단백질 정량 BCA 정량법

소개

생화학 실습중 BCA정량에 대한 내용입니다.
원리및 이론,방법 다 나옵니다. 디스커션 한페이지 넘습니다.

목차

1. Subject
2. Intoroduction
3. Material and Method
4. Result
5. Discussion

본문내용

ㄱ. 정량법

일반적으로 정성분석에 의해 물질을 구성하고 있는 성분을 알고 난 다음 정량분석이 행해진다. 분석방법에 의해 분류하면 물리화학적인 기계 ·기구를 사용해서 수행하는 기기분석과 화학반응을 이용해서 성분의 양을 결정하는 화학분석으로 크게 나누어진다. 기기분석은 조작이 간단해서 정밀도가 높고, 개인차가 적다.
이것에는 폴라로그래피 ·광흡수분석법 ·질량분석법 ·발광분광분석법 ·기체크로마토그래피와 같은 방법이 사용되고 있다. 화학분석은 조작법에 의해 분류하면 중량분석과 용량분석이 있다. 그리고 시료(試料)의 종류에 따라 분류하면 기체분석 ·미량분석이 있고, 그 방법에 의해 분류하면 비색분석, 비탁분석 및 전기분해분석 등이 있다.

ㄴ. BCA 정량법 이란?
BCA법은 Lowry법을 계량한 것으로 Folin 시약의 반응대신 BCA가 구리이온과 복합체를 형성해 자색으로 발색되는 반응을 이용한 것이다. 이 반응은 2step 으로 일어난다.

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-BCA정량법의 장점
1. 일반적인 버퍼물질에 간섭을 덜 받는다
2. 높은 온도에서 한다면 아주 민감하고 빠른 반응을 할수 있다
3. 계면활성제와 같이 사용할 수 있다.
4. 반응시약이 안정적이다.
5. 서로다른 단백질 사이에 반응의 차이가 거의 없다

-BCA정량법의 단점
1. 실온에서 반응이 완전히 수행되지 않는다. 이것은 다량의 단백질을 정량 할 때 문제가 될 수 있다.
2. 농축된 단백질 샘플은 희석이 종종 필요하다.

-BCA정량법의 측정범위
측정은 standard assay의 경우 10~1200 g/ml, microassay는 0.5~10 g/ml의 범위에서 가능하다

ㄷ. Spectrophotometer의 원리

참고자료

· 없음