[식품영양]비색법에 대한 환원당의 정량

소개

비색법에 대한 환원당의 정량에 대한 실험결과,토의입니다.

목차

1.Subject : 비색법에 대한 환원당의 정량
2.Date
3.Principle
4. Reagents and Instruments
5.Method
6.Results
7.Discussion
8.Reference

본문내용

3.Principle
환원당은 알칼리성에서 3,5-dinitrosalicylic acid 의 NO2기를 NH2로 환원시켜 적갈색을 띠게 한다. 이 색소를 이용하여 비색 정량하는 것으로 조작이 간단하고 신속히 할 수 있기 때문에 많은 시료를 일시에 장량 할 수 있다.

4. Reagents and Instruments
1) Reagents
① A용액 : 4.5% NaOH용액 300ml에 1% 3.5-dinitrosalicylic acid 용액
880ml를 혼합하고 이 혼합액에 Rochelle 염 255g을 용해한다.
② B용액 : 10g의 결정 phenol을 10% NaOH용액 22ml에 용해하고, 물을 가하여 100ml로 하고 이 용액 69ml에 NaHSO3 6.9g을 녹인다.
③ A용액과 B용액을 혼합하고 갈색병에 보존한다. 이 시약은 1년간 안정하다.
2) Instruments
50ml vol-flask, 5․10ml pipet, water bath(100℃), spectrophotometer
3) sample : 간장, 포도쥬스, 꿀(sample 희석액 1ml 중에 당 0.2-2mg 함유)

5.Method
1) sample
▶ 50ml vol-flask에 sample 1ml와 시약 3ml를 가하여 끓는water bath에서 5분간 끓 이고, 냉각한 후 증류수로 25ml를 채운다.
▶ 550nm에서 흡광도를 측정하고 미리 구해 둔 검량곡선에서 당의 함량을 구한다.
※발색 후 한 시간 이내에 흡광도를 측정하는 것이 좋다.
2) blank
▶ sample대신에 distilled water 2ml로 위와 같은 방법으로 처리한다.
3) 검량곡선(standard curve)
▶ 특급 무수 포도당을 알코올로 재결정하여 건조하고, 0.2-2mg/ml의 용액을 만들어 위와 같은 방법으로 흡광도를 측정하여 만든다.

참고자료

· 1) 분석화학 . 동화기술 . 최재성