세포생물학 계대배양 보고서

소개

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목차

1. [Experiment 1] CEM-SS cell subculture
1. Purpose3
2. Principles3-5
3. Material & apparatus 5
4. Procedure6
5. Results6-7

2. [Experiment 2] RAW 264.7 cell subculture and Freezing
1. Purpose7
2. Principles7-8
3. Material & apparatus 8
4. Procedure8-9
5. Results10

3. [Experiment 3] RAW 264.7 cell Cytotoxicity test
1. Purpose11
2. Principles11
3. Material & apparatus 11
4. Procedure11
5. Results12

4. [Discussion]12-13

본문내용

[Experiment 1] CEM-SS cell subculture
1. Purpose
A. CEM-SS cell을 일정 농도로 맞추어 가며 subculture한다.
B. Subculture를 통해 CEM-SS cell의 활성이 유지되도록 한다.
C. CEM cell subculture를 통해 suspension cell line의 subculture technique을 익힌다.
2. Principles
2.1) 세포 계대배양
세포의 계대배양이란 세포 증식을 위해 기존에 증식하고 있던 세포를 새로운 배양액 혹은 배양 접시에 옮겨 세포가 계속 증식 할 수 있도록 하는 실험 방법이다. 제한된 배양 환경 내에서는 세포가 증식을 멈추게 되는데 이를 막고 지속적으로 세포가 증식할 수 있게끔 새로운 영양분과 공간을 제공하는 것이다. 세포는 cell strain과 cell line이 있는데, cell strain은 세포 분열이 50~100 회 이상 진행되면 돌연변이가 발생하여 세포가 죽는다. Cell line의 경우 암세포, 배아 줄기세포에서 유래된 세포로 무한으로 배양이 가능한 세포들이다. 본 실험에서 사용하는 세포의 경우 CEM-SS cell line이며 세포와 세포가 맞닿아도 세포 분열 및 증식이 발생한다. 세포가 지속적으로 증식할 경우 배양 배지내의 pH가 낮아지고 영양분이 감소한다. 이러한 환경이 지속될 경우 세포의 활성이 낮아지게 된다. 각종 in vitro 실험을 진행할 때에는 활성이 좋은 세포를 사용 해야 하는데 이를 위해 지속적으로 cell을 subculture하여 세포의 활성을 유지시킬 필요가 있다. 이를 위해 cell의 doubling time을 고려하여 새로운 배양 배지나 dish로 cell을 subculture하는 것이다.
2.2) CEM-SS cell
CEM-SS cell은 Human peripheral blood 조직에서 유래되었으며 Human T4-lymphoblastoid cell의 일종이다.

참고자료

· Terms.naver.com. (2016). 계대배양. [online] Available at: http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=1235347&cid=40942&categoryId=32308 [Accessed 8 Dec. 2016].
· Atcc.org. (2016). CEM/C1 ATCC ® CRL-2265™ Homo sapiens peripheral blood acute. [online] Available at: https://www.atcc.org/Products/All/CRL-2265.aspx [Accessed 7 Dec. 2016].
· Atcc.org. (2016). CEM/C1 ATCC ® CRL-2265™ Homo sapiens peripheral blood acute. [online] Available at: https://www.atcc.org/Products/All/CRL-2265.aspx [Accessed 7 Dec. 2016].
· Atcc.org. (2016). CEM/C1 ATCC ® CRL-2265™ Homo sapiens peripheral blood acute. [online] Available at: https://www.atcc.org/Products/All/CRL-2265.aspx [Accessed 7 Dec. 2016].
· Atcc.org. (2016). CEM/C1 ATCC ® CRL-2265™ Homo sapiens peripheral blood acute. [online] Available at: https://www.atcc.org/Products/All/CRL-2265.aspx [Accessed 7 Dec. 2016].
· Sigma-Aldrich. (2016). RPMI Media - RPMI-1640 Media. [online] Available at: http://www.sigmaaldrich.com/life-science/cell-culture/classical-media-salts/rpmi-media.html [Accessed 8 Dec. 2016].
· Sigma-Aldrich. (2016). RPMI Media - RPMI-1640 Media. [online] Available at: http://www.sigmaaldrich.com/life-science/cell-culture/classical-media-salts/rpmi-media.html [Accessed 8 Dec. 2016].
· Sigma-Aldrich. (2016). RPMI Media - RPMI-1640 Media. [online] Available at: http://www.sigmaaldrich.com/life-science/cell-culture/classical-media-salts/rpmi-media.html [Accessed 8 Dec. 2016].
· Sigma-Aldrich. (2016). RPMI Media - RPMI-1640 Media. [online] Available at: http://www.sigmaaldrich.com/life-science/cell-culture/classical-media-salts/rpmi-media.html [Accessed 8 Dec. 2016].
· Sigma-Aldrich. (2016). RPMI Media - RPMI-1640 Media. [online] Available at: http://www.sigmaaldrich.com/life-science/cell-culture/classical-media-salts/rpmi-media.html [Accessed 8 Dec. 2016].
· Jochems, Carlo; et al. (April–March 2002). "The Use of Fetal Bovine Serum: Ethical or Scientific Problem?". Fund for the Replacement of Animals in Medical Experiments. 30 (2): 219–227. Retrieved 24 April 2012.
· Hayat, D. (2016). Difference Between Plasma And Serum. [online] MediMoon. Available at: http://medimoon.com/2012/07/difference-between-plasma-and-serum/ [Accessed 9 Dec. 2016].
· Sigmaaldrich.com. (2016). Antibiotic Antimycotic Solution for Cell Culture | Sigma-Aldrich. [online] Available at: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/a5955?lang=ko&region=KR&gclid=COHqkJu25tACFQybvAodSkMPTg [Accessed 9 Dec. 2016].
· Strober, W (May 2001). "Trypan blue exclusion test of cell viability.". Current protocols in immunology. Appendix 3: Appendix 3B.
· Strober, W (May 2001). "Trypan blue exclusion test of cell viability.". Current protocols in immunology. Appendix 3: Appendix 3B.
· En.wikipedia.org. (2016). Trypan blue. [online] Available at: https://en.wikipedia.org/wiki/Trypan_blue [Accessed 8 Dec. 2016].
· Strober W (2001). "Monitoring cell growth". In Coligan JE, Bierer BE, Margulies DH, Sherach EM, Strober W. Current Protocols in Immunology.
· Atcc.org. (2016). CEM/C1 ATCC ® CRL-2265™ Homo sapiens peripheral blood acute. [online] Available at: https://www.atcc.org/Products/All/CRL-2265.aspx [Accessed 7 Dec. 2016].
· Hartley JW, et al. Expression of infectious murine leukemia viruses by RAW264.7 cells, a potential complication for studies with a widely used mouse macrophage cell line. Retrovirology.
· Zeus.go.kr. (2016). ZEUS 장비활용종합포털. [online] Available at: http://www.zeus.go.kr/cafe/public/post/11663 [Accessed 9 Dec. 2016].