media 제조와 streaking, spreading 도말법을 통한 균주 배양 실험

목차

1. Introduction
2. background
3. Method
4. Result
5. Discussion
6. Reference

본문내용

Introduction
배지(media)는 세포 배양 시 가장 중요한 구성 요소로, 세포 성장에 필요한 영양소, 성장인자, 호르몬 등을 제공하고, pH와 삼투압 조절도 수행한다. 배지에 들어가는 대표적인 성분은 포도당, 아미노산, 지방, 비타민, 무기염류, pH buffer가 있고, 추가로 혈청, 펩톤, 성장인자 등을 공급하기도 한다.
배지의 종류는 매우 다양하나, 크게 액체 배지(Liquid Media or Broth Medium)와 고체 배지(Solid Media)로 나눌 수 있다.
액체 배지는 고화제(solidifying agent)가 없는 배지로, 문자 그대로 액체 상태의 배지이다. 미생물의 대량 배양에 적합하고, 시험관 내에서 짧은 시간에 많은 세포 수를 얻을 수 있어, 고농도의 미생물 준비에 유용하다.
액체 배지는 주로 목적에 따라 조성을 달리하는 방식으로 그 종류가 다양하게 세분화되어 있다. Nutrient Broth는 가장 기본적인 복합배지(complex medium)로 동물에서 유래된 추출물로 구성되어 있어, 미생물의 일반적인 배양에 사용된다. Yeast Extract Broth는 Nutrient broth에 yeast extract 5 g/L를 추가한 형태로 비타민 B 및 유기 탄소 공급원이 풍부하기 때문에 조금 더 성장 조건이 까다로운 미생물에게 사용된다. Inorganic Synthetic Broth는 화학적으로 정의된 배지로, 모든 성분이 정확한 농도와 순수 화합물로 구성되어 있어, 특정 미생물을 위한 분석에 사용된다(Cappuccino and Welsh, Microbiology: A Laboratory Manual, 109-110).
고체 배지는 한천(agar) 등의 고화제가 첨가된 배지로, 굳은 고체 상태의 배지를 의미한다. 고화제의 비율에 따라 반고체 배지(semisolid medium)를 만드는 것도 가능하다. 액체

참고자료

· Thermo Fisher Scientific, Cell Culture Basics Handbook (Waltham, MA: Thermo Fisher Scientific Inc., 2020), rev. 0820
· Jongkwang Hong, Cell Culture Media, lecture slide 5, “Biological Engineering” (lecture, Yonsei University Mirae Campus, Wonju, March 20, 2025)
· James G. Cappuccino and Chad T. Welsh, Microbiology: A Laboratory Manual, Global ed., 11th ed. (Harlow, England: Pearson Education, 2017), 17
· Harley, John P., and Lansing M. Prescott. Laboratory Exercises in Microbiology. 5th ed. New York: McGraw-Hill, 2002, Exercises 13
· Princeton University, Environmental Health and Safety, "Autoclave Use," Princeton University Environmental Health and Safety, accessed March 13, 2025, https://ehs.princeton.edu/laboratory-research/biological-safety/autoclave-use
· Princeton University, Environmental Health and Safety, "Autoclave Use," Princeton University Environmental Health and Safety, accessed March 13, 2025, https://ehs.princeton.edu/laboratory-research/biological-safety/autoclave-use/autoclave-cycles
· Princeton University, Environmental Health and Safety, "Autoclave Use," Princeton University Environmental Health and Safety, accessed March 13, 2025,
· https://ehs.princeton.edu/laboratory-research/biological-safety/autoclave-use/autoclave-validation
· Centers for Disease Control and Prevention. "Other Sterilization Methods." CDC Infection Control Guidelines. Last reviewed September 18, 2016. https://www.cdc.gov/infection-control/hcp/disinfection-sterilization/other-sterilization-methods.html
· Biological Safety: Biosafety Cabinets & Clean Benches," University of New Hampshire, accessed March 13, 2025, https://www.unh.edu/research/research/complianceehs/environmental-health-safety/biological-safety/biosafety-cabinets-clean-benches
· Senz M, Keil C, Schmacht M, Palinski S, Cämmerer B, Hageböck M. Influence of Media Heat Sterilization Process on Growth Performance of Representative Strains of the Genus Lactobacillus. Fermentation. 2019; 5(1):20. https://doi.org/10.3390/fermentation5010020
· Charles E. Lankford, Joanna M. Ravel, and Hal H. Ramsey, “The Effect of Glucose and Heat Sterilization on Bacterial Assimilation of Cystine,” Journal of Bacteriology 73, no. 1 (1957): 65–69
· D. Sue Katz, The Streak Plate Protocol (Washington, DC: American Society for Microbiology, 2016)
· Kathryn Wise, Preparing Spread Plates Protocols (Washington, DC: American Society for Microbiology, 2016)