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16S rRNA 유전자의 PCR을 통한 병원세균 동정

미지 세균의 16s rRNA를 PCR하여 종을 동정하는 실험의 레포트입니다. PCR의 원리부터 실험 방법, PCR시약의 종류와 기능, 전기영동 후 염기서열을 분석하여 NCBI Blast를 통해 세균 종을 동정하는 내용을 수록하고 있습니다.
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최초등록일 2021.01.18 최종저작일 2019.08
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16S rRNA 유전자의 PCR을 통한 병원세균 동정
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    소개

    미지 세균의 16s rRNA를 PCR하여 종을 동정하는 실험의 레포트입니다.
    PCR의 원리부터 실험 방법, PCR시약의 종류와 기능, 전기영동 후 염기서열을 분석하여 NCBI Blast를 통해 세균 종을 동정하는 내용을 수록하고 있습니다.

    목차

    1. 서론 및 PCR의 의의
    2. PCR의 원리 및 시약의 소개
    3. 기구 및 재료
    4. 실험방법 및 과정
    5. 실험결과
    6. PCR산물의 전기영동 및 염기서열 분석 결과
    7. 결과에 대한 고찰

    참고문헌

    본문내용

    PCR(polymerase chain reaction, 중합효소 연쇄반응)은 DNA특정 부위를 반복 합성하여 원하는 DNA단편을 증폭시키는 기술로 아주 적은 양의 template DNA를 충분한 양으로 증폭하여 전기영동 등을 수행시 결과가 잘 관찰될 수 있도록 한다. PCR은 매우 적은 양의 DNA로도 사용 가능한 점을 이용해 생물학 분야에서 매우 광범위하게 쓰이며 DNA지문 감별, 친자 감별, 유전병의 판별, 멸종됬거나 희소한 생물의 유전자 증폭 등에 이용되고 있다.
    16s rRNA는 침강계수가 16인, 리보솜을 구성하는 RNA이다. 16s rRNA는 단백질 번역에 필수적인 리보솜을 구성하는 유전자 이므로 돌연변이가 심하게 일어날 경우 생명체의 생존에 큰 영향을 줄 수 있는 매우 중요한 유전자이다. 따라서 진화과정에서 돌연변이가 잘 일어나지 않고 잘 보존된 특정 지역이 있는데, 미지의 세균을 동정할 때 세균의 16s rRNA의 잘 보존된 지역을 프라이머로 디자인하여 PCR을 통해 증폭을 하고 염기 서열을 시퀀싱하면 미지 세균의 종을 동정할 수 있다.

    참고자료

    · 강소영, 김은희, 김윤흥, 오명주, 이정식, 정성주, 『수산생명의학 기초실습 Ⅱ』, 도서출판 바이오사 이언스(2010), 241~247쪽.
    · Madigan, Martinko, Bender, Buckley, Stahl, 『BROCK의 핵심미생물학』, 도서출판 바이오사이언스 (2016), 79~83쪽,653~654쪽
    · Wikipedia, 중합효소 연쇄 반응, https://ko.wikipedia.org/wiki/중합효소_연쇄_반응 (2018.12.07)
    · wikipedia, Morganella morganii, https://en.wikipedia.org/wiki/Morganella_morganii (2018.12.07)
    · Takara, ,Bacterial 16S rDNA PCR Kit사용설명서, http://www.takara.co.kr/file/manual/pdf/RR180A _Korean.pdf (2018.12.07)
    · 人CoDOM, BLAST at NCBI , http://www.incodom.kr/BLAST/at_NCBI (2018.12.07)
    · BRIC 실험, PCR Premix성분, http://www.ibric.org/myboard/read.php?Board=exp_qna&id=519697 (2018.12.07)
    · Naver blog(withcoffee67) , 미생물 동정 실험,http://blog.naver.com/withcoffee67/70158243055 (20 18.12.07)
    · Naver blog(helloseas), 16s rRNA(small subunit rRNA), https://blog.naver.com/helloseas/15018981 6630 (2018.12.07)
    · Naver blog(kh48912), PCR(4)-PCR Product 정제(PCR Purification), https://blog.naver.com/kh489 12/220888303350 (2018.12.07)
    · Naver cafe(엘피스의 바이오스토리), 핵산 정제 키트, https://cafe.naver.com/elpisbio/196 (2018.12 .07)
    · Naver cafe(엘피스의 바이오스토리), Primer의 이름짓기와 방향성, https://cafe.naver.com/elpisbio/ 79 (2018.12.07)
    · 생명과학대사전, 모르가넬라모르가니균, https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=426193&cid=60 261&categoryId=60261 (2018.12.07)
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