복음의 이해와 기독정신의 함양 기말고사다음 중 3문제를 택하여 답하라(각 10점).문제 1. 혈루증 여인의 이야기와 야이로의 딸을 살리신 이야기(막 5:1-43)를 가지고 ①마가가 샌드위치 형식의 구성을 통하여 어떻게 의미를 생산하는지, ②이 본문을 통하여 마가가 의도하는 것이 무엇인지 설명해보라.본문 막 5:1-201. 예수께서 바다 건너편 거라사인의 지방에 이르러 2. 배에서 나오시매 곧 더러운 귀신[영] 들린 사람이 무덤 사이에서 나와 예수를 만나니라. 3. 그 사람은 무덤 사이에 거처하는데 이제는 아무도 그를 쇠사슬로도 맬 수 없게 되었으니 4. 이는 여러 번 고랑과 쇠사슬에 매였어도 쇠사슬을 끊고 고랑을 깨뜨렸음이러라. 그리하여 아무도 그를 제어할 힘이 없는지라. 5. 밤낮 무덤 사이에서나 산에서나 늘 소리 지르며 돌로 자기의 몸을 해치고 있었더라. 6. 그가 멀리서 예수를 보고 달려와 절하며 7. 큰 소리로 부르짖어 이르되 지극히 높으신 하나님 아들 예수여, 나와 당신이 무슨 상관이 있나이까... 8. 이는 예수께서 이미 그에게 이르시기를 더러운 귀신[영]아, 그 사람에게서 나오라 하셨음이라. 9. 이에 물으시되 네 이름이 무엇이냐. 이르되 내 이름은 군대니 우리가 많음이니이다 하고... 13. 허락하신대 더러운 귀신들[영들]이 나와서 돼지에게로 들어가매 거의 이천 마리 되는 떼가 바다로 향하여 비탈로 내리달아 바다에서 몰사하거늘.. 15. 예수께 이르러 그 귀신 들렸던 자 곧 군대귀신 지폈던 자가 옷을 입고 정신이 온전하여 앉은 것을 보고 두려워하더라... 18. 예수께서 배에 오르실 때에 귀신 들렸던 사람이 함께 있기를 간구하였으나 19. 그에게 이르시되 집으로 돌아가 주께서 네게 어떻게 큰 일을 행하사 너를 불쌍히 여기신 것을 네 가족에게 알리라 하시나 20. 그가 가서 예수께서 자기에게 어떻게 큰 일 행하셨는지를 데가볼리에 전파하니 모든 사람이 놀랍게 여기더라.본문 막 5:21-3421. 예수께서 (배)를 타시고 다시 맞은편으로 건너가시니 큰은 은총이다. vs 야이로의 두려움 1. 자신의 의지,행위와 무관하게 왔다. 2. 그것은 극단의 당혹스럼이요 멍에다. 3. 전적으로 수용하든 달리 해결하든 해야 한다. 오직 자신과의 치열한 투쟁만이 필요하다.”믿음도 두 가지“혈루병 여인 의 믿음 1. 예수에 대해 들은 이상, 그녀에게 믿음은 1. 집안에 머물지 않고 현장으로 나아가는 것 2. 에워싸 미는 무리를 뚫고 도달하는 것, 3. 움츠리지 않고 손을 내밀어 만지는 것, 4. 백일하에 드러난 자신의 악행을 이실직고~ 5. 믿음은 행동하는 용기!2. 그는 스스로 기구한 운명을 반전시킬 힘이 없다 두려움이 외부로부터 오듯 해결도 외부로부터 3. 그래서 모든 가능성은 외부에 있다. (예수는 나의 선택을 이해하고 용납하리라, 믿음은 사람이 사람에게 갖는 지고지순한 신뢰)야이로의 믿음 1. 그에게도 믿음은 예수라면 내 딸을 구하리라는 예수에 대한 절대 신뢰다.2. 두려움이 외부로부터 왔지만, 해결은 전적으로 자신 안에 있다.3. 낯선 여인의 난입으로 새로운 믿음이 요구된다. (1) 구원의 발걸음이 지체되는 상황에서 믿음은 끝까지 참는 인내요, 기다리는 한결 같음 (2) 죽음의 실체가 마지막 남은 희망을 삼켰을 때 믿음은 온전히 내면의 두려움을 쫓아내는 일, 완전히 꺼진 희망의 불꽃을 살려내는 일~,”열두 해“의 기구한 인연열두 해와 열두 살(1) 야이로는 정중하게 딸아이의 구원을 요청했다. 그때 아이의 나이가 열두 살(2) 딸아이의 구원을 향해 나아갈 때 한 여인이 끼어들었다. 그때 여인의 병력이 열두 해.2. 둘은 같은 12년을 같은 도시에서 같은 하늘아래 살아왔다.3. 그러나 같은 12년을 정반대의 운명으로 살았다. (1) 회당장의 딸로서, 온갖 특권 누르며 복되게 모든 특권은 부모에게서 왔다. 2. 몸이 망가진 채, 저주스런 나날을 살아왔다 모든 고통은 정결체계와 의사에게서 왔다.복음은 반전이다!딸아이에게 생명을 위협하는 위기가 왔다. 그는 12년의 특권을 뒤로 하고 종말(죽음)을 향하여 나아간다(23절)여인하여 갈릴리 호수에 이르시매 32 사람들이 귀 먹고 말 더듬는 자를 데리고 예수께 나아와 안수하여 주시기를 간구하거늘 33 예수께서 그 사람을 따로 데리고 무리를 떠나사 손가락을 그의 양 귀에 넣고 침을 뱉어 그의 혀에 손을 대시며 34 하늘을 우러러 탄식하시며 그에게 이르시되 에바다 하시니 이는 열리라는 뜻이라. 35 그의 귀가 열리고 혀가 맺힌 것이 곧 풀려 말이 분명하여졌더라 36 예수께서 그들에게 경고하사 아무에게도 이르지 말라 하시되 경고하실수록 그들이 더욱 널리 전파하니 37 사람들이 심히 놀라 이르되 그가 모든 것을 잘하였도다. 못 듣는 사람도 듣게 하고 말 못하는 사람도 말하게 한다 하니라.여인은 누구인가?26절. 헬라인, 수로보니게 족속 (시리아-페니키아 여인)더욱이 지중해, 항구도시 두로는 고대 해상왕국, 바다의 대제국 페니키아의 수도여인은 이를테면 용맹스럽던 전사의 후예!그런 그가 가장 가련한 처지에 놓였다. 눈에 넣어도 아프지 않은 딸아이가 가끔씩...그런데 이 여인이 예수에 대한 소문을 들었다.4:20에서 좋은 땅에 떨어졌다는 것은... 말씀을 1.듣고 2.받아 3. 결실 * 열두 해 혈루병을 앓던 여인도... (5:27)간구하는 여인 & 거절하는 예수피정 중인 예수 : 24절. “한 집에 들어가 아무도 모르게 하시려 하나...”간구하는 여인 : 26절. “자기 딸에게서 귀신 쫓아내 주시기를 간구하거늘..냉혹하게 거절하는 예수 : 27절. ”자녀로 먼저 배불리 먹게 할지니 자녀의 빵을 취하여 개들에게 던짐이 마땅치 아니하니라.“날선 대화를 보라!이것은 딸아이의 축귀에 관한 이야기다. 그러나 여느 치유의 기적이나 축귀 이야기와 달리 중심에 범상치 않은 대화가 있다.예수 : ”자녀로 먼저 배불리 먹게 할지니 자녀의 빵을 취하여 개들에게 던짐이 마땅치 아니하니라(27절). “여인 : ”주여, 옳소이다마는 상 아래 개들도 아이들이 먹던 부스러기를 먹나이다(28절).“논쟁이다! 신약학자들은 이 이야기를 논쟁사화로 분류한다.자녀와 개이것은 축귀에 서 차지하는 비중과 의미가 이방 땅 족속들과의 선교할 수 있는 계기가 되었으므로 실로 천문학적인 가치의 비중을 차지하며 그 복음에 대한 의미는 무한대에 가깝다.문제 3. 