[화공생물공학단위조작실험1 A+ 결과레포트] Enzyme Kinetic assay Horseradish Peroxidease

소개

"[화공생물공학단위조작실험1 A+ 결과레포트] Enzyme Kinetic assay Horseradish Peroxidease"에 대한 내용입니다.

목차

1. 시약 세부
2. 결과
3. 고찰
4. 참고문헌

본문내용

1. 결과 해석
본 실험은 효소반응을 통해 분해된 과산화수소와 반응하는 ABTS 농도별 흡광도를 측정하여 갓을 도출해내는 실험이었다. 15μM, 30μM, 60μM, 90μM, 120μM들의 시간에 따른 흡광도 변화 값과 radical 이온의 농도 변화의 R 2값은 각각 0.9784, 0.954, 0.9835, 0.9872, 0.99이었다.
이 실험에서 R 2값이 제일 낮은 30μM 값을 다른 값과 비교해보면 다른 농도에 비해 부정확한 것을 볼 수 있다. 따라서 그 값을 제외한 Michaelis-Menten equation과 Lineweaver-Burk Plot의 그래프를 그리면 다음과 같다.

위 그래프를 보면 Lineweaver-Burk Plot의 R 2값이 1에 더 가까워졌다는 것을 알 수 있다. 실험의 정확도를 높이기 위해서는 농도의 간격을 촘촘히 진행하고, 여러 번 반복하여 결과를 도출해 낸다면 더 정확한 결과 값을 얻을 수 있을 것이다. 또한 30μM의 농도가 흡광도가 증가하는 추세를 보였지만 상대적으로 더 높은 흡광도를 나태낸 이유는 과산화수소의 투하시기가 문제라고 생각한다. 동일한 시점에 넣고 측정기를 돌렸다고 판단하였지만, 사실 사람이 하는 작업이기 때문에 동일한 시점에 넣는 것은 어렵다. 따라서 처음 측정 값을 0초로 잡고 하였지만 각각의 반응 시간이 달랐고, 기기가 작동하는 시간이 있기 때문에 한 사이클당 1초의 차이가 있었다. 따라서 더 정확한 결과를 얻기 위해선 동시에 투여 가능한 방안을 모색하거나, 각각의 시약을 따로 돌려 시간을 보정하는 방법을 사용하면 실험의 신뢰도가 더 높아질 것으로 판단된다.

참고자료

· 동국대학교화공생물공학과, 화공생물공학기초실험, 동국대학교화공생물공학과, 2023, pp.46-50
· Bourbonnais, Robert; Leech, Dónal; Paice, Michael G. (1998-03-02), "Electrochemical analysis of the interactions of laccase mediators with lignin model compounds", Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - General Subjects, 1379 (3): 381–390
· 생화학분자생물학회, 생화학백과
· Ahern, Rajagopal, Tan, “Biochemistry free for all”, 2018, pp. 336-360
· Zumdahl, “줌달의 일반화학”, 사이플러스, 2013, pp. 606-607
· Cleland, W.W. (1963). “The Kinetics of Enzyme-catalyzed Reactions with two or more Substrates or Products 2. {I}nhibition: Nomenclature and Theory”. 《Biochim. Biophys. Acta》 67: 173–87.
· Price, NC. (1979). “What is meant by 'competitive inhibition'?”. 《Trends in Biochemical Sciences》 4 (11): pN272. doi:10.1016/0968-0004(79)90205-6.
· Dick, Ronald M. (2011). 〈Chapter 2. Pharmacodynamics: The Study of Drug Action〉.
· Ouellette, Richard G.; Joyce, Joseph A. 《Pharmacology for Nurse Anesthesiology》. Jones & Bartlett Learning. ISBN 978-0-7637-8607-6.
· R Poulin; Lu, L; Ackermann, B; Bey, P; Pegg, AE (1992년 1월 5일). “Mechanism of the irreversible inactivation of mouse ornithine decarboxylase by alpha-difluoromethylornithine.
· Characterization of sequences at the inhibitor and coenzyme binding sites”. 《Journal of Biological Chemistry》
· Yoshikawa S and Caughey WS. (1990년 5월 15일). “Infrared evidence of cyanide binding to iron and copper sites in bovine heart cytochrome c oxidase. Implications regarding oxygen reduction”. 《J Biol Chem.》 265 (14
· Int J Oncol. 2018 Jan;52(1):19-37.doi: 10.3892/ijo.2017.4203. Epub 2017 Nov 10.Cucurbitacin B and cancer intervention: Chemistry, biology and mechanisms (Review) ,Sukant Garg , SunilC Kaul , Renu Wadhwa