[생화학]생화학 효소의 분리 정제

소개

간호학과 생화학시간에 제출한 레포트입니다.
약학과에서 보는 생화학 원서를 번역하고 그림자료 삽입해서
정리한 것입니다.
그림자료 컬러풀하고 보기 좋게 되어있어요.

목차

1> 효소의 분리ㆍ정제
(1)효소를 분리/정제 해야하는 이유
(2)효소의 정제할 때 유의할점
(3) 효소의 분자량 또는 크기에 따른 분리(size or mass)
(4)효소의 정제법

2> 효소의 측정
(1)반응속도 이론
(2)효소작용의 저해

본문내용

 효소를 분리/정제 해야하는 이유는 다음과 같다.
한 개체(또는 미생물)내에는 많은 종류의 효소가 존재한다. 이러한 여러 효소 중에서 목적하는 반응에 관여하는 효소만을 얻기 위해서 분리를 해내야 한다.
<공업적 측면>
E1 E2
A ----> B ----> C B물질은 C나 D로 변하는 기질로 사용됨으로써 순수한 E3 B를 얻기 힘들다. 따라서 효소(E2, E3)를 제거해서 D B가 계속되어지는 반응이 일어나지 않도록 분리 정제된 효소를 사용하여야 한다.
<의학적 측면>
건강 진단시 혈액검사(당뇨, 간기능, 황달, 콜레스테롤, 젖산에의한 피로도 등등) 등에 효소를 선택적으로 분리해서 사용함으로써 올바른 진단을 내리는 데에 이용된다.

공업적으로 이용하는 과정에서 매우 정제도가 높지 않아도 된다면 초기의 추출물에서 전체활성도(total activity)와 비교하여 회수된 활성도(recovered activity)의 비율을 퍼센트에 기초하여 표현하는 yield를 최대로 목적하는 경우도 있는가 하면 경우에 따라서(건강진단, Kinetics 에 대한 연구) 정제도가 높은 효소를 분리하는 것이 목적이 될 수 있다. 정제도나 yield라는 객관적인 기준을 비교하는데에 있어 활성도라는 용어의 정의가 필요하다.
specific activity = unit of enzyme / mg of protein

<Activity> - 효소의 활성 또는 `역가`는 기질이 효소에 의해서 product를 생성할 때, 이것의 효율을 판단할 만한 `객관적인 기준`을 말한다.
: -S(감소된 기질), + P(생성된 생성물)
1 unit = －(Ｓ)μmol/min = +(P)μmol/min
분당 몇 μmol의 기질이 소모되는가? 또는 분당 몇 μmol의 생성물이 만들어지는가?
<Purification fold(정제도)>
최초의 specific activity를 기초로 어느 정도의 정제되었는가를 알 수 있다.

참고자료

· 생화학 원서 (이름이 잘.. 약대생한테 구했던..)