[화학] lipid 지질 분석

목차

TLC을 이용한 지질분석
실험목표
실험 준비물
실험 원리(TLC원리)
실험방법
실험결과

T L C를 이용한 Lipid의 분리
1. 시약
2. 실험방법

본문내용

❤ 실험 목표
TLC 크로마토 크래피를 이용하여 세포내의 지질을 분석한다.

❤ 실험 준비물
암세포, TLC plate, MeOH, CHCl3. NaCl, Vortex기계, 원심 분리기, 피펫, 메스실린더, 바셀린, 요오드 chamber, N2 gas, P.E, P.C, AA, PIP2

❤ 실험 원리
세포는 인지질로 이루워져 있으므로 암세포에서 지질을 추출해 낼 수 있다.
크로마토그래피는 흡착 정도를 가지고 물질을 분리 하는 것인데, 이것으로써 지질의 성분을 분석할 수 있다.
이동한 지질을 확인하기 위해, iodine chamber에 넣는다. 지질이 iodine과 만나면 addition반응을 하여 노란색을 띈다.

❤ 실험 방법
1. 암세포에 400㎕ MeOH, CHCl3. NaCl을 넣고, vortex 기계를 사용하여 잘 혼합되도록 한다.
2. 원심 분리기를 이용하여, 15000rpm으로 1분간 회전시킨다. 원심 분리기를 이용할 때 좌우 균형이 맞도록 한뒤 회전 시킨다.
3. 지질층이 생겼으면 피펫을 이용하여, 지질층을 추출한다. 이때, 단백질 성분이 묻어나지 않도록 한다.
4. N2 gas를 이용하여 건조시켜, 액체성분을 날린 지질성분만을 추출한다.

참고자료

· 없음