[이화여대 생명과학실험1 분반1등 A+ 레포트] ELISA

소개

이화여자대학교 생명과학실험1 과목 A+ 레포트입니다.
정성 들여 작성했습니다. 참고하시어 좋은 결과 있으시길 바랍니다.

목차

I. 실험 목표

II. Introduction - 실험 배경
1. ELISA
2. 4PL (4-parameter logistic curve)

III. Materials & Methods

IV. Results

V. Discussion

VI. References

본문내용

I. 실험 목표
Indirect ELISA를 통해 antigen에 specific하게 binding 하는 antibody를 관찰하고, antibody의 농도에 따라 달라지는 absorbance 값의 의미를 분석 및 이해한다.

II. Introduction - 실험 배경
1. ELISA
ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)는 antigen과 antibody 사이의 interaction을 통해 이들의 정량 혹은 정성적 분석을 하는 기법이다. 이때 사용되는 antibody에는 enzyme이 conjugation 되어 있는데, 해당 enzyme과 특정 substrate가 binding 할 시 발색 반응, 형광 반응, 발광 반응 등을 일으킨다. 이와 같은 반응이 일어난 정도를 측정함으로써 분석을 진행한다. ELISA에는 Direct ELISA, indirect ELISA, sandwich ELISA 등 다양한 방식이 존재한다.

① Direct ELISA
Direct ELISA는 primary antibody만을 통해 antigen을 직접 검출하는 방식이다. 우선 well에 antigen을 coating 하여 바닥에 고정한 뒤, 해당 antigen에 대한 antibody를 투여하여 coating 된 antigen과 결합하도록 한다. 이후 antigen과 결합하지 않은 antibody를 wash 하고, antibody에 conjugation 된 enzyme과 반응하는 substrate를 넣어 반응을 일으킨다. 해당 반응이 일어나는 정도를 통해 antigen 혹은 antibody의 양을 측정할 수 있다. 이 과정에서 한 개의 primary antibody가 추가적인 antibody의 사용 없이 직접 antigen을 detection 하기 때문에 direct ELISA라고 부른다.

참고자료

· 「4 parameter logistic curve」, 『AAT Bioquest』,
· https://www.aatbio.com/tools/fourparameter-logistic-4pl-curve-regression-online-calculator, 접속일 2024.05.27.