재조합 대장균의 선별과 배양 및 생성된 단백질의 분리 및 분석 - 결과보고서

소개

생명 공학 관련 실험 수강하시는 분들은 잘 활용하세요.
실험 보고서 점수는 A+ 이니, 아마 후회는 안하실겁니다. !

목차

실험결과
토의 및 고찰
참고문헌

본문내용

이번 실험은 생·공실험의 마지막이었던, 유전자 조작실험 2, 재조합 대장균의 선별과 배양 및 생성된 단백질의 분리 및 분석 에 관한 실험 이었다.
이 이번실험은 우리가 지금까지 실험한 유전자 재조합 실험에서 얻어낸 colony 중에서 어떤 colony가 우리가 원하는 것인지 알아보는 실험이었다.
우리가 MCS의 lacZ`유전자 부분에 DPS gene이 삽입된 Transformants를 선별하려면 어떤 colony를 얻어야 하냐는 질문의 답은 White colony를 얻어야 한다.
그 원리와 이유를 알려면 MCS와 lacz` 유전자에 대해서 알아야 할 것이다.
Multiple cloning site(MCS)와 LacZ`는 제한효소로 잘릴 수 있는 부위를 한꺼번에 모아놓은 부분이다. 제한효소로 잘라서 다른 DNA를 삽입시킬 때 위에서 설명한 중요한 부분들이 같이 잘리면 곤란하다. 그래서 다른 부분은 절대 잘리지 않고 이 부분에만 잘릴 수 있도록 열 몇가지 제한효소 절단부위를 인위적으로 조작해 놓은 것이다. 이 MCS 부위는 길어야 100 - 150 bp 정도이며 앞 뒤 부분에 SP6, T3, T7 promoter 등이 붙어있게 된다. 이런 부위는 RNA를 시험관에서 만들거나 단백질 발현을 시킬 때, 그리고 DNA sequencing 같은 실험을 할 때 쓰이는 부위이다. LacZ`는 꼭 필요한 것은 아니지만 대개는 있으며 반드시 MCS(multiple cloning site)를 포함하고 있다.
Transformation한 후의 결과는 다음 세 가지 중의 하나로 생각할 수 있다.

참고자료

· 분자생물학교재/George M. Malacinski 저
· 생화학실험책/한국생화학회 저/p43~p51
· http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_molecular/gene_cloning_22.php
· 92년도 추계학술발표대회 논문초록, 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 )
· ttp://www.smailnara.com/~dnaatp/ethics/et20.hwp
· http://genetics.hannam.ac.kr/note/2001seminar/seminar-1.hwp
· 생명공학실험 및 실험 이영춘 지음 동아대학교출판부 펴냄