간 균질액 제조 단백질 정량-영양화학 및 실험

목차

1. 실험목적 및 원리
1) 실험목적
2) 원리

2. 시약 및 준비물

3. 실험방법

4. 실험결과

5. 고찰

6. 요약

본문내용

1) 실험목적
간 균질액을 제조하고 단백질을 정량해 본다. 용액의 흡광도를 측정하고 표준곡선을 그려본다.

2) 원리
[실험3-1]
① 간과 간 기능 검사들에 대한 조사
간은 오른쪽 횡격막 아래의 복부에 위치해 있으며, 생체에서 단백질 합성, 포도당 및 기타 탄수화물 대사, 핵산 대사, 지질 대사, 약물 대사 등을 담당하는 중요 장기중 하나이다. 간 가능 검사란 간 기능 상태를 평가하기 위한 여러 생화학적 검사들의 조합이다. 간 기능 검사들의 주요 검사로는 AST, ALT, ALP, GGT, 빌리루빈(Bilirubin) 등이 있고, 이외에도 총 단백질, 알부민, 젖산탈수소효소(LDH), 암모니아 등의 항목을 더하여 검사하는 경우도 많다.
검사법의 기본적인 원리는 측정하고자 하는 물질과 반응하는 효소나 색소, 또는 측정하고자 하는 효소의 기질에 해당되는 물질을 넣고 효소 반응이나 발색 반응을 시킨 후 흡광도를 측정하는 것이다.

[실험3-2]
② 포스포몰리브덴산을 함유한 시약의 특성:
포스포몰리브덴산은 물에 가용성인 황색결정이며, 정량조작 중에 때때로 이용한다. Lowry법에서 생기는 청색은 포스포몰리브덴산을 함유하는 시약(페놀 시약, Folin 시약, Lowry 시약, Folin-Ciocalteau 시약)에 의해 단백질에 있는 방향족 아미노산인 티로신과 트립토판 잔기들이 반응하여 구리(Cu1+)를 환원 시키고 청색을 나타내게 되는 것이다.

③ 단백질 정량법:
1) UV 분석법: 시료 내 단백질의 농도를 분광 광도계를 이용하여 280nm 또는 200nm에서 측정할 수 있다. 다른 방법들과 달리 특별한 시약의 첨가나, 반응을 위한 배양 시간이 필요하지 않으며 표준 단백질을 이용한 표준곡선이 필요하지 않다는 장점이 있다. 이 방법의 단점은 측정 단백질에 반방향족성 곁사슬을 가진 아미노산이 없는 경우 280nm에서 측정 할 수 없으며, 시료 내..

<중 략>

참고 자료

변기원, 원혜숙, 송태희. 「이해하기 쉬운 생화학」. 파워북(2015)
부성희, 조만호, 이상원, 김기영. 「생화학 실험」. 청문각(2015)
[네이버 지식백과] 간 기능 검사 [liver function test] (서울대학교병원 의학정보, 서울대학교병원)
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=927664&mobile&cid=51007&categoryId=51007
[네이버 지식백과] 인몰리브덴산(인몰리브데넘) [phosphomolybdic acid, 燐~酸] (생명과학대사전, 초판 2008., 개정판 2014., 도서출판 여초)
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=420834&cid=60261&categoryId=60261