[미생물학 실험]세균염색

소개

세균 염색법에 관해 실험한 뒤 작성한 레포트입니다
여러 가지 세균염색법에 관해 기술했고 실험 재료 및 방법, 결과, 고찰부분도 성실히 기록했습니다
많은 도움되세요^^

목차

1. 실험제목 세균의 염색과 형태 관찰
2. 실험목적
3. 실험이론
1) 생체 미생물의 현미경 관찰법
2) 단순염색(Simple staining)
3) 그람 염색(Gram staining)
4) 항산성 염색(Acid fast staining, Ziehl-Neelsen method)
5) 협막 염색(Capsule staining)
6) 포자 엽색(Spore staining)
7) 편모 염색(Flagella staining)
8) 이염소체 또는 과립 염색
(Metachromatic granule staining, Volutin staining)
9) 방선균의 형태관찰
10) 세균 염색액
4. 실험재료 및 방법
실험1> Simple staining
실험2> Negative staining
실험3> Gram staining
실험4> Spore staining
5. 결과
6. 고찰
7. 참고문헌

본문내용

3) 그람 염색(Gram staining)
(1) 원리
Gram 염색은 세균의 동정 또는 구분에 쓰이는 가장 중요한 염색방법의 하나이다. 세균 분류의 중요한 특성 중의 하나는 Gram 염색성이며, 세균은 Gram 양성균과 Gram 음성균 의 두 균으로 대별할 수 있다.
이 방법은 1884년 Christian Gram이 최초로 개발한 이래, 시약의 조성 및 처리 시간을 다르게 하는 변법이 개발되었으나, 기본적으로 네 가지 시약이 사용되는 것은 동일하다. 흔히 염기성 염료(crystal violet, 또는 methyl violet), 매염제(iodine), 탈색제(알콜, 아세톤 및 이들의 혼합액), 대조 염색제(safranin 또는 carbol fuchsin)등이 사용된다.
Gram 양성균은 crystal violet 등의 염료로 염색한 후, 탈색제 처리로 탈색되지 않기 때문에 염색 후 남색이나 보라색을 나타낸다. 반면에 Gram 음성균은 매염제의 처리 후에도 탈색제에 의해 탈색되기 때문에 나중에 염색하는 대조 염색액에 의해 염색되어 적색으로 관 찰 된다.

(2) 재료
-염색약: crystal violet, safranin
-균주: 관찰대상 그람 양성 또는 음성 세균
-현미경, 슬라이드글라스, cover glass, 백금이, 알코올램프, 흡지, 세척병, 95%에틸알코올, Lugol 액

(3) 방법
① 도말, 고정시킨 슬라이드에 crystal violet을 가하여 1분간 염색한다.
② 수돗물로 서서히 염색액을 씻어낸다.
③ 매염제인 iodine용액을 가하여 1분간 처리한다.
④ Iodine을 수돗물로 씻어낸다.
⑤ 30초 간 95% 알콜로 탈색시킨다.
⑥ 수돗물로 다시 알콜을 씻어낸다.
⑦ Safranin으로 45초 동안 대조 염색한다.
⑧ 수돗물로 safranin을 씻어낸다.
⑨ 여분의 수분을 말린 후 검경한다.

참고자료

· 미생물 및 면역학 분과회, 최신실험미생물학, 도서출판 신일상사