8-10장에 나타난바 ①예수의 길과 제자들의 길 그리고 ②두 소경의 이야기를 통해 마가가 말하고자 하는 복음의 의미는 무엇인가 설명해보라.본문 막 8:1-121. 그 무렵에 또 큰 무리가 있어 먹을 것이 없는지라. 예수께서 제자들을 불러 이르시되 2 내가 무리를 불쌍히 여기노라. 그들이 나와 함께 있은 지 이미 사흘이 지났으나 먹을 것이 없도다. 3 만일 내가 그들을 굶겨 집으로 보내면 길에서 기진하리라. 그 중에는 멀리서 온 사람들도 있으니라 4 제자들이 대답하되 이 광야 어디서 떡[빵]을 얻어 이 사람들로 배부르게 할 수 있으리이까 5 예수께서 물으시되 너희에게 떡[빵] 몇 개나 있느냐. 이르되 일곱이로소이다 하거늘 6 예수께서 무리를 명하여 땅에 앉게 하시고 떡[빵] 일곱 개를 가지사 축사하시고 떼어 제자들에게 주어 나누어 주게 하시니 제자들이 무리에게 나누어 주더라. 7 또 작은 생선 두어 마리가 있는지라. 이에 축복하시고 명하사 이것도 나누어 주게 하시니 8 배불리 먹고 남은 조각 일곱 광주리를 거두었으며 9 사람은 약 사천 명이었더라. 예수께서 그들을 흩어 보내시고 10 곧 제자들과 함께 배에 오르사 달마누다 지방으로 가시니라.본문 막 8:13-2113. 그들을 떠나 다시 배에 올라 건너편으로 가시니라. 14. 제자들이 떡(빵) 가져오기를 잊었으매 배에 떡(빵) 한 개 밖에 그들에게 없더라. 15. 예수께서 경고하여 이르시되 삼가 바리새인들의 누룩과 헤롯의 누룩을 주의하라 하시니 16. 제자들이 서로 수군거리기를 이는 우리에게 떡(빵)이 없음이로다 하거늘 17. 예수께서 아시고 이르시되 너희가 어찌 떡(빵)이 없음으로 수군거리느냐. 아직도 알지 못하며 깨닫지 못하느냐. 너희 마음이 둔하냐. 18. 너희가 눈이 있어도 보지 못하며 귀가 있어도 듣지 못하느냐. 또 기억하지 못하느냐. 1 예수께서 이르시되 내가 진실로 너희에게 이르노니 나와 복음을 위하여 집이나 형제나 자매나 어머니나 아버지나 자식이나 전토를 버린 자는 30. 현세에 있어 집과 형제와 자매와 어머니와 자식과 전토를 백 배나 받되 박해를 겸하여 받고 내세에 영생을 받지 못할 자가 없느니라. 31. 그러나 먼저 된 자로서 나중 되고 나중 된 자로서 먼저 될 자가 많으니라.본문 막 10:32-3432. 예루살렘으로 올라가는 길에 예수께서 그들 앞에 서서 가시는데 그들이 놀라고 따르는 자들은 두려워하더라. 이에 다시 열두 제자[열둘]을 데리시고 자기가 당할 일을 말씀하여 이르시되 33. 보라. 우리가 예루살렘에 올라가노니 인자가[사람의 아들이] 대제사장들과 서기관들에게 넘겨지매 그들이 죽이기로 결의하고 이방인들에게 넘겨 주겠고 34. 그들은 능욕하여 침 뱉으며 채찍질하고 죽일 것이나 그는 삼일만에 살아[일어]나리라 하시니라.본문 막 10:46-5246. 그들이 여리고에 이르렀더니 예수께서 허다한 무리와 함께 여리고에서 나가실 때에 디매오의 아들인 맹인 거지 바디매오가 길 가에 앉았다가 47. 나사렛 예수시란 말을 듣고 소리 질러 이르되 다윗의 자손 예수여 나를 불쌍히 여기소서 하거늘 48. 많은 사람이 꾸짖어 잠잠하라 하되 그가 더욱 크게 소리 질러 이르되 다윗의 자손이여 나를 불쌍히 여기소서 하는지라. 49. 예수께서 머물러 서서 그를 부르라 하시니 그들이 그 맹인을 부르며 이르되 안심하고 일어나라. 그가 너를 부르신다 하매 50. 맹인이 겉옷을 내버리고 뛰어 일어나 예수께 나아오거늘 51. 예수께서 말씀하여 이르시되 네게 무엇을 하여 주기를 원하느냐, 맹인이 이르되 선생님이여 보기를 원하나이다. 52. 예수께서 이르시되 가라. 네 믿음이 너를 구원하였느니라 하시니 그가 곧 보게 되어 예수를 길에서 따르니라.오병이어 기적의 기억(첫 번째 먹이심)첫 번째 먹이심(오병이어)의 기적과 비교된다. 그 무렵에 또 큰 무리가 있어 먹을 것이 없는지라 -> 오병이어 기적을 생각나게~(1) 큰 2)
다음 모든 문제를 답하라(각 10점).그리고 보너스 문제 중 하나를 택하여 답하라.1. 마가복음에서 예수의 세례란 무엇인가?세례를 통한 예수의 체험이란 무엇인가?1장 본문을 분석하며 설명해보라.답안 : 1장 본문을 살펴보면 세례요한에 대해 “그는 광야에서 죄 사함을 받게 하는 회개의 세례를 전파”한다.“ 라고 언급된다. 즉, ”죄사함을 얻게 하는 회개의 세례“로서 5절에서”유대인의 세례“는 자기의 죄를 자복하고 요단강에서 그에게 세례를 받는다고 한다.”그에 반해 “예수의 세례”는 9절에서 그때에 예수께서 갈릴리 나사렛으로부터 와서요단강에서 요한에게 세례를 받으셨다고 했는데 , 이때에 유대인들은 자기 죄를 자복하는데 반해, 예수는 자기의 죄를 자복하지 않았다. 즉, 유대인의 세례는 상반신을 수면위로 드러낸 채 입으로 자기 죄를 자복하는 세례이며 반면 예수의 세례는 요단 속으로 요한에 의해 세례를 받았다. 라고 하는데 온몸이 요단강 속으로 들어가 입으로 자복할 수 없는 세례로서예수는 죄가 없는 몸으로서 모든 인류를 위해 죄를 대신 짊어지시고 모든 죄를 사하기 위한 “죽음의 침례”를 받으셨는데 자신의 과거와 전존재에 대하여 완전히 죽어지는 경험이며, 요단의 물은 예수를 완전히 잠기게 하였다. 그 후 11절에서 하늘로부터 소리가 나기를 너는 내 사랑하는 아들이라. 내가 너를 기뻐하노라 하시니라. 즉 이것은 , 아무도 보지 못하며, 아무도 듣지 못하는 예수 자신의 확신으로 예수만이 듣는 하나님의 음성이며 , 예수를 향한 하늘의 음성 이다. 즉, 듣는 것은 하늘의 계시이며 보는 것은 예수의 확신이다. 즉 이 것이 복음의 기원, 이며 이야기의 시작이라고 할 수 있다.다시 말해 막 1:10-11에서는 예수께서 세례를 받으며 얻으신 예수의 체험이며, 다른 복음서와 달리, 마가복음에서 예수께서는 1.성령(생명의 숨결)이 비둘기처럼 내려와 당신속으로 들어가는 것을 보시고(봄/빛) , 2. 하늘로서 나는 소리, “너는 내 아들이다. 내가 너를 기뻐하노라”라는 말씀을 듣는다.(들음/중풍병자의 치유2:13-17 식탁교제 논쟁2:18-22 : 금식 논쟁2:23-28 : 안식일 밀이삭 논쟁3:1-6 안식일 치유의 논쟁다시 말해 갈릴리 논쟁은 A. 2:1-12 신성모독의 논쟁B : 2:13-17 식사에 관한 논쟁C : 2:18-22 금식과 관련된 논쟁B : 2;23-28 안식일 밀 이삭 논쟁A : 3:1 ? 6 안식일의 치유논쟁 으로 구성되어 있다.