[유전학 실험] 제한효소

소개

유전학 제한효소 실험 레포트 입니다.

전기영동 한 젤 사진도 있고 사진과 그림자료들이 들어 있습니다.

목차

1. Material & Method

2. 관련 자료
1) Plasmid
2) 제한효소
3) EtBr(ethidium bromide)의 역할
4) DNA가 음전하를 띄는 이유
5) Agarose gel 전기 영동시 DNA의 이동에 영향을 주는 요인들

3. Results & Discussion

4. References

본문내용

자신의 복제점을 소유하고 있어 자체 복제가 가능한 DNA분자를 replicon이라 한다. 원형인 세균 주염색체는 replicon이며 그보다 훨씬 작은 환형 DNA분자로서 독립 복제하는 DNA분자를 plasmid라고 한다. Plasmid는 염색체로 규정되는 거대한 분자들과 유사한 소형 염색체이다. 염색체 DNA와 마찬가지로 생체 내에서의 형태는 보통 공유결합된 폐쇄된 원형의 초나선형 (supercoiled form)의 이중 사슬의 DNA이고 핵염색체와 떨어져 세포질 속에 존재한다. 이는 자기 복제가 가능하여 자손에게 쉽게 전해지지만 생존에 필수적인 기능을 가지지는 않으며, 따라서 플라스미드가 없어도 세균은 대부분 정상적으로 생존한다. 다만 플라스미드는 세균에 특성기능을 부여하는 비필수적 DNA로서 작용한다.

<중 략>

․종합
본 실험은 제한효소로 DNA를 절단하고, 이른 전기 영동을 통해 running하여, DNA 단편의 크기를 알아내어, DNA상에서 절단부위의 위치를 결정하는 실험이었다. 이러한 과정을 제한지도 작성이라고 한다. 본 실험에서는 두가지의 다른 제한효소를 사용하는 이중 절단법을 사용하였다. 결과상으로 여러 가지 오차가 발생하긴 하였으나 전반적인 실험의 의미와 실험과정상의 방법적인 면을 다시 살펴보겠다.
먼저 실험 과정을 살펴보자. 실험 과정은 크게 제한효소 절단과 전기영동으로 나뉜다. 제한효소로는 EcoRI와 ScaI을 사용하였다. 제한효소도 효소이므로 효소로서의 특징을 가지는데, 그 중 하나가 활성도에 관한 것이다. 제한효소도 기질, 즉 잘라야할 DNA가닥에 EK라 활성도가 달라지므로 이런 제한효소의 활성도를 기준을 정하여 명확하게 표시해야 할 필요성이 생긴다. 그래서 unit 이란 단위를 정해주게 되는데, 1unit은 1㎕ 의 효소가 1㎕ 의 DNA를 한 시간 동안에 완벽하게 자를 수 있는 activity를 가리킨다고 한다. 효소 EcoRI는1.88unit/㎕ 효소 ScaRI는 1.43unit/㎕를 사용하였다.

참고자료

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· 기초생화학, L.G. Schere, 1993, p.312.
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· 필수세포생물학, B. Alberts외, 교보문고, 1999, pp. 291-293.
· Molecular Genetic Analysis of Populations - A Practical Approach, A.R. Hoelzel, IRL Press (Oxford University Press), 1998, pp. 259-267.
· Pulsed Field Gel Electrophoresis - A Practical Approach, A.P. Monaco, IRL Press (Oxford University Press), 1995, pp. 315-320.
· Biology - The Science of Life, R.A. Wallace, G.P. Sanders, & R.J. Ferl, 4th ed., Harper Collins College Publishers, 1996, pp.
· 생물학사전, 아카데미서적, 1998.