건강기능식품의 인증을 받기위한 동물실험법에 대하여

소개

체중 1.5 ㎏ 이상의 토끼를 사용한다. 시험에 사용한 토끼를 다시 사용할 경우에는 3일 이상 경과되어야 한다. 다만, 발열성물질시험 양성으로 판정된 검체에 사용한 동물 및 시험하고자 하는 검체와 공통된 항원물질을 함유한 검체를 이전에 주사받은 동물을 사용하여서는 안 된다.
또한 4에서 측정한 대조 체온이 39.9℃ 이상의 동물은 사용하여서는 안 된다.

목차

1. 발열성물질시험법(파이로젠시험법)

2. 항 파상풍 사람 면역글로불린Human Tetanus Immunoglobulin

3. 헤모필루스 인플루엔자 비형·디프테리아 씨알엠(CRM197)단백
접합 백신(알루미늄 흡착)(Haemophilus influenzae type b-Diphtheria CRM197
Conjugated Vaccine, adjuvanted aluminum)

4. 시험방법의 검증(Validation)

5. 참고문헌

본문내용

효소면역측정법(ELISA)
독소 중화능력 측정법과 상관관계가 확인된 효소면역측정법을 이용하여 시험한다. 파상풍독소 항원(이하 항원)이 고정된 웰에 0.01 ～ 7 IU/mL 범위의 항파상풍 사람면역글로불린표준액(이하 표준액) 및 표준액 농도구간에 포함되도록 희석된 검액을 각각 100 μL씩 넣고 30분간 상온에서 반응시킨 후 미반응한 표준액 및 검액을 제거할 수 있는 세척액으로 웰을 3회 세척한다. 다시 발색 효소가 붙어있는 항 사람면역글로불린을 100 μL씩 넣고 30분간 상온에서 반응 시킨 후 세척액으로 웰을 3회 세척한다. 발색 기질을 100 μL씩 넣고 30분간 상온의 어두운 곳에서 반응시킨 후 반응 중지액을 100 μL씩 넣어 반응을 중지시킨다. 30분 이내에 450nm 파장에서 흡광도를 측정하여 표준액 대비 검액의 파상풍 항독소의 함량을 계산한다.
2.2.3 분획
항체를 변질시키지 않도록 적당한 처리법에 의하여 원혈장을 분획하여 면역글로불린-지 분획을 모아서 이를 원획분으로 한다.
2.3 원획분에 대한 시험
0.3 mol/L 아미노초산액으로 용해하여 원획분의 농도가 최종원액에 함유되는 농도와 동등하게 되도록 만든 것을 검액으로 한다.

참고자료

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