[약대 실습 레포트] 면역학 실습 레포트_면역세포에서 항염증 효과 확인(cell treat)

소개

PEET 고득점으로 약학대학 입학 후 현 약사입니다.
약학대학 편입 준비생, 올림피아드 준비생, 기타 편입학 준비생들에게 도움이 되는 자료를 업로드합니다

면역세포에서 항염증 효과를 확인하는 면역학 실습 레포트입니다.

목차

1. Introduction: 대식세포의 염증반응, Raw 264.7, Resveratol
2. Protocol: 실험군, 배양조건, cell seeding, cell treat
3. Result
4. Discussion
5. Assignment: LPS를 처리하는 이유
6. Pre-study: NO assay의 원리, ELISA의 목적과 원리

본문내용

1. introduction
- 대식세포의 염증 반응
대식세포 표면의 TLR이 PAMP를 인식하거나, 특정 cytokine에 대해 수용체에서 인식하는 경 우 대식세포가 활성화 된다. 대식세포가 활성화되면, 표식작용이 증가하고 항미생물 작용이 증가하며, ROS의 활성이 증가하게 되는데 이는 iNOS의 활성을 증가시키고 아르기닌이 산소 와 NADPH와 반응하여 NO가 생성되는 반응이 일어나게 된다.
1 활성화된 대식세포에서 IL-1, TNF-α, IL-6 등을 분비하게 되고, 이들은 염증반응 매개 물질로 림프구의 활성을 증가시킨다. TNF-α는 TRAF 혹은 FADD를 통해 각각 NF-kB, apoptosis를 활 성화하게 된다. 또한 급성염증반응, 접착성 분자 발현 증가, 단핵구 자극, 발열, 심근수축 저해, 혈관 평활근 수축 저해 등을 유발한다. IL-1은 NF-kB, AP-1을 활성화 시키며, IL-1은 인테그린 발현 증가, 발열 유발, 간에서 급성기 단백질 생산, 호중구와 혈소판 생성을 유도하게 된다. IL-6는 급성기 단백질 생산, 호중구 생성, B cell 성장 자극, Treg 생성 및 작용 억제 등을 유도 한다.
- RAW 264.7
RAW 264.7은 대표적은 macrophage cell line으로 BALB/C에서 추출한 cell line이다. 주로 염증에 대한 실험에 사용되고, 바닥에 붙어서 자라는 성장 특징을 지닌다.

<중 략>

◎ Cell seeding
① Cell scrapper를 이용하여 세포를 25T flask의 벽면에서 떼어내 준다.
② 떼어낸 세포를 충분히 pepetting한 후에 15mL conical tube에 모아준다.
③ 1300rpm에서 5분간 centrifuge 한다.
④ 상층액을 제거한 뒤 배지 5mL을 넣어주고 세포를 충분히 피펫팅하여 단일 세포 부유액을 만든다.
⑤ 세포 10μL를 취하여 튜브에 넣는다.

참고자료

· 면역학 실습 2주차 수업자료
· 최신면역학(2nd Ed), 감염미생물, 면역약학 분과학회, 라이프 사이언스