pcr, PCR

소개

PCR에대한 전반적내용입니다

목차

■ PCR(Polymerase Chain Reaction)
■ PCR의 소개
■ PCR의 수행
■ PCR의 과정
■ PCR시 고려사항

본문내용

유전자를 분석하고 연구하는데 있어서 가장 큰 문제점은 복잡한 전체 genome중에 연구 하고자 하는 유전자가 희귀하다는 것인데, PCR은 특정 DNA Sequence의 copy수를 기하급수적으로 증폭시킬 수 있다는 점이다. 이러한 PCR을 소개하기에 앞서서 간단히 분자 생물학적인 사항을 review해 봅시다.
먼저 DNA의 구성을 살펴보면 DNA는 다음과 같이 phosphate group(인산기) - sugar(당) - base(염기)의 세 가지 요소로 구성되는 nucleotide라는 모듈이 쌍으로 연결된 것으로 이것이 이중나선 모양으로 위아래로 연결된 모양을 하고 있다. 염기의 종류는 A (adenine), G (guanine)으로 구성된 purine group과 T (thymine), C(cytosine), U(uracil)로 구성된 pyrimidine group으로 나뉜다. DNA에서는 T로, RNA에서는 U로 존재한다. 또한 당의 2번 위치에 있는 OH group을 갖고 있진 않은 것이 DNA이며, 갖고 있으면 RNA가 되는데 이것으로 인하여 DNA와 RNA사이에는 많은 성질의 차이가 발생한다.
phosphate group이 있는 쪽이 5`(prime) 방향, sugar가 있는 쪽이 3` 방향인데, 쌍으로 연결되는 염기는 그림과 같이 서로 반대방향(anti-parallel)으로 위치하는 것 이 특징이다. 즉, DNA 사슬은 서로 5` 과 3` 방향이 반대이다. 이때 3` 방향에 노출되어 있는 3` OH기를 연결 고리로 하여 DNA polymerase가 다음 nucleotide를 붙여주기 때문에 DNA 의 합성은 반드시 5` 에서 3` 방향으로만 진행된다. 또한 DNA polymerase는 3` OH를 제공할 수 있는 primer가 반드시 존재해야 한다.
PCR은 이러한 DNA polymerase의 성질을 이용한다. DNA polymerase가 단일가닥 DNA를 주형으로 해서 상보적인 DNA를 합성한다. 이러한 단일가닥 DNA는 두 가닥 DNA를 끓임 (denature)으로써 간단하게 얻을 수 있다.

참고자료

· 없음