여기서 2:1-12인 중풍병자의 치유가 일련의 갈릴리 논쟁을 촉발시키는 계기가 되었다.3:1 예수께서 다시 회당에 들어가시니 한쪽 손 마른 사람이 거기 있는지라.2 사람들이 예수를 고발하려 하여 안식일에 그 사람을 고치시는가 주시하고 있거늘3 예수께서 손 마른 사람에게 이르시되 한 가운데에 일어서라 하시고4 그들에게 이르시되 안식일에 선을 행하는 것과 악을 행하는 것, 생명을 구하는 것과 죽이는 것, 어느 것이 옳으냐 하시니 그들이 잠잠하거늘 5 그들의 마음이 완악함을 탄식하사 노하심으로 그들을 둘러보시고 그 사람에게 이르시되 네 손을 내밀라하시니 내밀매 그 손이 회복되었더라. 6 바리새인이 나가서 곧 해롯당과 함께 어떻게 하여 예수를 죽일까 의논하더라.여기서 보면 (3;2) 하나는 회당엔 예수를 고발하려 예수를 주시하는 자들의 시선이며 , 그들은 바리새인들이다(3:6) 반면 안식일 가버나움 그 회당에는 한쪽 손 마른 사람이 있다. 말라비틀어진 손은 한껏 위축된 그의 삶이고 존재이며 , 또 하나는 그렁그렁한 눈으로 하염없이 바랍는 예수의 시선이 있다.분석해보면 이미 안식일 법을 어긴 것으로 낙인 찍힌 예수에게(2:23-28), 회당 안에 그 가련한 자가 있었다는 것은 예수에게 큰 덫으로 아직은 안식일이고 해가 지려면 시간이 남았는데 , 이때 예수께서 치료하시면 , 그것은 의료행위이고 노동이 되는데 이러면 치료하면 안식일 법을 위반하는 것이 되어 죽음에 이르게 된다. 예수께서 질문하시길, “안식일에 선을 행하는 것과 악을 행하는 것, 생명을 구하는 것과 죽이는 것, 어느 것이 옳느냐?”라고 말씀하셨는데로생각해보면 , 예수의 사역이란 사회의 주변부로 내몰린 사람들을 일으켜 중심에 세워주는 것으로, 축귀와 치유, 그리고 식탁교제(식탁교제란 예수와 식탁교제는 많은 예수이야기로 식탁(식탁교제)은 하나님의 나라의 상징이며 마가복음과 식탁교제의 문학적 주제이고 식탁의 주인은 : 예수, 제자들, 세리와 죄인들 인데 세리는 사기꾼 같이 가버니움 세관은 국제교역로 때문에 일일이 율법을 지킬 수 없어 부정했다. 세리는 죄인으로 취급됐다. 죄인들은 직업상 율법을 지킬수 없는 자들 은행업자, 고리대금업자, 병자 등을 제자들로 삼아 식탁을 더럽혔다.)여기서 유대인들과 예수의 가치관 차이가 또 보여지는데, 유대인들의 밥상은 성결(정결)과 순수성, 순수성, 동일성, 동질성을 가지는데 즉, 베타성을 갖는다. 하지만 예수께서는 말하길 “건강한 자는 의사가 쓸 데 없고 병든 자는 있다”(17절)이라며 건강한 자는 정결하여 회개할 것도 없다. 하지만 병든 자는 부정하고 죄인이여서 믿음으로 나오며 회개한다. (1장15절) 예수는 이들을 영접한다. “나는 의인을 부르러온 것이 아니요 죄인을 부르러 왔노라” 라며 의사가 병자를 치유하듯, 사람의 아들은 죄인들을 식탁으로 불러 그 나라의 주인이 되게 한다.“)-> 즉, 다시 말해 예수의 식탁교제는 누구든 받아들이는 개방성과 수용성이고 모든 사람을 아우르는 혼합성과 다양성이다.)로 이어지게 된다. 즉 여기서 예수의 혁신은예수의 새로운 관점 : 치유와 회복은 안식일에 선을 행하는 것이다. 생명에 관한 모든 것, 특히 생명을 일으키는 것은 하나님의 창조와 관련된 것이닫. 그러므로 예수의 치유는 세상과 생명을 창조하신 하나님의 뜻에 해당하는 것이다. 더욱이 이웃을 위한 행위는 이웃을 섬기는 것으로서, 하나님을 향한 노동, 즉 예배와 같다.비교가 뚜렷하게 되는데, 유대인 지도자들인 바리새인들의 단호한 태도를 보면 ,1. 지엄한 율법은 분명 안식일을 지키라 한다. (출20:8-11; 신5:12-15). 범하면 투석형이다.2. 예수의 행위는 분명 치료행위다. 주인이 사람이라 한다. 모든 종교와 종교적 제도는 사람을 하나님처럼 섬겨야 하며 신의 안식은 인간의 구원에 있다. 라는 것이 예수 하나님의 나라의 핵심이다.3. 역사적 예수의 비유는 어떤 특징이 있는지,마가는 예수의 비유를 어떻게 이해했는지,그래서 어떻게 들음과 봄에 연결되는지 설명해보라.예수님의 비유는 역사적으로 독특한 특징을 가지고 있다.매일 누구나 겪는 일상적인 일을 소재로 하며, 일상적인 일과 하나님의 나라를 나란히 놓는은유의 이야기이며 시간과 공간의 배경에 인물이 등장하는 하나의 짧은 이야기로 구성이 된다. 이야기의 플롯은 예상치 못한 전환을 통해 이야기가 미궁으로 빠지게 되며 그래서 비유는 언제나 “세계를 전복시키는 기획”이 된다. 당연히 여겨지던 것이 뒤집히며 “현실세계”에 사는청중은 이야기 속에서 ‘비유세상“을 접하고, 현실세상으로 돌아가지만, 그는 같은 현실세상 안에서 다른 삶을 살아가게 된다.따라서 마가복음 4장에서 예수의 비유(4-8절)와 이에 대한 마가의 해석(14~20절)은 많이 다른데, 예수의 비유(4-8절)은 실패의 경우 어떤 것은 길가, 다른 것은 돌밭 , 다른 것은 가시떨기에 떨어진다고 하며 즉 셋(단수 3회)과 성공의 경우(복수 1회)의 균형을 맞춘다.그러나 마가의 해석(14~20절)은 이 균형을 깨고, 네 경우를 모두 복수처리하되 동급으로 만든다. 예수님의 비유는 ”씨의 비유“이지만 , 해석에서는 ”땅의 비유“가 된다.해석의 본문은 예수의 비유를 알레고리로 만든다. 즉 , 1. 씨는 말씀이며 2. 새는 사탄이고, 해는 환난과 박해며, 가시는 염려와 유혹과 욕심이다. 땅은 사람이다.따라서 마가의 통찰력은 이로서 복음, 예수 이야기의 줄거리를 만드는데,1. (길가)에는 사람들에게 말씀이 떨어지지만, 그러나 어떤 이들은 사탄에게 말씀을 빼앗긴다.2. (돌밭)에서는 어떤 이들은 말씀으로 인하여 환난과 박해에 넘어진다.EX) 시몬 베드로가 가야바의 뜰에서 예수를 부인하며 넘어질 것이다.3. (가시떨기) 어떤 이들은 세상의 염려, 재물의라.2. 비유는 말씀이고 소리다. 이를 들어야 한다. 예수께서 비유를 말하시면 무리는 듣는다.3. 무리는 듣기도 하지만 보기도 해야 한다.4. 비유가 시어인 것은 말소리 속에 상상케 하는 힘이 있기 때문이다.5. 예수의 비유는 한 줄 시요, 한 폭 그림이다! 즉 ,비유의 말소리를 읽으면 한 폭그림이 떠오르고, 한 줄 비유를 들으면 그림은 이내 움직이는 동영상이 된다. 비유는 그림언어이다.예수의 비유는 하나님 나라의 청각적 연출이며 우리는 그걸 들어야 한다.”소리는 사라지되 소리가 만드는 그림이 듣는 이의 눈앞에 잔상처럼 남는다.“ 하여, 비유를 들으면, 그림이 떠오른다. 즉 , 비유는 하나님 나라의 시각적 연출이다. 소리가 사라지기 전에, 소리 속에 있는 그 그림을 보아야 한다.