[생명공학] 미생물 접종 및 배양과 Simple staining and microscopy

소개

제가 직접 작성한 레포트이고 점수도 잘받았어요~많은 도움이 되었음 하네요

목차

1.실험목적
2.실험원리
(1)배양
(2)배양방법
(3)미생물희석법
(4)미생물염색
(5)단순염색
(6)염색하는 기본적인 방법
(7)미생물의 형태와 구조
(8)현미경
(9)광학현미경의 구조
(10)광량과 상의 형성
(11)배율
(12)해상력
3.시약 및 기자재
4.실험방법
5.실험결과작성요령
6.실험참고사항
7.참고서적

본문내용

(1) 배양
실험실에서 생물체(주로 미생물 및 발생중인 동식물의 배)나 생물체의 일부(기관 ·조직 ·세포 등)를 적당히 인공적으로 조절한 환경조건에서 생육시키는 행위를 말한다.
① 혼합 배양(mixed culture)
: 두 종류 이상의 균을 함께 배양하는 것
② 순수 배양(pure culture)
: 혼재된 균군 중에서 원하는 균만 따로 분리하여 배양하는 것
(5) 단순 염색(Simple staining)
세포를 염색하기 위하여 한 가지 생물학적 염료(biological dye)를 이용하는 염색방법이고 세균의 형태, 크기와 배열 상태 등을 관찰하려할 때 시행한다.. 박테리아의 핵산이나 일부 세포벽 구성성분은 대체로 음전하를 띄기 때문에 이들과 강하게 결합할 수 있는 염기성 액체시약(+charge chromogen을 가짐)을 쓰면 염색이 잘 된다. 일반적으로 사용하는 염색 시약은 methylene blue, crystal violet, carbon fuchsin 등이 있다. 염색 정도와 시간은 염색 시약에 따라 차이가 있다.

① 염기성 염료 (basic dye)
● Methylene blue(1-2분), 밝은 청색,
● Crystal violet(20-60초), 자주빛(보라색)
● Carbol fuchsin(15-30ch), 엷은 빨강(분홍색)
- positively charged dye
- negatively charged molecule과 결합 (핵산, 단백질...)
- 박테리아 표면 -> negatively charged
②산성 염료(acid dye)
●Eosin, Rose bengal, Acid fuchsin
- negatively charged group(carboxyl, phenol...)
- 세포의 양전하 부분에 결합

참고자료

· 1. 한국미생물학회, “미생물학 실험” , 아카데미 서적, 1987
· 2. 홍순우, 최신일반미생물학 실험, 효일문화사, 1997
· 3. Harry W. Seeley, Jr. Paul J. VanDemark, "Microbes in Action" , 3rd ed., W. H. Freeman and Company.
· 4. Harold J. Benson, "Microbiological Applications" , 5th ed., Wm. C. Brown, Publishers.