Isolation of LAB from Kimchi

소개

김치완숙시 LAB의 수는 108~9/ml 가 있다. 이 실험은 젓산균의 single colony1) 를 얻기 위해 dilution을 하는 과정이다. 클린벤치에서 Streaking 을 통해 MRS agar에서 배양하는 과정이다.

목차

1. Experimetal title
2. Principle
3. Materials & method
4. Result
5. Discussion
6. reference

본문내용

1. Experimetal title : Isolation of LAB from Kimchi
2. Principle
김치완숙시 LAB의 수는 108~9/ml 가 있다. 이 실험은 젓산균의 single colony1) 를 얻기 위해 dilution을 하는 과정이다. 클린벤치에서 Streaking 을 통해 MRS agar에서 배양하는 과정이다.
1)분류학상 식물에 속하기 때문에 colony unit을 사용한다.
3. Materials & method
재료 : 김치, 루프(텅스텐재질), MRS agar(젓산균 배양에사용), 에탄올(손소독), 알콜램프, Petri dish, Clean bench(헤파필터 존재로 미생물을 걸러준다. 자외선 램프로 미생물소독한다.) ,플라스크(김치를 담기 위한)
MRS agar
**재료 및 성분 (1 L)**
Pancreatic digest of gelatin 10.0 g
Beef extract 8.0 g
Dextrose 20.0 g
Dipotassium phosphate 2.0 g
Polysorbate 80 1.0 g
Sodium acetate 5.0 g
Ammonium citrate 2.0 g
Magnesium sulfate 0.2 g
Manganese sulfate 0.05 g
**제조방법**
52.3 g의 배지가루를 1 L의 멸균수에 넣고 완전히 섞은 후 녹인다.
121℃에서 15분간 고압증기멸균한다.
제조 배지의 pH는 25℃에서 6.2±0.2로 맞춘다.

single colony를 얻기 위해서는 Dilution 의 작업을 거쳐야 한다. 한번 희석시마다 x101만큼 희석된다.
※ 단점 : 시간이 많이 걸린다.
<도말평판법>
① 손 소독 : 실험에서 균의 오염을 방지하기 위해 에탄올로 손 소독한다.
② 멸 균 : 루프를 불꽃에 달구어 멸균한다.
③ petri dish에 식히기 : 멸균된 루프를 페트리디쉬에 찍어서 식힌다.
④ LAB 채취 : 루프를 김치에 찍어 LAB를 채취한다.
⑤ 접종 : 접종시에는 루프를 눞혀서 손목의 스냅만을 이용해서 접종한다.
⑥ 멸균 : 접종후 루프를 다시한번 멸균한다.
⑦ 총 3번의 도말을 실시한다.
⑧ 도말한 후 배양기에 넣어 배양한다.
이때 주의점은 agar쪽을 위쪽 방향으로 해야한다.
응축수가 떨어질수도 있다.

참고자료

· 없음