마가에게 비유는 소리로써 만드는 빛의 예술 말씀으로 빚어내는 하나님 나라의 비전이다.씨 뿌리는 자의 비유로 말하면, 제자도의 3단계는 말씀을 1.듣고 2. 받아 3. 결실 하는 것이다(4:20) 하여 비유의 말소리를 듣고, 불멸의 그림을 확신처럼 마음에 담으면 , 인생의 뜰안에서 100배 결실로 하나님의 나라를 이룬다.하지만 들어도 소용없고 보아도 알 수 없는 비유에 대해서 12절 그들은 보기는 보아도 알지 못하게 하고, 듣기는 들어도 깨닫지 못하게 하여... 라고 나오는데 , 여기서 다시 비유를 봄&들음과 관련시킨다. 비유는 ”듣는 것“이고, ”보는 것“이다.예수는 소리로써 ”비유“를 말씀하신다. 청중은 말씀을 듣고 비유의 그림을 보아야 한다.그러나 비유는 가림막이다. 비유는 드러내기도 하지만 숨기기도 한다.나타내기도 하지만 감추기도 한다.(4:22) 하여, 보기는 보아도 진정으로 보지 못하고, 듣기는 들어도 깨달음이 없다. 비유란 하나님 나라의 빛과 소리로서 마가는 세 차례나 ”듣다“,”보다“를 겹쳐썼다. 21~25절 내용을 살펴보면 빛/봄과 관련된 언어로 가득차 있는 것을 볼 수 있다. 따라서 비유란? ”들음“이며 ”봄“이다. 1. 3절에서 들으라. 보라! 2. 12절 (외부인) 다.
1. Theme : 마들렌 제조2. Date : 2018.12.134. Purpose밀가루를 이용하여 마들렌을 제조하면서 제조원리를 이해할 수 있다.5. Principle? 마들렌-마들렌은 프랑스의 대표적인 티 쿠키임-밀가루, 버터, 달걀, 우유를 넣고 레몬 향을 더해 가운데가 볼록 튀어나온 특유의 가리비 모양으로 구워 만듦-부드럽고 촉촉한 식감의 마들렌은 아이들의 간식으로 애용됨-전통적인 마들렌은 레몬 향을 넣지만 오늘날에는 다양하게 변형된 레시피가 등장하고 있음-주로 아몬드와 같은 견과류나 과일을 첨가하거나 오렌지 블로섬으로 향을 내고, 꿀로 단맛과 촉촉한 식감을 더하기도 함? 밀가루-밀가루는 기본적으로 단백질 함량(건조 글루텐)에 따라 강력분, 준 강력분, 중력분, 박력분 등으로 분류-강력분(경질 밀)은 제빵 및 스파게티용으로 사용-박력분(연질 밀)은 제과 및 쿠키용으로 주로 사용-고급 케이크일수록 글루텐 함량과 회분 함량이 낮은 고급 밀가루를 사용함?제빵용 밀가루-경질 동맥 민 경질 춘맥을 제분한 것이 강력분임-단백질 함량은 최소 10.5%이상, 11~14% 정도를 함유하며 회분 함량은 1등급 수준의 0.4~0.55% 정도가 바람직함-믹싱 내구성과 발효 내구성이 크며 흡수율도 높음-제분 시 발생하는 손상 전분의 권장 함량은 4.5~8.0%가 제빵적성에 적당함?밀가루 단백질(글루텐)의 역할(1)반죽 동안의 글루텐(gluten)의 변화-밀가루와 물이 결합함에 따라 flour-dough film-water상의 공유한 필름을 형성-반죽은 원천적으로 형성된 dough film을 끊어줌으로써 밀가루와 물이 접촉할 수 있는 기회를 더 많이 만들어 보다 많은 얇은 층이 형성되고, 계속 혼합되면서 작은 전분 알갱이와 단백질 분자 내로 물이 침투됨-글루텐 복합 망상구조를 형성하기 위해 전분 알갱이가 물을 흡수하여 글루텐 망상구조에 혼입됨으로써 가소성과 응축성을 부여하고, 전분이 gelatinization됨에 따라 미립자 상호간에 이동 역할을 부여함(2)글루텐 형성이 반죽는 작업을 펀치라 하며, 이 공정은 정형과 방의 기포 상태를 좋게 하는 중요한 역할을 함-내상이란 빵의 단면에 보이는 기포 자국으로 기포의 크기와 자국의 모양이 정돈되어 있는 것이 중요-발효를 계속하면 반죽에 있는 기포는 점점 커져 기포 주위에 있는 글루텐 막이 가스 압력으로 넓혀지고 팽창됨(3)글루텐의 성질과 식염-식염은 빵의 풍미뿐만 아니라 빵의 물성에 있어서도 대단히 중요한 역할을 함-밀가루로 만든 반죽의 강도와 신장성이 좋고 나쁜은 이 글루텐의 성질에 따라 결정됨?전분의 역할(1)전분의 호화전분을 가수, 가열하면 온도 상승에 따라 전분의 분산액은 점도가 매우 큰 투명 또는 유백색의 콜로이드 용액을 형성하며, 농도가 클 때나 냉각할 때는 반고체의 겔을 형성-이와 같은 과정을 호화라고 하며, 이러한 현상은 식품화학상 그리고 실제의 전분질 식품의 가공, 조리 부문에서 가장 중요한 현상의 하나임-생정분의 단단한 미셀의 구조는 이완되거나 부서지면서 전분 입자는 팽윤 상태가 되고 amylose는 수용성인 sol로 amylopectin은 뜨거운 물에 불용성인 겔 상태로 됨(2)전분의 종류-amylopectin은 노화되기 어려우며, 전분의 호화 현상은 주로 전분 중의 amylose에 의해 이루어짐-호화정도는 곡류에 따라 다르지만 전분 입자의 크기, 구조의 차이에 의해 호화 정도가 다름-수분함량 : 전분은 수분 함량이 많을수록 호화는 잘 일어나며, 수분을 흡수한 전분 입자가 팽윤된 상태에서 구조가 쉽게 파괴되기 때문-pH : 전분의 SWELLING과 호화는 전분 현탁액의 pH에 의해 크게 영향을 받으며 alkali성에서 팽윤과 호화가 촉진됨-당류 : 당류의 농도가 매우 낮을 경우에는 전분의 호화에 거의 영향을 미치지 않으나 그 농도가 20% 이상이 되면 전분의 호화를 크게 억제시킴-염류 : 염화칼슘과 같은 일부 염류는 팽윤을 촉진하지만 이는 교질화 온도를 내려주기 때?호화 전분의 특성-호화 전분은 생 전분의 경우와 달리 amylose의 분자들이 분산되어 있는 상태이므로파전분은 그 속의 분자들이 모두 완전히 풀어진 상태이므로 전분 분해 효소들의 작용을 받기 쉬우며, 따라서 호화전분으로 된 식품은 생 전분으로 된 식품보다 소화율이 좋음-호화 정도가 큰 전분일수록 인체 내에서 소화가 잘 된다는 것을 의미함?주의사항-완료된 반죽을 마르지 않게 비닐을 덮어 30분 정도 실온에서 휴지시킴-준비한 팬 스프레드를 붓으로 고르게 바름-팬에 알맞은 반죽량을 짜 넣음-구울 때 지나치게 착색이 되지 않도록 유의6. Reagent & Equipment박력분, 베이킹파우더, 달걀, 설탕, 체, 버터, 레몬, 짤주머니, 틀, 오븐, 접시, 볼, 주걱7. Method① 볼에 달걀을 넣고 거품기로 휘핑하여 거품을 냈다.② 설탕을 넣어 설탕이 녹을 때까지 가볍게 섞었다.③ 체 친 박력분, 베이킹파우더를 넣고 섞었다.④ 레몬을 첨가 후 녹인 버터를 넣고 거품기로 반죽을 골고루 섞었다.⑤ 반죽은 짤 주머니에 담아 냉장실에 넣어 20분간 휴지시켰다.