 수 있다. 침강선이 융합하는 경우, 즉 동일한 하나의 선이 형성되는 경우는 동일물질이다. 침강선이 교차하여 동일하지 않은 선이 생긴 경우에는 다른 물질로 두 물질 사이에 공통부분이 없다. 부분적으로 동일한 선, 예를 들어 A물질과 B물질간의 항원성을 비교한다고 할 때, B가 만드는 침강선이 A가 만드는 침강선과 일부 융합할 경우 B에는 A의 부분항원이 있다는 것을 알 수 있다.재료 및 방법응집반응시험1재료 : 항원(live Candida albicans), 단항체(B6.1 Monoclonal antibody specific for C.albicans), DPBS, 마이크로피펫, 슬라이드글라스방법슬라이드글라스에 원 세개를 그린다.첫번째, 두번째 원에 마이크로피펫을 이용하여 항원인 live Candida albicans를 각각 15µl씩 떨어뜨린다.세번째, 첫번째 원에 음성대조군인 DPBS를 각각 15µl씩 떨어뜨린다. 이 때, 첫번째 원을 나중으로 하여 미리 올린 항원과 약간 섞어준다.세번째, 두번째 원에 항체인 B6.1을 각각 15µl씩 떨어뜨린다. 이 때 두번째 원을 나중으로 하여 미리 올린 항원과 약간 섞어준다.마지막으로 플레이트를 살짝 돌려 섞어가며 응집반응을 관찰한다.응집반응시험2재료 : 항원(Candida albicans cell wall(CACW)-coated latex beads), 단항체(B6.1 monoclonal antibody specific for C.albicans, B6 monoclonal antibody), Latex beads, 마이크로피펫, 슬라이드글라스방법슬라이드글라스에 원 4개를 그린다.첫번째 원에는 CACW, B6.1을 마이크로피펫을 이용해 15µl씩 떨어뜨린다.두번째 원에는 항원 음성대조군으로 latex bead, B6.1을 15µl씩 떨어뜨린다세번째 원에는 CACW, B6를 15 µl씩 떨어뜨린다.네번째 원에는 latex bead, B6를 15 µl씩 떨어뜨린다.마지막으로 슬라이드글라스를 돌려가며 응집반응을 관찰한다.Ouchterlony test재료 : 항원(Candida albicans cell wall 1mg/ml), 단항체(B6.1 & B6 monoclonal antibodies specific for C.albicans (1mg/ml)), DPBS, 작은 사이즈 페트리접시 1% agar 배지, 마이크로피펫방법배지에 6개의 well을 만든다.가운데에는 항원인 Candida albicans cell wall 1mg/ml를 15 µl 넣는다.음성대조군으로서 DPBS, B6.1, B6.1, B6, B6 를 각각 15 µl씩 차례대로 well에 넣는다.48시간 동안 incubator에서 배양시킨다.형성된 침강선을 관찰한다.결과응집반응시험1첫번째 원은 뿌옇게 나타났고 침전은 관찰되지 않았다.두번째 원은 흰색 침전이 관찰되었다.세번째 원은 투명하게 나타났다.응집반응시험2첫번째 원(왼쪽 위)은 흰색 침전이 관찰되었다.두번째, 세번째, 네번째 원은 모두 뿌옇게 나타났고 침전은 관찰되지 않았다.Ouchterlony test : 침강선이 나타나지 않았다.고찰첫번째 응집반응에서는 항원인 Candida albicans와 단항체인 B6.1가 함께 존재하는 경우에 흰색침전이 생긴 것으로 볼때, 항원-항체응집반응이 일어난 것을 알 수 있었다. 또한 대조군으로 항원 또는 항체가 하나만 존재할 경우 침전이 생기지 않으므로 응집반응이 일어나지 않았음을 알 수 있었다.두번째 응집반응에서는 live C.albicans대신 C.albicans의 세포벽을 가진 latex bead(CACW)를 항원으로 사용하였다. CACW와 단항체 B6.1을 넣은 첫번째 원에서 첫번째 응집반응과 마찬가지로 흰색침전이 생긴것으로 볼 때, B6.1이 C.albicans의 세포벽에 있는 물질을 인식하여 결합한다는 것을 알 수 있었다. 또한 CACW와 단항체 B6를 넣은 세번째 원에서 응집반응이 일어나지 않은 것을 볼 때, B6가 B6.1보다는 항원에 대한 친화력이 떨어진다는 것을 알 수 있었다.Ouchterlony test를 통해서는 B6.1과 B6의 항원에 대한 친화력의 차이를 비교해 볼 수 있을 것으로 생각되었으나, 침강선이 아예 형성되지 않아 관찰할 수 없었다.참고문헌[1] wikipedia, “immunodiffusion”, Hyperlink "https://en.wikipedia.org/wiki/Immunodiffusion" https://en.wikipedia.org/wiki/Immunodiffusion