[생화학] BCA 정량법 (단백질 정량법)

소개글

일목요연하게 보기 쉽게 정리 해놨습니다.
정말 공들여서 쓴거구여..
특히 토론부분은 다른 레포트와 달리 많이 써놨습니다.
많은 도움 되실거라고 확신합니다.

목차

1.제목
2.이론
3.재료 및 방법
4.결과
5.토론
6.REFERENCE

본문내용

이런 원리에 의해서 구조가 변하면 그에 따라 흡광도도 변하게 된다. 그것을 spectrophotometer로 읽어 측정하여 단백질을 정량하는데, 먼저 standard를 각각 측정하여 그것들을 그래프로 그린다. 그런 다음 그것의 일차방정식의
식을 얻는다. Y=A*X+B 라는 식을 얻으면 unkown의 흡광도를 측정하여 그래프의 어느 농도에 해당하는지 판단한다.
★주의할점★
Bradford 방법은 다른 단백질 정량법에 비해 민감도가 우수하나 단백질간의 차이가 많기 때문에 정제된 단백질의 절대량을 구하기는 어려운 방법이다.그러나 단순히 전기영동을 위한 목적이라면 아주 간편하고 우수한 방법이다.
Bradford reagent를 10배 희석하여 100ml 용액을 사용하면 100ng까지 정량이 가능하다.
High pure reagent를 사용하지 않는한 home made reagent는 시약회사로부터 구입한 reagent보다 다소 성능이 떨어지나 큰 지장은 없다.

* Discussion
단백질 농도 결정에 대한 실험이였다.
농도를 알 수 없는 단백질을 빛을 이용하여 농도를 결정하는 방법인데, 농도를 아는 단백질을 이용하여 standard curve를 만들고 식을 구해서 할 수 있다. 우선 실험에 대한 결과는 만족할만 하다. 그건 결과로 판단이 가능한데 R-Square 값이 1에 근접하면 할 수록 실험이 잘된것이라 교수님이 말씀해주셨기 때문이다.

참고 자료

http://yasuar.hihome.com/lifescience/proteinassay.htm
http://mbl.hanyang.ac.kr/bbs/data/lecdata/2002550631.ppt