⑥ 마들렌 틀을 녹인 버터를 붓으로 골고루 펴 바르고 반죽을 80% 정도 반죽을 채웠다.⑦ 170℃로 예열한 오븐에서 10~12분간 구웠다.⑧ 식힘망에 올려 식혔다.1. Theme : 마들렌 제조2. Date : 2018.12.134. Purpose밀가루를 이용하여 마들렌을 제조하면서 제조원리를 이해할 수 있다.5. Principle? 마들렌-마들렌은 프랑스의 대표적인 티 쿠키임-밀가루, 버터, 달걀, 우유를 넣고 레몬 향을 더해 가운데가 볼록 튀어나온 특유의 가리비 모양으로 구워 만듦-부드럽고 촉촉한 식감의 마들렌은 아이들의 간식으로 애용됨-전통적인 마들렌은 레몬 향을 넣지만 오늘날에는 다양하게 변형된 레시피가 등장하고 있음-주로 아몬드와 같은 견과류나 과일을 첨가하거나 오렌지 블로섬으로 향을 내고, 꿀로 단맛과 촉촉한 식감을 더하기도 함? 밀가루-밀가루는 기본적으로 단백질 함량(건조 글루텐)에 따라 강력분, 준 강력분, 중력분, 박력분 등으로 분류-강력분(경질 밀)은 제빵 및 스파게티용으로 사용-박력분(연질 밀)함?제빵용 밀가루-경질 동맥 민 경질 춘맥을 제분한 것이 강력분임-단백질 함량은 최소 10.5%이상, 11~14% 정도를 함유하며 회분 함량은 1등급 수준의 0.4~0.55% 정도가 바람직함-믹싱 내구성과 발효 내구성이 크며 흡수율도 높음-제분 시 발생하는 손상 전분의 권장 함량은 4.5~8.0%가 제빵적성에 적당함?밀가루 단백질(글루텐)의 역할(1)반죽 동안의 글루텐(gluten)의 변화-밀가루와 물이 결합함에 따라 flour-dough film-water상의 공유한 필름을 형성-반죽은 원천적으로 형성된 dough film을 끊어줌으로써 밀가루와 물이 접촉할 수 있는 기회를 더 많이 만들어 보다 많은 얇은 층이 형성되고, 계속 혼합되면서 작은 전분 알갱이와 단백질 분자 내로 물이 침투됨-글루텐 복합 망상구조를 형성하기 위해 전분 알갱이가 물을 흡수하여 글루텐 망상구조에 혼입됨으로써 가소성과 응축성을 부여하고, 전분이 gelatinization됨에 따라 미립자 상호간에 이동 역할을 부여함(2)글루텐 형성이 반죽에 미치는 영향-빵을 만드는 과정에서 여러 번 반죽을 눌러 반죽 내부에 포함되어 있는 탄산가스를 제거하는 작업을 펀치라 하며, 이 공정은 정형과 방의 기포 상태를 좋게 하는 중요한 역할을 함-내상이란 빵의 단면에 보이는 기포 자국으로 기포의 크기와 자국의 모양이 정돈되어 있는 것이 중요-발효를 계속하면 반죽에 있는 기포는 점점 커져 기포 주위에 있는 글루텐 막이 가스 압력으로 넓혀지고 팽창됨(3)글루텐의 성질과 식염-식염은 빵의 풍미뿐만 아니라 빵의 물성에 있어서도 대단히 중요한 역할을 함-밀가루로 만든 반죽의 강도와 신장성이 좋고 나쁜은 이 글루텐의 성질에 따라 결정됨?전분의 역할(1)전분의 호화전분을 가수, 가열하면 온도 상승에 따라 전분의 분산액은 점도가 매우 큰 투명 또는 유백색의 콜로이드 용액을 형성하며, 농도가 클 때나 냉각할 때는 반고체의 겔을 형성-이와 같은 과정을 호화라고 하며, 이러한 현상은 식품화학상 그리고 실제의 전분질 식품의 가공,자는 팽윤 상태가 되고 amylose는 수용성인 sol로 amylopectin은 뜨거운 물에 불용성인 겔 상태로 됨(2)전분의 종류-amylopectin은 노화되기 어려우며, 전분의 호화 현상은 주로 전분 중의 amylose에 의해 이루어짐-호화정도는 곡류에 따라 다르지만 전분 입자의 크기, 구조의 차이에 의해 호화 정도가 다름-수분함량 : 전분은 수분 함량이 많을수록 호화는 잘 일어나며, 수분을 흡수한 전분 입자가 팽윤된 상태에서 구조가 쉽게 파괴되기 때문-pH : 전분의 SWELLING과 호화는 전분 현탁액의 pH에 의해 크게 영향을 받으며 alkali성에서 팽윤과 호화가 촉진됨-당류 : 당류의 농도가 매우 낮을 경우에는 전분의 호화에 거의 영향을 미치지 않으나 그 농도가 20% 이상이 되면 전분의 호화를 크게 억제시킴-염류 : 염화칼슘과 같은 일부 염류는 팽윤을 촉진하지만 이는 교질화 온도를 내려주기 때문?호화 전분의 특성-호화 전분은 생 전분의 경우와 달리 amylose의 분자들이 분산되어 있는 상태이므로 물을 첨가한 후 잠시 가열하면 물을 급속하게 흡수하여 팽윤되며, 곧 다시 완전한 호화상태가 됨-즉 알파전분은 그 속의 분자들이 모두 완전히 풀어진 상태이므로 전분 분해 효소들의 작용을 받기 쉬우며, 따라서 호화전분으로 된 식품은 생 전분으로 된 식품보다 소화율이 좋음-호화 정도가 큰 전분일수록 인체 내에서 소화가 잘 된다는 것을 의미함?주의사항-완료된 반죽을 마르지 않게 비닐을 덮어 30분 정도 실온에서 휴지시킴-준비한 팬 스프레드를 붓으로 고르게 바름-팬에 알맞은 반죽량을 짜 넣음-구울 때 지나치게 착색이 되지 않도록 유의6. Reagent & Equipment박력분, 베이킹파우더, 달걀, 설탕, 체, 버터, 레몬, 짤주머니, 틀, 오븐, 접시, 볼, 주걱7. Result색냄새맛기호도1조3353.52조4454.53조54134조4444[표1. 관능평가] - 4점 척도법.8. Method1. 볼에 체질한 박력분 , 베이킹파우더, 소금, 섵탕을 넣고 골고혼합.)
일반성분 분석조지방(Rose-Gottlie)실험 목적지질의 특성을 이해하고 유기용매를 사용하여 Rose-Gottlieb법을 이용하여 조지방 함량을 측정해본다.실험 시약 & 도구시료(딸기우유,초코우유), Mojonnier관, 진한암모니아수(NH4OH), 95% ethanol, Ethyl ether, 석유 ether, 유리피펫, 피펫휠러실험 날짜2018년 04월 2일(월요일) 10시30분3줄 요약식품 중의 조지방을 정량하는 데는 진한암모니아수(NH4OH), 95% ethanol, Ethyl ether, 석유ether를 이용해 조지방 함량을 측정했다. 1차는121.19g,2,3차는 121.09g 플라스크의 무게: 120.92g 즉,계산값은 (121.19-120.92/5)*100,(121.09-120.92/5)*100=5.4%, 3.4%로 측정되었다.실험 원리시료(딸기우유)-CU 헤이루 딸기우유(1,500원/500ml)'씨유의 자체 PB상품 헤이루 딸기우유Mojonnier관이란?식품의 조지방 측정에 쓰이는 관이다.특수한 모양을 한 마개가 달린 유리용기로서 , 목이 가는 부분의 아래쪽에 물층 , 위쪽에 ether층을 분리하며, 관을 기울이면 ether층만 흘러 내리도록 되어 있다.