[분자생물학실험]Agarose gel electrophoresis

소개

"[분자생물학실험]Agarose gel electrophoresis"에 대한 내용입니다.

목차

1. 실험목적
2. 실험이론 및 원리
3. 실험 기구 및 시약
4. 실험 방법
5. 주의 사항
6. 실험 결과
7. 토의 사항
8. 참고 문헌

본문내용

1. 실험 목적
가. 일정한 pH의 전해질 용액 중에 단백질과 같은 입자를 부유시켜 전기장 내에 놓으면 이 입자는 전하를 띠어 반대 전극으로 이동하는데 이 현상을 전기영 동이라 하고 Agarose gel electrophoresis를 실험하자.
나. 증폭된 PCR product를 전기 영동으로 분리하여 분석한다.
다. 전기 영동의 원리를 이해하고 전기 영동 장치 및 Gel 판독기의 사용법을 익힌다.
라. DNA ladder의 band와 비교하여 증폭된 PCR product의 크기를 측정한다.

2. 실험 이론 및 원리
가. 겔 전기영동
겔은 콜로이드(colloid) 용액이 굳어진 상태를 말하는 것이다. 전기영동이란 말은 전기적인 힘에 의해 전하를 띤 입자가 이동하는 것을 가리키는 표현이다. 따라서 겔 전기영동은 전류를 흘려주어서 전하를 가진 입자가 겔 내부에서 이동하여 분리되도록 하는 기술이다. DNA 나 RNA의 경우 주로 아가로스를 사용하고, 단백질의 경우 폴리아크릴아마이드 등을 굳혀서 겔을 만든다. 구조나 크기 등 입자의 성질에 따라서 겔을 통과하여 이동하는 속도가 달라지게 된다.
겔에 홈을 만들어 DNA나 RNA, 단백질 등의 분자를 집어넣고 전류를 흘려주면 음전하를 띤 이들 분자들은 전기적인 힘에 의해 겔 안에서 이동하게 된다. 같은 크기를 가진 분자들을 하나의 집단을 형성하여 움직이게 되는데 만약 수조개의 동일한 분자들을 전기 영동하였다면 겔을 염색하였을 때 이것이 하나의 띠 모양으로 나타나는 것을 확인할 수 있다. 작은 분자는 큰 분자에 비해 빠른 속도로 이동하기 때문에 결과적으로 서로 다른 크기의 분자들은 겔 상에서 서로 다른 위치에서 띠 모양을 나타내게 된다. 전기영동은 DNA나 단백질을 크기에 따라 분획하기 위한 방법 중 하나로써, DNA와 단백질은 전하를 띠고 있기 때문에 전기를 걸어주면 각 분자의 전기적 특성에 따라 전장을 이동하게 된다.

참고자료

· 생명과학, 교보문고, 생명과학교재 편찬위원회, 2009, p.110～122
· 전기영동, 의학문화사, 권오현, 2002, p.14～57
· 생화학, Nelson, 2010, 월드사이언스, p.155～183
· 생물학실험서, 라이프사이언스, 민철기, 강창수, 2004년, p.135～138
· 생명과학, 바이오사이언스, 전상학, 2007, p.327～334
· 유전공학, 탐구당, 박영순 역, 2002, p.87～91
· 생명과학, 생명과학교재연구회, 광림사, 2005, p159～163