[생명공학]재조합 단백질 분리

소개

이 리포트는 재조합된 플라스미드 벡터를 이용하여 우리가 원하는 단백질을 분리 정제하는 과정을 담은 리포트 입니다. 단백질을 분리하는 기술부터 정제까지 그리고 실험과정에서의 일련의 과정에 대한 설명을 담고 있습니다. 대부분의 재조합 단백질 발현에 관한 리포트라고 할 수 있습니다.

목차

재조합 단백질의 발현과 분리 정제 및 SDS PAGE를 이용한 확인
실험목적
실험이론
실험방법
α-synuclein의 열안정성을 이용한 정제

본문내용

실험목적
단백질 expression vector인 pQE30(QIAGEN)에 cloning된 단백질을 IPTG를 이용하여 induction을 시키고 SDS PAGE를 통하여 이를 확인한다.

실험이론
1. 유전자 재조합과 벡터
- 유전자 재조합 기술은 필요로 하는 어떤 생물의 특정한 유전자를 분리하여 그것을 매우 빠르게 증식하는 대장균에 넣어서 그 유전자에 의하여 만들어 지는 물질을 짧은 시간에 다량으로 얻는 기술이다. 유전자 재조합 기술로 대장균의 유전자가 복제될 때 함께 복제되어 짧은 시간에 얻고자 하는 단백질을 다량으로 얻을 수 있다.
플라스미드는 여러 세균에 존재하는 작은 이중가닥 DNA로 일반적으로 고리형 이며 숙주 염색체와는 독립적으로 존재한다. 플라스미드는 세균에서 매우 중요한 역할을 하는데 새로운 유전자 조합을 만들거나 유전자를 옮기는 과정과 유전자를 클로닝 하는 데에 매우 유용하게 이용된다. DNA 조각의 점착성 말단이 서로 염기쌍을 이루도록 한 다음 DNA 연결효소를 이용해 단편을 공유결합 시킨 벡터는 유전자 클로닝에서 외래 DNA 조각을 전달하는 플라스미드 벡터로서 외래 DNA와 결합할 수 있게 되었다. 우리는 실험에서 단백질 expression vector인 pQE30에 cloning된 단백질을 얻고자 한다.

참고자료

· 식품효소공학