[화공생물공학기초실험] 유산균 음료로부터 미생물 분리 평판계수법

소개

동국대학교 2022-2 화공생물공학기초실험 A+ 결과레포트

목차

1. Abstract

2. Introduction

3. Materials & Methods
1) 실험 기구 및 시약
2) 실험 방법

4. Results
1) 배지 결과 사진
2) 각 배지별로 생성된 콜로니 개수

5. Discussion

6. Conclusion

7. Reference

본문내용

본 실험에서는 배지를 제조해 유산균을 배양하여 유산균 음료 속의 유산균을 확인하고, 평판계수법을 이용해 대략적인 유산균의 수를 추정하는 것을 목적으로 한다.
발효란, 미생물이 산소를 사용하지 않고 유기물을 분해하여 에너지를 얻는 당 분해 과정이다. 여기서 미생물이란 일반적으로 세포구조가 간단한 하등생물로, 미생물은 다양한 면에서 인류에게 유익하게 사용되고 있다. 반면 바이오파울링 등 해양 구조물의 표면에 미생물이 쌓여 이용이 어렵게 만드는 경우도 있다. 이를 해결하기 위해 미생물의 생장을 저해하는 성분을 구조물의 표면에 도포할 수 있을 것이다.
미생물 생장곡선은 유도기, 대수기, 정체기, 사멸기로 이루어진다. 유도기는 적응시기로, 세포 수는 증가하지 않고 새로운 구성성분과 필요한 효소 등을 합성한다. 다음으로 대수기에는 성장 분열이 가장 빠르며, 평형생장을 통해 성장한다. 정체기는
미생물의 수가 일정하게 유지되는 시기로, 영양물질의 부족 등이 원인으로 작용하여 발생한다. 사멸기는 불리한 환경변화로 인해 미생물 수가 감소하는 시기이다.
미생물 계수법은 현미경계수법, 자동세포계수법, 평판계수법 등이 있다. 그중 평판계수법은 고체상 영양배지에서 집락을 형성하는 살아있는 세포를 계수하는 법이다. 도말평판배지법과 혼합평판배지법으로 나뉘며, 두가지 주의사항이 있다. 먼저 세포가 고농도일 때 연속희석이 요구될 수 있으며, 세포 수가 적은 경우는 농축과정이 요구된다. 또한 집락형성단위를 계수하므로, 세포의 뭉침정도나 형태에 따라 오차가 발생할 수 있다. 정확도가 높으나 집락형성까지의 시간이 소요된다는 단점이 있다.
본 실험에서는 BCP 첨가 평판측정용 한천배지와 BPB 첨가 평판측정용 MRS 배지가 사용된다. 먼저 BCP배지는 평판측정용 한천배지에 브롬크레졸퍼플(BCP)을 0.004
-0.006% 첨가한 배지로, BCP가 pH 5.2에서는 노란색을, pH 6.8에서는 보라색을 나타냄을 이용하여 유산균 수를 측정한다.

참고자료

· 화공생물공학과 교수진. “화공생물공학기초실험”. 동국대학교 화공생물공학과. 2022. pp. 25–31.
· 김재혁, 송원중, 박근영, 안선경, 박용민, 권지향. "바닐린 유사 화합물이 미생물생장과 쿼럼센싱에 미치는 영향." 한국물환경학회·대한상하수도학회 공동 춘계학술발표회. 2019. pp. 226-227.
· 곽경진, 김현지, 김성우, 최덕수, 권오도. 유기배지를 이용한 미생물 배양효과. 한국토양비료학회 학술발표회 초록집. 2020. pp. 21-22.
· 임다예슬, 김민영, 유재천. "초과 배양 상태의 미생물 고체 배지 분석을 위한 콜로니 계수 프로그램." 정보 및 제어 심포지엄 논문집. 2011. pp. 362-363.
· 유대환, 최의소. (2000). 전자수용체 측정을 통한 호기 및 무산소조건에서의 미생물 증식계수 산정. 한국물환경학회지, 16(5), pp. 621-631.