진한암모니아수(NH4OH)란?암모니아수, 또는 수산화 암모늄(Ammonium hydroxide)은 암모니아의 수용액을 일컫는 말이다. 암모니아용액에는 NH4OH 분자가 관찰되지 않고 분리할 수도 없기 때문에 엄밀하게는 수산화 암모늄이라는 용어는 잘못된 것이나, 많은 곳에서 사용되고 있다.암모니아가 증발될 수 있고 공기중에 존재하는 이산화 탄소등의 산성 기체를 흡수하기 때문에 고무, 플라스틱, 유리등의 마개로 막아서 보관하여야 한다. 온도상승과 함께 암모니아의 분압이 상승하여 폭발할 수 있으므로 30°C이하의 찬 곳에서 보관해야 한다.95% ethanol이란?에탄올(ethanol) 또는 에틸알코올(ethylalcohol), 주정(酒精)은 무색의 가연성 화합물로 알코올의 한 종류이며, 술의 주성분이다. 화학식은 C2H5OH이다. 물또는 에테르와 섞일 수 있다. 태울 경우 투명하고 옅은 푸른색을 띤 화염을 발생시키며, 물과 이산화 탄소가 만들어진다.Ethyl ether란?낮은 끓는점과 독특한 냄새를 가진 무색의 가연성 높은 액체이며 대표적인 포화지방족 에테르이다. 다이에틸에테르·에테르·에톡시에테인(ethoxyethane)이라고도 한다. 화학식 C4H10O. 무색의 유동성 있는 액체로, 분자량74.12, 녹는점-116.3℃, 끓는점34.48℃, 비중0.7135이다. 특유한 냄새가 나며, 물에는 약간 녹고, 에틸알코올이나 기타 유기용매와는 임의의 비율로 섞인다. 휘발성이 커서 인화하기 쉬우며, 증기는 폭발하기 쉽다.petroleum ether (석유 에테르)란?유기화학의 ether (R-O-R')와는 전혀 다른 물질이다. petroleum ether라는 용어는 석유산업에서 사용하는 관용어로 불이 아주 잘 붙고 휘발성이 강한 맑고 물보다 가벼운 액체로 석유시추에 많이 사용한다. 일반적으로 aliphatic hydrocarbon 혼합물이고 isohexane과 pentane을 섞어서 만든다고 한다. 즉 석유 에테르에는 에테르(R-O-R')가 없다. 혼합비율이나 혼합물 종류는 용도에 따라 조금씩 바뀐다.조지방이란?지방질은 물에 녹지 않고, ether, 석유 ether, chloroform, acetone 등의 유기용매에 녹는 일군의 화합물- 그러나 ether에 녹는 것은 순수한 지방만이 아니라 시료 중의 색소(chlorophyll,carotenoid등), wax, alkaloid, 유기산, 지용성 vitamine 등도 용출됨.따라서 유기용매에 의해 정량되는 것을 조지방(crude fat)이라 함- 우유와 유제품의 지방질: Gerber법이나 Rose-Gottlieb법이 일반적으로 사용- 난류, 마유네즈, 유제품 및 치즈의 지방질: Rose-Gottlieb 변법이라 할 수 있는 산분해법에 의해 정량- 식용유, 버터의 지방질: ether불용물을 칭량해서 정량Soxhlet’s 추출법이란?- Soxhlet 지방추출기를 사용- 시료를 추출관에 넣고 ether를 수기에 넣어 가열하면 ether는 증발되어 위의 냉각기에서 응축되고 시료중에 침지되며 사이폰(siphon)작용에 의하여 수기에 다시 돌아와 연속적으로 추출- 조지방량: 추출물에서 ether를 휘발시킨 후 그 건조물의 중량을 달아 정량사이폰(siphon)작용- 높은 쪽의 액면에 작용하는 대기압으로 인해 액체가 관 안으로 밀어 올려지는 것을 이용한 것- 낮은쪽의 액면에도 대기압이 작용하고 있으나 액체를 밀어올리는 힘은 액면의 높이차H2 ? H1 과같은 높이를 가지는 액주(液柱)의 압력만큼 약함실험방법1. 수기의 무게를 항량2. 원통여지에 1g 시료를 넣음3. 원통여지를 soxhlet 추출장치의 추출관에 넣음4. 항량이 된 수기의 1/2 ~ 1/3 정도의 에틸에테르를 넣음5. 50 ~ 70℃ 에서 약 8시간정도 추출한 수기를 분리한 후 에틸에테르를 완전히 제거6. 수기를 항량하여 지질함량을 계산Rose-Gottlieb법이란?- 주로 우유 또는 유제품의 지방질 정량에 잘 이용되는 방법- 비교적 지방질 함량이 높고 액상 또는 유상의 식품에 응용- 시료에 암모니아를 가해서 단백질과 지질의 결합을 이완시키고 ether와 석유ether의 혼합액으로 액체 추출실험방법1. 수기항량2. 마조니아관에 시료 5g 투입3. 전량이 11ml 되도록 물 첨가 후 혼합4. 암모니아수 2ml 첨가 후 약 2분 방치5. Ethanol 10ml 첨가 후 혼합6. Ether 25ml 첨가 후 혼합7. Mojonnier관의 마개를 회전시켜 증기를 빼줌8. 마개를 막고 30초간 혼합 후 마개 열어 정치9. 정치 후 층분리되면 상층부를 여과 후 항량한 수기에 모음10. Ether와 석유 ether 각 15ml씩 가하여 위의 방법으로 3회 반복기타 지방측정법산분해법이란?물에 녹지는 않지만 산에 의해 가수분해되어 액상 되는 시료를 진한 염산(HCl)으로 분해 시킨 다음에 Rose-Gottlieb법과 동일하게 ether, 석유 ether로추출을 행해서지방질을 정량하는 것.Gerber 법이란?- 유지계내에서 지방구를 보호하고 있는 지방구막을황산으로 분리시키고 유리지방을 원심분리하여 측정관 속에 모아서 지방층의 눈금을 읽어 측정하는 것- 진한 황산은 지방 이외의 우유 내의 성분을 융해하고, 그때 발생하는 고열로 지방을 액상화하여 다른 액체와의 비중차이를 크게함- 첨가한 isoamyl alcohol은 지방분리를 잘 되게 하고 지방주를 투명하게 함실험 방법-시료 5g을 Mojonnier관에 채취한다.-물을 6mL 가하여 시료를 용해시킨다.-진한 암모니아수 2mL 가하여 혼합하고 2분 이상 방치한다.-95% Ethanol 10mL 가하여 혼합한다.-Ethyl ether 25mL을 가한 후 마개를 닫고 가볍게 혼합한다.-Mojonnier관의 마개를 회전시켜 Ethyl ether의 증기가 새어나오도록 한다.-마개를 막고 30초간 격렬하게 혼합한다.-혼합 후 마개를 열어 탈기 후 정치시킨다.-다시 석유 ether 25mL 가하여 Ethyl ether의 혼합방법과 같은 방법으로 혼합 후정치시킨다.-상부의 Ether층이 투명하게 되면 이 층을 주름여과지로 여과한다.-여액은 항량해 둔 지방수기에 모은다.-관내의 물층을 재차 Ethyl ether와 석유 ether을 각각 15mL씩 가하여 위와 같은추출, 분리, 여과의 조작을 반복한다.-관의 마개, 여지, 깔대기를 소량의 Ethyl ether로 세척하여 세액을 지방수기에 모인다.