[미생물학 실험]세균의 염색

소개

세균 염색법에 관한 실험을 한 뒤 쓴 실험보고서입니다
이론에는 염색법에 관한 총론적 이야기와 함께 총 7가지의 염색법에 관하여 기록하였습니다
그림을 많이 첨부하여 용량이 큽니다(용량이 크므로 파일을 여신 다음 잠시 기다리세요~)
또한 출력했을 때 질이 좋게 하기 위해 해상도를 높게 설정해 놓았습니다(미리보기서 그림보기는 해놓지 않았습니다)
마지막에는 제가 제출했었던 레포트 중 결과부분을 첨부했으니 결과 그리실때 참조하세요
실제 실험은 단순염색, negative 염색, 그람염색, spore염색을 해보았습니다
고찰부분에는 실제 해본 실험과 관련하여 자세한 분석을 더하였으니 참고하시기 바래요^^
아울러 좋은 평가도 부탁드립니다

목차

1. 실험제목 세균염색

2. 실험목적

3. 서론
(1) 염색을 위한 기초적인 조작법
① 슬라이드의 준비
② 도말표본준비
③ 열고정 (heat fixation)
(2) 미생물의 염색원리
(3) 염료(Dye)의 종류
(4) 염색의 종류
① 단순염색(Simple staining)
② 음화 염색(Negative staining)
③ 그람염색(Gram staining)
④ 아포염색 (Spore staining)
⑤ 항산성 염색 (Acid-fast staining; Zeihl-Nelson method)
⑥ 협막염색 (Capsule staining)
⑦ 편모 염색(Flagella staining)

4. 실험재료 및 방법
Exp1> Simple staining
Exp2> Negative staining
Exp3> Gram staining
Exp4> Spore staining

5. 결과
Exp1> Simple staining
Exp2> Negative staining
Exp3> Gram staining
Exp4> Spore staining

6. 고찰

7. 참고문헌

본문내용

③ 그람염색(Gram staining)
a. 목적
-세균의 그람 염색성에 따른 분류를 위해 하는 염색법이다. 세균 분류의 중요한 특성 중의 하나는 그람 염색성이며, 세균은 Gram 양성균과 Gram 음성균의 두 균으로 대별할 수 있다.
b. 원리
-덴마크(Danish) 세균학자 Christian Gram이 1884년 최초로 개발한 이래, 시약의 조성 및 처리 시간을 다르게 하는 변법이 개발되었으나, 기본적으로 네 가지 시약이 사용되는 것은 동일하다. 흔히 염기성 염료(Crystal violet, 또는 methyl violet), 매염제(iodine), 탈색제(알코올, 아세톤 및 이 들의 혼합액), 대조 염색제(safranin 또는 carbol fuchsin)등이 사용된다.
-Gram 양성균은 세포벽 성분 중 peptidoglycan이 두껍게 발달되어 있는 반면, Gram 음성균은 peptidoglycan이 얇은 대신 LPS(lipopolysaccharide)가 발달되어 있고 outer membrane이 존재한다.
■ 1차 염색 (primary stain)
: Crystal violet(염기성시약) -> 모든 세포는 보라색으로 염색된다.
■ 매염제(mordant) 처리
: Gram' iodine
Crystal violet 시약을 세포에 강하게 고정시키기 위해 사용한다.
1차 염색시약과 결합하여 불용성 화합물인 CVI(crystal violet-iodine) complex를 형성하여 세포에 더욱 강하게 결합시킨다.
-> 모든 세포는 그대로 보라색이다.
♣ Gram 양성균은 세포벽 중 peptidoglycan이 두꺼워 CVI complex가 peptidoglycan에 강하게 결합, 제거가 어렵다.

참고자료

· Cappuccino, 2005, Microbiology, 7th, PEARSON, San Francisco
· 김영권 외, 2001, 미생물학실험, 2nd, 고려의학, 서울
· 한국미생물학회, 1998, 미생물학실험서, 1st, 을유문화사, 서울