[화학공학실험] DNA제한효소실험 예비보고서(실험레포트)

소개

"[화학공학실험] DNA제한효소실험 예비보고서(실험레포트)"에 대한 내용입니다.

목차

1. 실험제목
2. 실험목적
3. 이론
4. 실험준비물(기구 및 시약)
5. 실험방법
6. 참고문헌

본문내용

2. 실험 목적
Lambda DNA을 제한효소로 절단하고, 이를 전기영동을 통해서 확인한다.

3. 이론
(1) Lambda DNA
Lambda DNA는 Lambda phage라고도 불리는 박테리오파지 λ(lambda)로부터 비롯된다. 박테리오파지 λ는 바이러스의 일종으로, 박테리아인 Escherichia coli(E. Coli, 대장균)를 숙주세포로 삼기 때문에 박테리오파지로 분류된다. 또 이는 온건성 파지로 대장균을 감염시켜 증식시킬 수 있고, 또는 자신의 유전자를 대장균의 염색체에 끼워 넣은 후 파지의 증식에 관련된 유전자를 억제시킴으로써 대장균 내에서 프로파지 형태로 존재할 수 있다.

Figure 1. 박테리오파지 λ(Lambda) Figure 2. Lambda phage genome

이 바이러스는 약 48,000개의 염기쌍을 가지고, 바이러스의 특성 때문에 박테리아 세포를 감염시키면 유전자의 일부를 발현할 수 있다. 특히 사람에 무해하기 때문에 실험실에서 훌륭한 DNA 소스로 쓰이며 다음과 같은 유전자의 일부를 갖는다.

Figure 3. Lambda DNA 일부

(2) 제한효소(Restriction enzyme)
1) 제한효소
제한효소란 DNA 분자의 특정 염기서열을 인지하여 이중가닥 DNA를 절단하는 균주 특이성을 갖는 핵산분해효소(endonuclease)이다. 이것의 원래 기능은 세포 내로 침입해 오는 Virus나 외래 DNA를 절단, 제거함으로써 그것이 복제되는 것을 막기 위한 박테리아의 자기방어 기구라 할 수 있으며, 자신의 DNA는 Methylation시켜 외부의 DNA와 구분하여 보호한다. 제한효소는 크게 Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ군으로 분류되며 우리가 흔히 쓰고 있는 것들은 회문 구조를 가진 짧은 염기쌍(4 - 6개가 가장 흔함)을 인식하는 Ⅱ군에 속하는 효소이다.

참고자료

· 화공생물공학과 공동집필, 화공생물공학실험, 동국대학교, 2016, pp.58-61.
· 이화영 외 2인, 단위조작, McGraw-Hill, 7th edition, pp.619-638.
· 김영희, 분자생물학실험서, 월드사이언스, 2008, pp.98-102.
· Garrett R.H & Grisham C.M, 생화학, 3th edition, 라이프사이언스, 2006, pp.50-63.
· 민경희, 대학미생물학, 제8판, 탐구당, 2000, pp.449-458.
· 권규혁 외 9인, 일반화학실험, 형설출판사, 2001, pp.45~49.
· Boyer R.F, Modern Experimental Biochemistry, 3rd Edition, Prentise Hall, 2000, pp.89-95.