[유전공학실험]DNA Liagation

목차

1. Theme
2. Date
3. Name, Coworkers
4. Abstract
5. Principle
1) DNA ligase의 활동 방식
2) sticky 말단은 ligation 효율을 증가시킨다.
3) Blunt 말단 분자에 Sticky 말단의 도입
6. Reagent & Equipment
7. Method
8. Result
9. Discussion
10.Refference

본문내용

유전자 재조합 과정에 사용되는 ligase는 주로 DNA ligase이며 이 효소는 원핵세포, 진핵세포, 바이러스 등에서 유래한 것이 있는데, 현재 많이 사용되는ligase는 T4 DNA ligase와 E. coli DNA ligase이다. T4 DNA ligase는 cofactor로 ATP를 필요로 하고, E. coli ligase는 NAD+를 필요로 한다. 이들 두 ligase는 blunt-ended DNA, cohesive-ended DNA, nicked DNA등에 모두 작용할 수 있으나 E. coli DNA ligase 는 T4 DNA ligase와 비교할 때 blunt-ended DNA에 작용하는 힘이 약하므로 일반적인 유전자 재조합 과정에서는 T4 DNA ligase를 더 많이 사용하는 경향이 있다. 형질 전환체의 분석방법은 여러 가지가 있으나 원하는 유전자의 지속발현을 위해 핵 genome에 삽입하고자 하는 경우도 세가지 분석방법을 통과해야만 한다.

참고 자료

http://www.nonoil.com/bio/engineering/chapt4.htm#4.3.%20Ligation,%20Joining%20DNA%20molecules%20Together
유전자 크로닝 입문