[미생물학 실험]세균의 염색

소개글

세균 염색법에 관한 실험을 한 뒤 쓴 실험보고서입니다
이론에는 염색법에 관한 총론적 이야기와 함께 총 7가지의 염색법에 관하여 기록하였습니다
그림을 많이 첨부하여 용량이 큽니다(용량이 크므로 파일을 여신 다음 잠시 기다리세요~)
또한 출력했을 때 질이 좋게 하기 위해 해상도를 높게 설정해 놓았습니다(미리보기서 그림보기는 해놓지 않았습니다)
마지막에는 제가 제출했었던 레포트 중 결과부분을 첨부했으니 결과 그리실때 참조하세요
실제 실험은 단순염색, negative 염색, 그람염색, spore염색을 해보았습니다
고찰부분에는 실제 해본 실험과 관련하여 자세한 분석을 더하였으니 참고하시기 바래요^^
아울러 좋은 평가도 부탁드립니다

목차

1. 실험제목 세균염색

2. 실험목적

3. 서론
(1) 염색을 위한 기초적인 조작법
① 슬라이드의 준비
② 도말표본준비
③ 열고정 (heat fixation)
(2) 미생물의 염색원리
(3) 염료(Dye)의 종류
(4) 염색의 종류
① 단순염색(Simple staining)
② 음화 염색(Negative staining)
③ 그람염색(Gram staining)
④ 아포염색 (Spore staining)
⑤ 항산성 염색 (Acid-fast staining; Zeihl-Nelson method)
⑥ 협막염색 (Capsule staining)
⑦ 편모 염색(Flagella staining)

4. 실험재료 및 방법
Exp1> Simple staining
Exp2> Negative staining
Exp3> Gram staining
Exp4> Spore staining

5. 결과
Exp1> Simple staining
Exp2> Negative staining
Exp3> Gram staining
Exp4> Spore staining

6. 고찰

7. 참고문헌

본문내용

③ 그람염색(Gram staining)
a. 목적
-세균의 그람 염색성에 따른 분류를 위해 하는 염색법이다. 세균 분류의 중요한 특성 중의 하나는 그람 염색성이며, 세균은 Gram 양성균과 Gram 음성균의 두 균으로 대별할 수 있다.
b. 원리
-덴마크(Danish) 세균학자 Christian Gram이 1884년 최초로 개발한 이래, 시약의 조성 및 처리 시간을 다르게 하는 변법이 개발되었으나, 기본적으로 네 가지 시약이 사용되는 것은 동일하다. 흔히 염기성 염료(Crystal violet, 또는 methyl violet), 매염제(iodine), 탈색제(알코올, 아세톤 및 이 들의 혼합액), 대조 염색제(safranin 또는 carbol fuchsin)등이 사용된다.
-Gram 양성균은 세포벽 성분 중 peptidoglycan이 두껍게 발달되어 있는 반면, Gram 음성균은 peptidoglycan이 얇은 대신 LPS(lipopolysaccharide)가 발달되어 있고 outer membrane이 존재한다.
■ 1차 염색 (primary stain)
: Crystal violet(염기성시약) -> 모든 세포는 보라색으로 염색된다.
■ 매염제(mordant) 처리
: Gram' iodine
Crystal violet 시약을 세포에 강하게 고정시키기 위해 사용한다.
1차 염색시약과 결합하여 불용성 화합물인 CVI(crystal violet-iodine) complex를 형성하여 세포에 더욱 강하게 결합시킨다.
-> 모든 세포는 그대로 보라색이다.
♣ Gram 양성균은 세포벽 중 peptidoglycan이 두꺼워 CVI complex가 peptidoglycan에 강하게 결합, 제거가 어렵다.

참고 자료

Cappuccino, 2005, Microbiology, 7th, PEARSON, San Francisco
김영권 외, 2001, 미생물학실험, 2nd, 고려의학, 서울
한국미생물학회, 1998, 미생물학실험서, 1st, 을유문화사, 서울