cancer cell culture

소개

cancer cell culture
HCT-15,Huh-7,LOVO를 직접 culture해 보고, morphology를 관찰하여 본다.

목차

없음

본문내용

1. Date 2. Team 3. Name 4. Topic Cancer cell culture 5. Purpose Cancer cell의 freezing과 thawing법을 배운다.
다양한 Cancer cell의 morphology 및 특성을 이해한다. 6. Materials Freezing ; Trypsin EDTA, PBS, freezing medium, cryobial tube, 알콜램프,
pipette.
Thawing ; Medium, culture dish, 50ml tube, 7. Method ※ Freezing
1 실험 전에 medium, Trypsin EDTA, PBS를 37℃water bath에 넣어둔다.
2 Cryobial에 연필을 이용해서 naming 한다.
3 배양한 cell의 medium을 제거하고 PBS 5ml로 2회 washing 해준다.
4 PBS를 제거하고 Trypsin EDTA 1ml 처리하여 cell을 떼어낸다.
5 Suspension된 cell을 50ml tube에 옮긴후 centrifugation.(1400rpm, 5min,
RT)
6 Pellet만 남기고 상층액을 제거한다.
7 Freezing medium 1ml을 넣고 pellet을 잘 풀어준다.
8 Cryovial에 cell suspension을 넣고 동결.
※ Thawing
1 동결된 cell을 37℃ water bath에 신속히 녹인다.
2 cell을 50ml tube에 medium 9ml과 넣어준 후 centrifugation.(1400rpm, 5min, RT)
3 Pellet만 남기고 상층액 제거한다.
4 Medium 3ml 넣고 pellet을 풀어준다.
5 Culture dish에 seeding 한다. 8. Results Cell thawing 및 freezing
5명의 조원이 2개의 culture dish에 Huh-7을 thawing하였으며, 미리 키워진 2개의 Huh-7 dish를 가지고 동결하여 보존하는 freezing을 시행하였다.
- Thawing한 2개의 culture dish에는

참고자료

· http://www.path.cam.ac.uk/~pawefish/ColonCellLineDescriptions/HCT15.html
· http://www.genehunters.co.kr/Training/07_1.htm