그람 염색법(Gram stain method)

소개

미생물학 - 그람염색법

목차

1. 제목
2. 실험목적 및 원리
3. 실험결과
4. 실험방법
5. 고찰

본문내용

1. 실험목적

세균을 연구하기 위해서는 그것을 관찰할 수 있어야 하고 그렇게 하기 위해서는 염색을 해야 세균을 볼 수 있다. 세균 염색에는 Gram 염색법이 있다. Gram 염색법에 의한 세균 감별 염색 방법을 익히고 Gram 양성, 음성에 따르는 세균의 분류와 이 실험의 원리 등을 이해하고자 본 실험을 수행하였다.

2. 실험방법(재료와 기구)

① Escherichia coli O157:H7와 Staphylococcus aureus를 준비한다.

② 슬라이드 글라스에 멸균된 증류수를 한 방울 떨어뜨리고 백금이를 소독하기 위해 알코올 램프의 불에 달군다. 그리고 백금이를 균이 없는 빈 공간이나 멸균수에서 조금 식힌 후에(바로 하면 달궈진 백금이에 균이 사멸할 수도 있기 때문에) 각각의 colony를 취하여 슬라이드 글라스 위에 잘 spread한다.

③ 알코올 램프의 불꽃 위에서 슬라이드 글라스 표본의 도말면을 위로 하여 좌우로 천천히 흔들면서 건조시킨다. 이 때, 너무 가까이 하면 슬라이드 글라스 위의 균이 사멸할 수도 있으니 불꽃에서 조금 떨어뜨려 건조시킨다. 건조시키는 것은 균의 fixing효과도 있다.

④ 표본 위에 Crystal violet을 떨어뜨리고 1분간 방치한다.

⑤ 표본의 도말면을 아래로 향하게 하여 약하게 흐르는 물로 Crystal violet 염색액이 묻어나오지 않을 때까지 세척한다.

⑥ 표본에 착색을 위해 Gram iodine을 떨어뜨리고 1분간 방치한다.

참고자료

· John Garbutt, 『Essentials of Food Microbiology』, Arnold, 1977