[실험 A+보고서] DNA결합효소 결과보고서

소개

"[실험 A+보고서] DNA결합효소 결과보고서"에 대한 내용입니다.

목차

1. 결과

2. 고찰
1) DNA Ladder marker와의 비교
2) 밴드가 끌리는 현상과 DNA band의 굵기에 대한 고찰

본문내용

Lambda DNA Map을 확인한 결과 HindⅢ의 경우 7개의 마디로 절단되었고, EcoRⅠ의 경우는 6개의 마디로 절단된 것을 확인할 수 있다. HindⅢ의 절단 사이즈는 23129bp, 9416bp, 6682bp, 4362bp, 2322bp, 2027bp, 564bp이고, EcoR Ⅰ의 절단 사이즈는 21225bp, 7421bp, 5804bp, 5643bp, 4878bp, 3531bp이다.
이론값 분석을 마친 후, 실제값과 비교할 수 있다. 먼저 각각의 샘플에 들어간 구성은 아래와 동일하다. 실험결과, 아가로스 겔에서 보이는 5개의 띠는 왼쪽부터 DNA marker, ①, ②,③, ④이다.

① lambda DNA 5μl + DW 13μl + 10x Restriction Enzyme buffer 2μl
② lambda DNA 5μl + DW 12μl + 10x Restriction Enzyme buffer 2μl + Restriction Enzyme1 1μl
③ lambda DNA 5μl + DW 12μl + 10x Restriction Enzyme buffer 2μl + Restriction Enzyme2 1μl
④ lambda DNA 5μl + DW 11μl + 10x Restriction Enzyme buffer 2μl + Restriction Enzyme1 1μl+ Restriction Enzyme2 1μl

①번의 경우 전기영동 결과 분리가 잘 되자 않음을 확인할 수 있다. 이는 ③번도 마찬가지지만, 희미하게 띠가 보이는 것을 보아 분리가 된 것으로 추정된다. HindⅢ은 EcoRⅠ보다 더 멀리까지 이동하기에 끈이 길고 분리가 많이 된다. 따라서 사진과 비교했을 때 제한효소Ⅰ이 HindⅢ임을 추정할 수 있다. 반대로 희미하게 분리가 된 건 EcoRⅠ, 즉 제한효소2 라고 추측한다.

참고자료

· B.Suri, J.C. Shepherd, T.A. Bickle/“The EcoA restriction and modification system of Escherichia coli 15T-: enzyme structure and DNA recognition sequence”/1984
· https://www.takara.co.kr/web01/product/productList.asp?lcode=D043401 (2023.10.22., 11:30 접속)
· 최준영, 안유민 and 황승용. (2006). DNA의 제한효소 반응 및 전기영동 검출용 PDMS/유리 마이크로바이오칩. 대한기계학회논문집 A, 30(1), 26-31.