[생물공학실험]A+ 효소의 정량분석 예비&결과 레포트 고찰세세히

소개

"[생물공학실험]A+ 효소의 정량분석 예비레포트"에 대한 내용입니다.

목차

Ⅰ. 예비레포트
1. 실험제목
2. 실험날짜
3. 실험목적
4. 실험장비&시약
5. 실험원리&이론
6. 실험방법
7. 참고자료

Ⅱ. 결과레포트
8. Result
9. Discussion
10. reference

본문내용

: 이번 실험은 유당 대신 ONPG를 사용하였다 , 유당 분해시 글루코스와 갈락토스로 분해가 되는데 이 생성물은 둘 다 무색을 띄기 때문에 결과를 확인 할 수 없다. 따라서 유당 대신 ONPG를 사용하였다. ONPG란 β-갈락토시다아제의 활성을 측정하기 위한 기질로 널리 이용되는 물질로서 가수분해되어 O-니트로페놀을 유리하고 이것이 알칼리성에서 노란색(최대흡수파장 420nm)을 띠기 때문에 쉽게 비색정량을 할 수 있기 때문에 사용한다.
따라서 이것을 이용하여 흡광도420nm에서 공시험 값을 뺀 수치를 통해 μmol를 계산하고 이를 통해 20분으로 나눠주어 unit을 구할 수 있다. o-니트로페놀의 경우 흡광도의 계수가 정해져 있기 때문에 공식에 이용하고 분광광도계에서 420nm로 측정한 값을 통해 미지수를 설정할 수 있다.
실험에 들어가기 앞서 기질 준비 단계에서 효소 용액 제조시 버퍼용액을 반드시 제조하여야 하는데 효소의 활성은 pH가 일정 하기 때문이다. 또한 40도로 미리 예열을 해주는데 , 미리 예열하지 않고 실험을 진행하면 40℃까지 온도를 올리는데 실험의 오차가 발생할 수 있기 때문이다.

참고자료

· 박인원 외 8인 공역, Stryer 생화학(하), 서울외국서적, 1999
· 김의락 외 11인 공저, 최신 생화학, 형설출판사, 1993
· 안용근 저, 효소단백질 정제법, 양서각, 1994