[식품미생물실험]그람염색

소개

염료(dye)를 사용하여 세균의 형태, 배열, 크기 등을 명확히 관찰하며 염색성의 차이로 세균 분류가 가능하다.

목차

1. 실험목적 (Purpose)

2. 실험재료 및 기구 (Materials and Tools)

3. 실험 방법(Methods)

4. 실험결과 (Result)

5. 고찰 (Discussion)
▣ 그램 염색법(Gram染色法)
▣ B.subtilis
▣ E.coli

6. 참고문헌

본문내용

5. 고찰 (Discussion)
▣ 그램 염색법(Gram染色法)
세균 염색법의 하나. 덴마크의 내과 의사․세균 학자인 그램(Hans Christian J. Gram)에 의하여 창안되었다. 이 염색법으로 세균을 그램 양성균과 그램 음성균으로 나눌 수 있으며, 세균의 분류에 꼭 필요한 염색법이다. 세균의 세포 표면에 있는 RNA와 마그네슘염이 그램 색소와 결합하여 된 복합 색소는 알코올에 불용성으로 탈색이 되기 어렵다. 따라서, 그램 양성균은 이러한 물질이 있는 균이며 그램 음성균은 이러한 물질이 없어 탈색되므로 양자가 구별된다. 즉, 각 세균의 세포벽을 이루고 있는 성분과 구조에 따라 다르게 나타난다.

▶ gram (+) 균 →세포벽의 두께가 20～80㎚ 정도로 두꺼운 peptidoglycan layer와 풍부한 teicoicacid로 이루어져 있어서 organic decolorizer(탈색제)로 탈색 시 쉽게 탈색되지 않으며 따라서 염색액 crystal violet이 계속 세균 내에 남아있어 보라색으로 염색된다. ☞ 대부분의 구균과 유포자 간균이
▶ gram (-) 균 → peptodoglycan layer가 단일층으로 되어 있으며 세포벽이 지방성분이 풍부한 lipopolysaccharide(LPS)로 이루어져 있어 organic decolorizer(탈색제)에 의해 crystal violet이 쉽게 탈색되며 따라서 대조 염색액인 safranin O로 염색되어 붉은색을 나타낸다. ☞ 대부분의 간균

[lugol액] 염색이 더 잘되도록 하기위해 매염제의 일종 .slide glass를 담구는데 이 용액은 균체 성분을 산화 및 응고 시켜 cell 과 dye사이의 친화력을 증가시키고, 색소의 분산도를 감소시켜 흡착능을 크게 하는 물질이라 할 수 있다.
[washing] 가볍게 수돗물로 하며 코넷핀셋으로 집어 균을 도말한 곳과 아닌 곳을 구별하여 수세를 하며 너무 센물로 하여 균이 씻겨 내리지 않게 한다.

참고자료

· [식품미생물학] 노완섭, 진로출판, 1996, p503-508
· [식품미생물학] 노완섭외 5인, 지구문화, 1989, p85-88
· [최신식품미생물학] 하덕기, 신광출판사, 2002년도 발행 P.503~506
· [미생물학 실험서] 한국미생물학회, 을유문화, 1998, p11-14