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MTT assay

xbella
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2022.06.30
최종 저작일
2019.06
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목차

Ⅰ. Introduction 실험 원리
Ⅱ. Material & Method 실험 재료 & 방법
Ⅲ. Result 실험 결과
Ⅳ. Discussion 고찰
Ⅴ. Reference 참고문헌

본문내용

Ⅰ. Introduction
1. 실험원리
1) 세포 독성 시험(Cytotoxic test)
어떤 표적 세포에 세포표면의 항원에 대한 특이항체와 보체를 반응시킨 경우에 생기는 세포막의 투과성 변화, 핵의 손상을 포함한 표적세포의 상해를 세포 밖에서 측정하여 그 활성을 평가하는 시험이다.

-Tetrazolium salt
Tetrazolium salt는 3개의 aromatic ring이 연결된 heterocyclic compound의 통칭으로mitochondria 내에서 enzyme에 의해 metabolize 되어 formazan이라는 물질을 생성한다. 이것을 녹이면 색깔을 띄므로 이 formazan의 양을 absorbance로 정량적으로 측정할 수 있다는 점을 이용하여 cell의 proliferation 정도를 측정한다. 주로 이용되는 tetrazolium salt로는 MTT, XTT, MTS, WST-1 등이 있다.

2) MTT assay (MTT = 3- (4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide)
세포 독성을 측정하는 실험법 중 하나로 MTT(노란색)가 효소(mitochondrial succinate dehydrogenase) 반응에 의해 formazan(보라색)으로 환원되는 정도를 색의 변화로 판별하는 실험법이다. Sample 처리 후 MTT를 분주하면 MTT는 cell 내부로 들어가 mitochondria에서 insoluble 형태로 환원이 된 formazan을 만들게 된다.

참고 자료

박상대, 분자세포생물학, 아카데미서적, 1998, p.12-13
조문구, 배양공학, 유한문화사, 2004, p.195
Wikipedia ‘Ethyl Alcohol’

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