유전자 조작실험 1. DNA 제한효소 처리

소개

유전공학에서 사용되는 기초실험인 재조합 DNA분자의 제조방법을 이해한다.
그 첫 단계로 재조합 DNA분자를 제조하기 위해 DNA의 농도를 측정하고 제
한 효소를 이용한다.
전기영동 결과를 통해서 dna의 크기 및 성질을 알 수 있다.

목차

1.실험제목
2.실험목적
3.실험원리
①제한효소
②제한효소의 종류
③유전자 클로닝
④ dye의 역할
⑤BSA
⑥blunt end와 sticky end
4.실험기구
5.실험방법
6.실험결과
7.고찰
8.참고문헌

본문내용

6.. 실험 결과
위의 Ladder의 순서는 10kb, 8kb, 6kb, 5kb, 4kb, 3kb, 2.5kb, 2kb, 1.5kb, 1kb, 750b, 500b, 250b 의 크기 순입니다.
먼저 그림의 결과를 보면 맨 끝에 있는 것은 marker이고 왼쪽부터 순서대로 나열하면 처음것은 plasmid이고 두 번째 것은 pcr이고, 세 번째 것은 pcr-enzyme이며, 마지막 것은 pla
Smid-enzyme이다. 우리는 실험 중에 정신 없이 하는 바람에 3번과 4번이 바뀌어서 세 번째것이 pcr-enzyme이고 마지막 것이 plasmid-enzyme이 되었다. 원래 4번이 3번보다 양이 더 많게 나와야 하는데 우리 조는 3번이 4번보다 양이 많이 나와서 전기영동 결과를 보면 알 수 있다고 했었다. 그 결과를 보니 실험 중 우리가 3번과 4번을 착각했던 것 같다.
크기를 보면 plasmid는 4kb 임을 알 수 있고, plasmid-enzyme은 5kb임을 알 수 있다.
그리고 pcr과 pcr-enzyme은 둘 다 1kb임을 알 수 있었다. 전기영동은 크기가 작을수록 더 멀리 이동 하는 성질을 알 수 있으므로, 결과를 보면 pcr은 plasmid보다 크기가 더 작음을 알 수 있다. Plasmid는 Plasmid-enzyme을 했는데도 크기가 더 커졌다. 원래 plasmid가 circular의 모양인데 enzyme으로 자르면 모양이 supercoiled나 linear로 되기 때문에 크기가 plasmid보다 더 작아서 아래쪽에 위치해야 한다. 근데 결과를 보면 Plasmid가 더 아래로 나와있다. 정확한 이유는 모르지만 두 가지 경우가 예상된다. 하나는 우리가 실험을 잘 못했기 때문에 enzyme을 했음에도 크기가 크게 나온 것이고, 다른 하나는 plasmid 성질 중에 뭉치려는 성질이 있어 enzyme을 했어도 서로 뭉쳐서 크기가 커진 것 일지도 모른다고 생각했다. Pcr-enzyme은 pcr과 크게 차이가 없으므로 미세한 부분만 enzyme돼서 영향을 미치지 못한 듯 하다.

참고자료

· 없음