Gene Cloning

소개

Gene Cloning 실험레포트 입니다. Gene Cloning
전반적인것 이론과 실험결과가 들어 있습니다.

목차

1.실험목적
2,실험이론
3,실험방법
4.실험결과 및 토론

본문내용

1. 실험목적
과거에는 환경에 존재하는 미생물에 대해 이해하기 위해서는 기본적으로 배양을 통하여 순수하게 미생물 하나의 종을 획득하여 이에 대해 연구해왔습니다. 하지만, 최근에 환경 시료로부터 배양을 통하지 않고 직접 군집 조사를 통해 우리가 알고 배양했던 미생물이 극히 일부에 지나지 않은 것을 확인하였습니다. 심지어 일부 환경에서는 99 % 이상의 미생물을 배양하지 못하고 있는 상황입니다. 현재 이를 통해 알려진 많은 미생물이 지니는 정보를 얻기 위해 여러 실험실에서 다양한 노력이 전개되고 있습니다. 그 중 하나의 접근 방법으로 metagenomics가 있습니다. 환경에 존재하는 전체 미생물의 genomes를 metagenome이라 정의하며, 이를 연구하는 학문을 metagenomics라 말합니다. metagenome을 연구하는 방법에는 PCR 및 특정 방법을 이용하여 찾고자 하는 specific 유전자만을 증폭하는 방법과, genomic 라이브러리를 만들어 환경의 정보를 다루기 쉬운 숙주에 넣은 후 이 라이브러리 안에서 찾는 방법이 있습니다. 한 번 구축된 라이브러리는 지속적으로 사용할 수 있으며, 또한 전자보다는 후자의 경우 더 새로운 유전자 및 정보를 획득할 확률이 더 높기 때문에 현재 많은 연구실에서 여러 환경으로부터의 metagenomic 라이브러리를 구축하고 있다. 이번 학기 실험에서 토양에서 Sample을 채취하여 샘플에서 Metagenome를 채취한다. 전기영동을 하여 Metagenome가 있는 것을 확인하고 또한 이 샘플을 이용하여 원하는 DNA를 PCR 증폭시킨다. 정제한 DNA를 DIgestion 한 후 그리고 절제된 DNA을 박테리아로 Transformation 과정을 거치고 이것을 다시 Plasmid prep하여 DNA를 분리한다. 이를 통해 원하는 미생물을 획득하는 방법을 익혀보는데 목적을 둔다.

참고자료

· Gene cloning and DNA analysis (TA Brown, Blackwell science)
· bio-rad http://www.bio-rad.com/
· 연세대학교 생화학 분자생물학 교실 http://biochemistry.yonsei.ac.kr
· KSBMB 한국생화학분자생물학회 http://www.biochem.or.kr