-지방수기의 남은 Ether를 완전히 증발시킨다.-지방수기를 105도 건조기에서 함량시킨다.-조지방 함량을 계산한다.결과 및 고찰순서대로 1. 혼합 2.마개 밀봉후 혼합 3.소량의 Ethyl ether로 세척하여 세액을 지방수기에 모인다. 4. 완전히 건조 5. 결과값 2,3차 : 121.09 사진 1차는 121.19플라스크의 무게 : 120.921차의 조지방 함유량 : 5.4% 2,3차의 조지방 함유량 : 3.4%지방추출 후 건조한 수기의 함량1차2,3차121.19g121.09g이번 실험에서는 시료인 딸기우유를 Mojonnier관에 진한암모니아수,95% ethanol, Ethyl ether, 석유 ether를 이용하여 식품중의 조지방 함량을 구하는 실험을 하였다.우선 시료인 딸기우유 5g을 Mojonnier관에 채취하는데, 이 관에 채취하는 이유는 특수한 모양을 한 마개가 달린 유리용기로서 , 목이 가는 부분의 아래쪽에 물층 , 위쪽에 ether층을 분리하며, 관을 기울이면 ether층만 흘러 내리도록 되어 있기 때문이다. 그 다음 물을 6mL 가하여 시료를 용해시켰고, 진한 암모니아수 2mL를 가하여 혼합하였는데 시료에 암모니아를 가하면 단백질과 지질의 결합을 이완시키기 때문에 사용하며 그 다음으로 95% Ethanol 10mL , Ethyl ether 25mL을 가한 후 마개를 닫고 가볍게 혼합하는데 그 이유로서 ether,석유ether의 혼합액으로 액체를 추출하는데 , 왜 ether와 석유ether로 추출하는가 하면 지방은 물에 녹지 않으나 ether, 석유 ether 와 같은 유기용매에 녹기때문이다. 그 다음으로 Mojonnier관의 마개를 회전시켜 Ethyl ether의 증기가 새어나오도록 하고 마개를 막고 30초간 혼합하는데 이때 실험에서 기구를 다루는게 미숙하여 입구쪽의 구멍으로 많은 양을 흘렸기에 오차가 생겼을 것이다. 또한 혼합 후 마개를 열어 탈기 후 정치시키고, 다시 석유 ether 25mL 가하여 Ethyl ether의 혼합방법과 같은 방법으로 혼합 후 정치시켰고, 상부의 Ether층이 투명하게 되면 이 층을 주름여과지로 여과하였다. 다음 여액은 항량해 둔 지방수기에 모았고, 관내의 물층을 재차 Ethyl ether와 석유 ether을 각각 15mL씩 가하여 위와 같은 추출, 분리, 여과의 조작을 반복하였다. 다음 관의 마개, 여지, 깔대기를 소량의 Ethyl ether로 세척하여 세액을 지방수기에 모았고 , 지방수기의 남은 Ether를 완전히 증발시켰다.
Report실험제목 : 생물공정 균주의 스크리닝실험날짜 : 10/10 수요일실험목적 :효소 생성능이 확인되지 않은 미생물인 경우 통상 고체배지에서 육안을 통한 정성분석이 실시된다. 보통 casein의 분해력을 비교함으로써 단백질 분해력이 우수한 균주를 선발한다. Skim milk또는 casein이 첨가된 적당한 배지(nutrient agar 배지)에서 균주의 생육과 세포외 분비 효소에 의한 단백질의 분해를 육안으로 확인한다.실험장비 & 시약 :- 테스트시료 : 다양한 종류의 균주- casein이 2% 첨가된 nutrient agar plate 배지(CNA배지)실험원리 & 이론 :균주 스크리닝의 중요성 및 과정자연계에 존재하는 미생물 중에서 분리·배양이 가능한 것은 일부에 불과한 것으로 알려져 있으며, 이미 분리·배양되어 잘 알려져 있는 미생물 중에서도 산업적으로 이용되고 있는 것은 그리 많지 않다.균주 스크리닝의 방법1) 선발(screening): 자연계로 부터 새로운 물질을 생산하는 미생물 균주를 선발하는 방법2) 화학적 변형 또는 생물전환(chemical modification or bioconversion): 이미 분리된 미생물 균주에 의해서 생산되는 물질을 화학반응 또는 미생물 전환공정을 통해서 변형시켜 기능을 향상시키거나 새로운 기능을 가진 물질로 변환시키는 방법3) 균주 개량(strain improvement): 현재 사용 중인 미생물을 개량하여 효과가 향상된 물질 또는 원래 미생물에 의해서 생산되지 않던 물질을 생산하는 방법이 있다. 이 중에서 완전히 새로운 종류의 대사산물을 얻을 수 있는 유일한 방법은 새로운 물질을 생산하는 미생물 균주를 자연계로부터 분리·선발하여 이용하는 방법이다.유용 미생물 스크리닝 과정유용 물질을 생산하는 미생물을 선발하는 과정은 기본적으로분리(isolation), 검색(screening), 효용성 평가(evaluation)의 3과정으로 구성된다.분리 : 자연에서 채취한 시료의 다양한 종류의 미생물중 유용한 물질을 생산할 도 쉽게 불활성화시틸 수 있는 것이어야 한다. GRAS(Generally Recognized As Safe)급에 속하는 것을 사용하면 좋다.6. 변이의 용이성 : 자연에서 선발한 균주는 목적물질을 생성하더라도 생산수율이 낮거나 공정에 적합하지 않은 경우가 많아 인위적인 방법으로 개량하여 사용해야 한다. 산업용 균주는 쉽게 변이를 일으킬 수 있어야 하며, 변이에 의해 개량된 특성이 안정하게 유지되어야 한다.7. 균체 분리의 용이성 : 미생물에 의해서 생산되는 것은 균체 그 자체이거나, 균체 내에 함유되어 있는 물질 또는 발효과정 중 균체 밖으로 분비된 물질이다. 어느 경우에나 배양액으로부터 목적물질을 얻는 첫 단계는 배양액으로부터 균체를 분리하는 과정이다. 실험실 규모에서는 균체 분리에 주로 사용하는 원심분리를 대규모 공정에 적용하기는 어렵다. 따라서 산업용 균주는 가능하면 비용이 적게 드는 여과 또는 응집 등의 방법으로 분리할 수 있어야 한다.분리원미생물 분리원으로는 토양이 가장 많이 사용되어 왔으며, 퇴비, 하수, 해수와 동물의 배설물 등도 자주 사용되었다. 토양은 다양한 세균, 방선균 및 곰팡이 등을 풍부하게 함유하고 있는 미생물원으로, 시료로 사용할 때에는 토양의 성질, 식물상, 지표로 부터의 깊이 등도 고려하여 채취장소를 결정하여야 한다.최근에는 극한환경에서 서식하는 미생물(extremophile)들이 특이한 대사산물을 생성할 가능성이 클 것이라는 기대에서 퇴비, 온천 등의 고온환경, 극지와 같은 저온환경, 공장폐수, 산성천, 알칼리천, 염전, 사막, 심해저, 유전 등의 특수한 환경으로부터 분리한 미생물로부터 신물질을 탐색하는 연구가 활발히 진행되고 있다. 