중합효소연쇄반응 PCR (Polymerase Chain Reaction) 예비레포트 [A+]

목차

1. 실험목적
2. 바탕이론
3. 기구 및 시약
4. 실험방법
5. 참고문헌

본문내용

1. 실험 목적
- PCR(중합효소 연쇄반응)의 원리와 과정을 알아보고, 핵산 (DNA, RNA)의 구조와 이들이 유전형질을 전달하는 분자로 작용하는 원리를 알아본다. 또한 Primer 및 중합효소의 역할에 대해 이해하고, 최종적으로 PCR를 통해 target DNA를 증폭시켜 전기영동으로 확인한다.

2. 바탕 이론
(1) DNA (Deoxyribonucleic acid)
- DNA는 유전물질을 담고 있는 세포의 핵 속에서 발견되는 두 종류의 핵산 중 하나로, 핵산을 구성하는 기본 구조인 리보오스의 2번 탄소에서 산소원자 하나가 없는 (deoxy-) 형태의 핵산이다. 핵산의 나머지 한 종류는 RNA (Ribonucleic acid)로, 리보오스의 2번 탄소에서 산소원자가 그대로 존재하는 형태의 핵산이다. DNA는 유전정보를 보관 및 보존하는 데 이용되며, 거의 모든 생물체의 유전물질로 사용된다. 반면 RNA는 유전정보를 발현하여 단백질을 만드는 과정 등에서 이용되며 일부 바이러스는 DNA 대신 RNA를 유전물질로 사용한다. DNA와 RNA는 모두 뉴클레오타이드를 기본 골격으로 하는 선형 중합체로 구성되어 있다. 뉴클레오타이드는 같은 양의 인산, 당, 염기 분자가 공유결합된 형태로 구성된다. 여기서 당은 5탄당인 리보오스, 염기는 DNA는 아데닌(A), 구아닌(G), 사이토신(C), 타이민(T)을 가지고 있는 반면, RNA는 타이민 대신에 유라실(Uracil, U)을 가진다. 뉴클레오타이드의 선형 중합체는 당이 서로 인산디에스터 결합으로 연결됨으로써 만들어진다. 한 뉴클레오타이드의 리보오스를 구성하는 3번 탄소의 수산화기, 즉 3’-OH가 인산기에 연결된다. 그리고 이 인산기는 다음 뉴클레오타이드의 리보오스를 구성하는 5번 탄소의 수산화기, 즉 5’-OH에 연결됨으로써 인산디에스터 결합을 구성하게 된다.

참고자료

· Touchdown PCR for increased specificity and sensitivity in PCR amplification. Korbie, D.J., Mattick, J.S. Nat Protoc., 3(9): p. 1452–1456 (2008).
· Principles and Technical Aspects of PCR Amplification. Pelt-Verkuil, E.V, Belkum, A.V., Hays, J. P.. Springer Science &Business Media, Mar 14, (2008)
· David L. Nelson, Michael M. Cox. Lehninger Principles of Biochemistry (6th edition) W. H. Freeman. (2012)
· [네이버 지식백과] DNA [deoxyribonucleic acid] (미생물학백과)
· DNA의 복제 , 중합효소 연쇄반응 (PCR) (생화학백과)