MTT assay

목차

Ⅰ. Object

Ⅱ. Introduction
1. 세포독성(cytotoxicity)시험
2. MTT assay
3. 프로폴리스(propolis)

Ⅲ. Materials

Ⅳ. Method

Ⅴ. Result

Ⅵ. Discussion

Ⅶ. Reference

본문내용

Ⅰ. Object
MTT assay의 원리를 이해하고 propolis의 세포독성을 측정해본다.

Ⅱ. Introduction
1) 세포독성(cytotoxicity)시험
세포독성시험은 세포상해성시험이라도고 하며, in vitro 상에서 세포에 독성이 없는 시료의 농도를 확인하는 시험이다. 세포독성시험은 어떤 표적 세포에 NK세포, 살생T세포(세포상 해성 T세포), 대식세포 등의 살생 세포(세포상해성세포), 종양괴사인자, 림프독소 등의 가용성 세포상해인자, 혹은 그의 세포 표면의 항원에 대한 특이항체와 보체를 반응시킨 경우 생기는 세포막의 투과성 변화, 핵의 손상을 포함한 표적 세포의 상해를 in vitro에서 측정하여 그 활성을 평가하는 시험이다.

2) MTT assay
MTT assay는 세포독성평가에 흔히 사용되는 방법으로 좀 더 정확하게는 미토콘드리아의 활성을 측정하는 실험이다. MTT(2,3-bis-(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-2H-tetrazolium-5 -carboxanilide) solution는 노란색으로 이는 tetrazolium salt이다. 노란색 수용성 MTT tetrazolium을 세포에 처리하면, 살아있는 세포만 대사과정이 온전하여 세포의 미토콘드리아에 있는 탈수소효소(reductase)에 의해 tetrazolium의 ring 구조가 끊어지면서 청자색을 띠는 비수용성의 MTT formazan 결정으로 환원된다. formazan은 일반적으로 dimethyl sulfoxide(DMSO)와 같은 유기용매에 녹여 흡광도를 측정한다.

참고자료

· 유영춘, 이계원, 조영호. (2016). RAW 264.7 대식세포에 미치는 병꽃나무 꽃 추출물의 항산
· MTS XTT WST
· Solubility 보통(3.6mM) 낮음(1.5mM) 높음(5mM)
· Stability 6주(냉장) 낮음 1년 이상(냉장)
· Cytotoxicity 낮음 낮음 매우 낮음
· Incubation time 1~4 h 4 ~24 h 1~4h
· Sensitivity 낮음 높음 매우 높음
· Wavelength 490㎚ 450㎚ 450㎚
· 화 및 항염증 효과. 생명과학회지, 26(3), 338-345.
· 정용환, 함영민, 윤선아, 오대주, 김창숙, 윤원종. (2018). 좁은잎천선과나무(Ficus erecta var.
· sieboldii) 잎 추출물이 대식세포 RAW 264.7 세포에서 미치는 항산화 및 항염증 효과. 한국
· 자원식물학회지, 31(4), 303-311.
· 한국분석시험연구원, http://katr.re.kr/%EC%84%B8%ED%8F%AC%EB%8F%85%EC%84%B1%E
· C%8B%9C%ED%97%98-%EC%95%88%EB%82%B4/, MTT assay, 2020.12.01.
· Naver blog, https://blog.naver.com/miri_403/222112419014, MTT assay, 2020.12.01.
· Naver blog, https://blog.naver.com/eesley/222073282746, MTT assay, 2020.12.01.
· Naver blog, https://blog.naver.com/lckoreamkt/221827230957, MTT assay, 2020.12.01.