)일차 PCR후에 두 번째 primer set로 이차 PCR을 시행민감도와 특이도가 높아짐③ PCR-RFLPPCR-RFLP 발생된 돌연변이가 특정 제한효소에 의해 절단되는 염기서열 ... 로부터 reverse transcriptase (RT) 효소를 이용하여 cDNA를 합성하는 역전사 반응을 거친 후 cDNA를 주형으로 PCR시행② 이중 중합효소연쇄반응 (NestedPCR ... ④ Alle-specific PCR점 돌연변이의 검출에 이용한 쌍의 primer 중 하나는 정상인과 돌연변이를 가진 환자 모두에서 상보적이되도록 고안하고, 다른 하나의 primer는 정상