특수한 환경에서 서식하는 미생물들은 진화의 과정에서 생체 고분자물질 특히 단백질의 변화에 의하여 이상 환경인자에 대한 저항성을 획득한 것으로 볼 수 있기 때문에 내성을 갖춘 효소원으로서 관심을 모으고 있다. 예를 들면 호열성균의 효소는 대체로 내열성뿐만 아니라, 화학적 변성제, 유기용매, 계면활성제, 공급해준다.배양(Culture)은 배지와 같은 인위적 환경에서 세균을 증식시키는 조작하는 것순수배양(Pure culture)은 오직 한 종류의 세균만을 함유하고 있는 배양세균배양의 목적은 검사물내에 혼재하는 여러 종류의 세균을 개별적으로 분리(isolation)하고어떤 균인가를 동정(identification)하는 것고체배양법은? 종균의 보존, 생태 및 생리의 관찰에 이용사면 배양법은 밑에 그림과 같이 호기성균의 배양에 이용되며 백금선 으로 종균을 취해서 사면 밑에서 위로 가볍게 직선 또는 지그재그로 선을 긋는 방법천자배양(stab culture)은 혐기성균의 배양에 이용 백금선의 끝에 종균을 묻혀서 한천고층배지의 시험관의 주둥이를 아래로 하여 배지의 표면 중앙에서 내부로 향해 찌름.액체배양법은 미생물의 생태적 시험, 균의 검경, 발효 생산물의 시험, 균체를 대량으로 얻고자 하는 경우, 배양액 중에 통기를 할 필요가 있을 경우 등에 보통 이용.정치배양은 호기성균은 생육에 산소를 요구하므로 배양용기의 크기에 비하여 내부의 배지량은 적게 하고 액층을 얕게 하여 산소공급이 잘 되도록함. 따라서 플라스크와 같이 액면이 넓은 용기들을 사용한다. 반대로 혐기성균은 액층을 깊게 함.진탕배양(shaking culture)은 호기성균을 보다 활발하게 증식시키기 위하여 액체배지에 통기하는 방법이 이용. 진탕배양법은 왕복진탕기(120~140rpm)나 회전진탕기(150~300rpm)위에 배지가 든 면전플라스크를 고정시켜 놓고 항온에서 사카구치 플라스크를 씀.액침배양조(jar fermentor)에 의한 통기교반배양은? 발효조 내의 배양액은 스파저를 통해서 무균공기가 주입되는 동시에 교반되어 충분히 호기적인 상태가 이루어짐. 자켓에 냉각수를 흘러보내 배양온도를 일정하게 유지하며 때때로 pH를 측정 조절하여 최적 pH 범위 내에 지속되도록 함.효소(Enzymes)란?효소(Enzyme): 촉매능력을 가진 고도로 특수화된 고분자 단백질- 극미량으로 화학반응의 속도를 촉진시키는 일종의 촉매tease)의 총칭1. Endopeptidase: 큰 분자쇄의 내부 절단: Pepsin, trypsin,chymotrypsin, renin2. Exopeptidase: α-amino기 or α-carboxyl기(바깥쪽의 펩티드쇄) 절단->FAA생성1. Carboxypeptidase: α-카르복실기말단부터 아미노산을 분해2. Aminopeptidase: α-아미노말단으로부터 아미노산을 분해동물 protease1. chymotrypsin과 trypsin: 소, 돼지 췌장에서 생성되는 serineprotease2. pepsin: 돼지 등의 위에서 얻어진 acid protease3. Rennin (=Chymosin)- 송아지 제4위의 위액 중에서 생성되는 acid protease,응유작용 강함-> 치즈제조식물 protease- papain(파파야열매), bromelain(파인애플), ficin(무화과), 키위(actinidin)미생물 protease- subtilisin, mucor rennet 등특수 기질 특이성 protease- collagenase(collagen), elastase(elastin), keratinase(keratin)효소의 종류(1) 유도과정의 필요여부에 따라1. 구성효소(constitutive enzyme): 생육조건에 관계 없이 항상 일정량이 합성되는 효소2. 유도효소(inducible enzyme): 생물체에 일정한 물질(유도물질)을 투여했을 때 형성되는 효소(2) 존재양식에 따라1. 세포내 효소(intracellular enzyme): 세포 내부에 존재하며 세포 외부로는 유리되어 나오지 않는 효소, 세포내효소는 세포성분의 생합성(biosynthesis), 세포운동. 생존에 필요한 에너지의 저장과 생산에 관한 역할2. 세포외 효소(extracellular enzyme): 세포 외부로 분비되는 효소, 이와 같은 작용은 우리 몸 속의 위장에서도 진행되며, 밥이나 육류 그리고채소 등을 가수 분해하는 이화작용(dissimilation)이 일어남C로 측정한다. 생장저해구역의 지름은 여과지에서 가한 항미생물제의 농도 및 용해도, 확산 상수 및 전반적인 효능에 비례한다. 이 방법은 병원성 미생물이 항생제에 대해서 얼마나 민감성을 가지는지를 조사하기 위하여 일반적으로 많이 사용되며, 항균성이 나타난 clear zone의 넒이를 측정함으로써 항균성을 결정할 수 있다.실험 방법1. 살균수 또는 0.8% 살균 식염수에 활성화된 균주를 희석하여 CNA배지에서 단일 colony가 형성되도록 도말한다.2. 출현된 각 colony를 살균수 또는 0.8% 살균 식염수에 일정량 채취하여 현탁한다.3. 새로운 CNA 고체배지에 paper disc를 올려놓는다.4. 균 현탁액 100ul를 paper disc에 분주한다.5. 33℃의 항온기에서 24 ~ 48시간 배양시킨다.6. 배지상에서 투명한 환(clear zone)의 생성여부를 육안으로 확인한다.7. 투명 환의 지름을 측정하여 비교한다.참고문헌-김영권 저, 병원 미생물학, 청구문화사, 2003, p.151~173?-김정엽 남혜봉 윤기주 저, 최신병원미생물학, 청구문화사, 2005, p.151~161-김석홍 외 12명 공저, 병원미생물학, 청구문화사, 2003, p.201~219-김승곤 외 5명 공저, 최신병원미생물학, 고문사, 2000 p.109~131-이건섭 저, 병원 미생물학, 고려의학, 2002, p.151~140생물공학결과레포트8. Result대조군(양성,음성) : 육 안으로 확인 할 수 있듯이 양성대조군인 프로테아제 효소는1%,2%가 0.5%보다 clear zone의 지름이 큰 것을 육안으로 확인 할 수 있었다.또한 음성인 증류수는 clear zone의 지름이 보이지 않음을 확인 하였다(균,음성) : 균1,균2,균3,균4는 육 안으로 확인 할 때 clear zone의 지름이 균 1,2가 비슷하다, 그리고 clear zone의 지름이 균 3,4가 비슷한데 육안으로 판단할 때에 clear zone의 지름은 균1,2가 균3,4보다 좀더 큰 것을 비교 할 수 있었고 콜로니.